1、基因工程习题讲评,考纲要求: 1、基因工程的概念 2、基因操作的工具和基本步骤 3、基因工程的成果与发展前景,考题类型: 1、基础知识 (1、2、3、4、5、7、8、12) 2、能力提升(6、9、10、11) 3、归纳分析(13、14、15),解题方法: 1 看问的是什么?这一问有无前提?关键字? 2 看考的是什么? 3 看知识在教材的落点是什么?,13、限制性内切酶的识别序列和切点是GGATCC,限制性 内切酶的识别序列和切点是GATC。在质粒上有酶 的一个切点,在目的基因的两侧各有1个酶的切点。 请画出质粒被限制酶切割后所形成的黏性末端。,13、限制性内切酶的识别序列和切点是GGATCC,
2、限制性 内切酶的识别序列和切点是GATC。在质粒上有酶 的一个切点,在目的基因的两侧各有1个酶的切点。 请画出质粒被限制酶切割后所形成的黏性末端。,1、限制性内切酶的识别序列和切点是GGATCC,限制性 内切酶的识别序列和切点是GATC。在质粒上有酶 的一个切点,在目的基因的两侧各有1个酶的切点。,请画出目的基因两侧被限制酶切割后所形成的黏性末端。,1、限制性内切酶的识别序列和切点是GGATCC,限制性 内切酶的识别序列和切点是GATC。在质粒上有酶 的一个切点,在目的基因的两侧各有1个酶的切点。,请画出目的基因两侧被限制酶切割后所形成的黏性末端。,在DNA连接酶的作用下,上述两种不同限制酶切
3、割后形成的 黏性末端能否连接起来?为什么?,在DNA连接酶的作用下,上述两种不同限制酶切割后形成的 黏性末端能否连接起来?为什么?,可以连接的, 因为由两种限制性内切酶切割后所形成的黏性末端是相同的 (或是可以互补的),14、我国科学家根据农业的需要将一种来自螺旋藻中的与光合作用 相关的基因移植到普通水稻基因中,该转基因水稻的生长周期显 著缩短,光合作用速率增长70,淀粉含量大幅增加,达到了周 期短、见效快、粮食增产的目的。 (1)在该基因工程中,需使用特定的限制酶切割目的基因和质粒,以便于重组和筛选。已知限制酶的识别序列和切点是GATC,限制酶的识别序列和切点是GGATCC,根据图示判断,正
4、确的操作应该是用_切割质粒,用_来切割目的基因片段。,限制酶,限制酶,(2)为了避免转基因水稻携带的目的基因通过花粉传递给近缘物 种,最好将该基因植入水稻细胞的_的DNA中 原因是(3)简要写出确定“螺旋藻基因是转移到了水稻的叶绿体内还是 转移到染色体上?”的步骤。,叶绿体或线粒体,叶绿体或线粒体DNA遵循母系遗传,基因不会通过花粉 传递给下一代。,15、苏云金杆菌(Bt)能产生具有杀虫能力的毒素蛋白。 左图是转Bt毒素蛋白基因植物的培育过程示意图( 为抗氨 苄青霉素基因),据图回答下列问题。,(1)将图中的DNA用HindIII、BamH I完全 酶切后,反应管中有 种DNA片段。 (2)图
5、中表示HindIII与Bam I酶切、DNA连接酶连接的过程,此过程可获得 种重组质粒;如果换用Bst l与BamH l酶切,目的基因与质粒连接 后可获得 种重组质粒。,4,2,1,1.“基因的剪刀” (1)来源:主要是从 中分离纯化出来的。 (2)功能:能够识别双链DNA分子的某种特定的 ,并且使每一条链中特定部位的两个核苷酸之间的 ,因此具有 性。 (3)结果:DNA被切断。经限制酶切割产生的DNA片段末端切口可以是 粘性末端,DNA限制性内切酶,黏性末端,黏性末端,2.“基因的针线” (1)功能:缝合 。 (2)与DNA聚合酶作用的异同:DNA聚合酶只能将单个核苷酸加到已有的核苷酸片段的末端,形成磷酸二酯键。DNA连接酶是连接两个DNA片段的末端,形成磷酸二酯键。,DNA连接酶,两个DNA片段的末端,形成磷酸二酯键,使两条DNA黏性末端连接起来,DNA连接酶,返回,返回,常用的转化方法: 、将目的基因导入植物细胞:采用最多的方法是 ,其次还有 和 等。受体细胞可以是受精卵、体细胞 、将目的基因导入动物细胞:最常用的方法是 。此方法的受体细胞多是 。 、将目的基因导入微生物细胞:如:用 处理大肠杆菌 ,将目的基因导入大肠杆菌内。,受精卵,显微注射,CaCl2,