1、2.2 动物细胞工程2.2.1 动物细胞培养和核移植技术基础过关1.在动物细胞培养过程中，使用胰蛋白酶的目的是( )A.使动物组织分散为单个细胞B.去掉细胞壁，使其成为原生质体C.去掉细胞膜，暴露出原生质体便于细胞融合D.促进蛋白质水解为多肽答案 A解析 在进行动物细胞培养前，先用胰蛋白酶使组织块中的细胞相互分散开，以增加与培养液的接触面积，便于培养。2.进行动物细胞培养时，最好选用的培养材料是( )A.衰老退化的动物组织细胞B.成熟动物个体的体细胞C.动物的受精卵细胞D.健康动物胚胎或幼龄动物个体的体细胞答案 D解析 健康动物胚胎或幼龄动物体的体细胞分裂能力强，而衰老退化的动物组织细胞、成熟
2、动物个体的体细胞分裂能力差，一般不用。3.动物细胞培养过程的顺序是( )原代培养 传代培养 用胰蛋白酶处理组织，形成分散的细胞悬液A. B. C. D.答案 D解析 动物细胞培养过程的顺序为选取幼龄动物或早期胚胎组织作培养材料用胰蛋白酶处理组织，制备细胞悬液原代培养传代培养。4.对某种动物的肝肿瘤细胞进行细胞培养，下列说法正确的是( )A.取单个肝肿瘤细胞进行培养，获得细胞群的方法不属于克隆培养法B.细胞培养过程中不需考虑细菌的污染问题C.该培养液也能用来培养乙肝病毒D.在原代培养过程中，培养的细胞最终也会出现停止增殖的现象答案 D解析 A 选项的描述属于细胞层次的克隆；培养液受细菌污染后，其
3、中的营养成分会发生改变，不利于细胞的培养，B 错误；病毒的生存离不开细胞，用培养液不能培养病毒，C 错误；原代培养过程中，细胞会出现接触抑制现象，将停止增殖，D 正确。5.下列关于动物细胞培养的叙述，错误的是( )A.用于培养的细胞大都取自胚胎或幼龄动物的器官或组织B.将所取的组织先用胰蛋白酶等处理使其分散成单个细胞C.在培养瓶中要定期用胰蛋白酶使细胞从瓶壁上脱离，制成细胞悬液D.动物细胞培养只能传至 50 代左右，所培养的细胞都会衰老死亡答案 D解析 动物细胞培养传至 50 代左右，部分细胞的遗传物质可能发生改变，带有癌变的特点，能够在适宜培养条件下无限制地传代下去。6.用动、植物体的体细胞
4、进行离体培养，下列叙述正确的是( )A.都需用 CO2培养箱B.都须用液体培养基C.都要在无菌条件下进行D.都可体现细胞的全能性答案 C解析 动、植物体的体细胞进行离体培养都要在无菌条件下进行；动物体的体细胞离体培养用液体培养基，不能体现细胞的全能性；植物体的体细胞离体培养不一定用液体培养基，能体现细胞的全能性。故 C 正确。7.用于动物体细胞核移植的供体细胞一般都选用( )A.受精卵B.传代 10 代以内的细胞C.传代 1050 代以内的细胞D.处于减数第二次分裂中期的次级卵母细胞答案 B解析 培养的动物细胞，当传代至 1050 代左右时，部分细胞核型可能会发生变化，而10 代以内的细胞一般
5、能保持正常的二倍体核型。因此，在动物体细胞核移植中，为了保证供体细胞正常的遗传基础，通常采用 10 代以内的细胞。8.在克隆羊“多利”的培育过程中，没有运用的技术手段是( )A.细胞培养 B.体细胞核移植C.胚胎移植 D.基因工程答案 D解析 克隆羊“多利”的培育过程：将一只母羊(A 羊)卵细胞的细胞核吸出，获得去核卵母细胞。将另一只母羊(B 羊)的乳腺上皮细胞细胞核注入去核卵母细胞中，形成一个同时含有 B 羊核遗传物质和 A 羊细胞质的重组卵细胞。融合后的卵母细胞经过体外细胞培养形成早期胚胎，然后把这个胚胎移植到第三只羊(C 羊)的子宫中，继续发育。该过程既涉及体细胞核移植技术，又涉及胚胎移
6、植技术，这两项技术操作都需细胞培养技术作为手段。故正确答案为 D。能力提升9.一只羊的卵母细胞被另一只羊的体细胞核移植后，这个卵细胞经过多次分裂，再植入到第三只羊的子宫内发育，结果产下了一只羊羔，这种克隆技术具有多种用途，但是不能( )A.有选择地繁殖某一性别的家畜B.繁殖家畜中的优秀个体C.用于保存物种D.改变动物的基因型答案 D解析 目前的克隆技术是将动物的一个细胞的细胞核植入一个去核的卵母细胞中，经过试管培养一段时间后，再移入另一个体的子宫内发育、分娩的技术。通过该技术能够保持亲本的优良性状，保持性别不变，也能够用于保存物种，但不能改变动物的基因型。10.生物技术的发展速度很快，已灭绝生
7、物的“复生”将不再是神话。如果世界上最后一头野驴刚死亡，以下提供的“复生”野驴个体的方法中能够成功的是( )A.将野驴的体细胞取出，利用细胞培养技术，可培育成新个体B.将野驴的体细胞两两融合，再经组织培养培育成新个体C.取出野驴的体细胞核移植到母家驴的去核卵细胞中，经孕育培养成新个体D.将野驴的一个基因导入家驴的受精卵中，培育成新个体答案 C解析 野驴的体细胞的全能性已经受到限制，不能经过培养形成新个体；将野驴的一个基因导入家驴的受精卵中，培育成的是带有野驴基因的家驴；野驴的体细胞核中具有发育成野驴的全部基因，因此通过核移植技术，可使野驴“复生” 。11.回答下列有关动物细胞培养的问题：(1)
8、在动物细胞培养过程中，当贴壁细胞分裂生长到细胞表面_时，细胞会停止分裂增殖，这种现象称为细胞的_。此时，瓶壁上形成的细胞层数是_。要使贴壁的细胞从瓶壁上分离下来，需要用酶处理，可用的酶是_。(2)随着细胞传代次数的增多，绝大部分细胞分裂停止，进而出现_的现象；但极少数细胞可以连续增殖，其中有些细胞会因遗传物质发生改变而变成_细胞，该种细胞的黏着性_，细胞膜表面蛋白质(糖蛋白)的量_。(3)现用某种大分子染料，对细胞进行染色时，观察到死细胞被染色，而活细胞不被染色，原因是_。(4)检查某种毒物是否能改变细胞染色体的数目，最好选用分裂到_期的细胞用显微镜进行观察。(5)在细胞培养过程中，通常在_条
9、件下保存细胞。因为在这种条件下，细胞中_的活性降低，细胞_的速率降低。(6)给患者移植经细胞培养形成的皮肤组织后，发生了排斥现象，这是因为机体把移植的皮肤组织当作_进行攻击。答案 (1)相互接触 接触抑制 单层(或一层) 胰蛋白酶 (2)衰老甚至死亡 不死性 降低 减少(3)活细胞的膜具有选择透过性，大分子染料不能进入活细胞内，故活细胞不能着色(或死细胞的膜丧失了选择透过性，大分子染料能够进入死细胞内着色) (4)中(5)冷冻(或超低温、液氮) 酶 新陈代谢 (6)抗原解析 (1)动物细胞培养过程中具有贴壁生长和接触抑制的特点，若要传代培养应先用胰蛋白酶处理，使其从瓶壁上分离下来。(2)在传代
10、培养过程中，随着传代次数的增多，绝大多数细胞停止分裂，进而衰老甚至死亡，极少数细胞遗传物质发生改变，克服细胞寿命的自然极限，获得不死性，这种细胞黏着性降低，细胞膜表面的糖蛋白减少。(3)活细胞的细胞膜具有选择透过性，而死细胞的细胞膜则没有这种特性，所以大分子染料可以对死细胞染色而不能对活细胞染色。(4)若要观察染色体的数目，最好选择细胞分裂中期的细胞，因为分裂中期染色体螺旋程度最高，形态固定，数目清晰。(5)低温可以抑制酶的活性，从而降低细胞的新陈代谢速率。(6)皮肤移植后发生排斥现象，是因为机体把移植的皮肤组织当作抗原进行攻击。12.现有 A 和 B 两个肉牛品种，A 品种牛的细胞组成可表示
11、为 A 细胞核、A 细胞质；B 品种牛则为 B 细胞核、B 细胞质，请分析回答下列问题：(1)如果要获得一头克隆牛，使其细胞由 A 细胞核和 B 细胞质组成，基本步骤是：从 A 品种牛体内取出体细胞，进行体外培养。然后再从培养细胞中取出_注入 B 品种牛的_卵母细胞，经过某种刺激和培养后，可形成胚胎，该胚胎被称为_，将该胚胎移入代孕母牛的_中，通过培育可达到目的。(2)克隆牛的产生说明_具有全能性。克隆牛的性状主要表现_品种牛的特征。由 A、B 两品种杂交得到的牛和克隆牛相比，杂交牛细胞核的遗传物质来自_个亲本，细胞质主要来自_性亲本，克隆牛和杂交牛的遗传物质组成_(填“相同”或“不同”)。答
12、案 (1)细胞核 去核 重组胚胎 子宫 (2)动物体细胞核 A 两 雌 不同解析 (1)依据题意可知，要获得由 A 细胞核和 B 细胞质组成的重组细胞，需要提取 A 细胞核，然后与去掉 B 细胞核的 B 细胞质进行重组，得到重组细胞，进一步培养得到重组胚胎，再进行胚胎移植，移植到代孕母牛的子宫里进行培育。(2)克隆动物利用动物细胞细胞核的全能性，得到的新个体的性状主要由细胞核决定，与供核母牛的性状基本一致，杂交牛是由精子和卵细胞融合得到的受精卵发育来的，细胞核来自两个亲本，由于精子含有很少的细胞质，受精卵的细胞质主要来自卵细胞，所以杂交牛和克隆牛的遗传物质不同。13.美国威斯康星州的一个奶牛场
13、有一头奶牛，年产奶量达 30.8 t，我国奶牛产奶量年平均水平仅为 34 t。某人用该高产奶牛的耳朵细胞，采用核移植技术获得高产奶牛(如图)，请据图回答下列问题：(1)目前完成的方法有_、梯度离心、紫外光短时间照射及化学物质处理等。(2)过程中选择去核卵母细胞作为受体细胞的原因是_。(3)过程所利用的技术是_，其原理是_。(4)该实验的成功说明已分化的耳朵细胞的细胞核中含有与_一样的全套基因，这种繁殖方式属于_。(5)若研究发现该高产奶牛线粒体发达，故它的产奶量高，则小牛 d 成年后具有这一优良性状吗？_。你的依据是_。答案 (1)显微操作去核法 (2)卵母细胞体积大，易操作，营养物质丰富，且
14、细胞质中含有激发细胞核全能性表达的物质 (3)动物细胞培养 细胞增殖 (4)受精卵 无性繁殖 (5)不具有 线粒体中的基因一般通过细胞质传递给后代，而小牛 d 的细胞质主要来自于牛a解析 (1)去核的方法有显微操作去核法、梯度离心、紫外光短时间照射及化学物质处理等方法。(2)在核移植中常用去核卵母细胞作为受体细胞，是因为卵母细胞内含有丰富的营养物质；体积比较大，容易操作。(3)过程属于动物细胞培养，其原理是细胞增殖。(4)该实验的成功证明了动物细胞核具有全能性，因为细胞核中含有和受精卵一样的全套基因。(5)线粒体位于细胞质中，主要来源于受体细胞，因此小牛 d 没有产奶量高的优良性状。走进高考1
15、4.(2015天津卷，6 改编)2015 年 2 月 3 日，英国议会下院通过一项历史性法案，允许以医学手段培育“三亲婴儿” 。三亲婴儿的培育过程可选用如下技术路线。据图分析，下列叙述错误的是( )A.该技术可避免母亲的线粒体遗传病基因传递给后代B.捐献者携带的红绿色盲基因不能遗传给三亲婴儿C.三亲婴儿的染色体全部来自母亲提供的细胞核D.三亲婴儿的培育要用到动物细胞培养技术答案 C解析 A 项，三亲婴儿细胞质基因主要来自捐献者卵母细胞，可避免母亲的线粒体遗传病基因传递给后代，故正确。B 项，三亲婴儿细胞核基因(染色体)来自母亲和父亲，捐献者携带的红绿色盲基因(细胞核基因)不传给该婴儿，故正确。
16、C 项，由 B 项分析可知该项错误。D 项，三亲婴儿的培育还需要动物细胞培养技术，故正确。15.(2015安徽卷，31 节选)科研人员采用转基因体细胞克隆技术获得转基因绵羊，以便通过乳腺生物反应器生产人凝血因子医用蛋白，其技术路线如图。(1)由过程获得的 A 为_。(2)在核移植之前，必须先去掉受体卵母细胞的细胞核，目的是_。受体应选用_期卵母细胞。(3)采用胎儿成纤维细胞进行转基因体细胞克隆，理论上可获得无限个转基因绵羊，这是因为_。答案 (1)含目的基因的表达载体 (2)保证核遗传物质来自含目的基因的成纤维细胞 M中(3)整合有目的基因的成纤维细胞可进行传代培养16.(2013浙江卷，6)
17、实验小鼠皮肤细胞培养(非克隆培养)的基本过程如图所示。下列叙述错误的是( )实 验 小 鼠 甲 皮 肤 组 织 乙 皮 肤 细 胞 丙 培 养 细 胞 1 丁 培 养 细 胞 2A.甲过程需要对实验小鼠进行消毒B.乙过程对皮肤组织可用胰蛋白酶处理C.丙过程得到的细胞大多具有异倍体核型D.丁过程得到的细胞具有异质性答案 C解析 动物细胞培养需要无毒无菌的环境，甲过程是指从实验小鼠身上取下皮肤组织，该过程需要对小鼠进行消毒处理，A 项正确；乙过程表示将得到的皮肤组织分散成单个细胞制备成细胞悬液，可用胰蛋白酶或胶原蛋白酶进行处理，B 项正确；丙过程表示原代培养，此时的细胞仍能保持正常的二倍体核型，C 项错误；丁过程表示传代培养，此时得到的细胞会克服细胞寿命的自然极限，获得不死性，这些细胞已经发生突变，正在朝着等同于癌细胞的方向发展，D 项正确。
