1、专题 16 生物技术实践1为了分离和纯化高效分解石油的细菌，科研人员利用被石油污染过的土壤进行如图A 所示的实验。请回答下列问题：(1)配制好的培养基通常使用_法灭菌。步骤与步骤中培养基成分相比，最大的区别是_。(2)同学甲进行步骤的操作，其中一个平板经培养后的菌落分布如图 B 所示。该同学的接种方法是_，出现图 B 结果可能的操作失误是_。(3)同学乙也按照同学甲的接种方法进行了步骤的操作：将 1 mL 样品稀释 100 倍，在 3 个平板上分别接入 0.1 mL 稀释液；经适当培养后，3 个平板上的菌落数分别为 56、58和 57。据此可得出每升样品中的活菌数为_个。(4)步骤需要振荡培养
2、，原因是_。(5)步骤后取样测定石油含量的目的是_。2蚕豆种子具有高蛋白、富淀粉、低脂肪等特点，蚕豆酱就是以脱壳蚕豆为主要原料加工而成的传统发酵产品。我国生产蚕豆酱的历史悠久，蚕豆酱的自然发酵中有米曲霉、黑曲霉、酵母菌、乳酸菌等共同参与，其中米曲霉、黑曲霉是优势菌种。请回答下列问题：(1)米曲霉、乳酸菌细胞结构的共同点是都具有_等结构。(2)若要获得米曲霉菌落并加以观察，则培养基中除需添加_等各类营养成分外，还需添加_。(3)米曲霉等分泌的_可将原料中的大分子有机物等水解成小分子产物。大分子有机物在酵母菌、乳酸菌的作用下，产生_、有机酸、酯类等，构成蚕豆酱特有的香气。(4)下表表示探究温度对蚕
3、豆酱发酵影响的实验结果：温度/ 总酸/% 氨基酸态氮 还原糖含量/%感官得分前发酵 40 后发酵 33 0.25 0.30 3.37 8.0前发酵 40 后发酵 37 0.29 0.35 4.94 8.2前发酵 45 后发酵 33 0.36 0.40 7.19 8.5前发酵 45 后发酵 37 0.43 0.58 9.38 9.5根据上表结果可以确定，蚕豆酱发酵的适宜温度为_。3我国最早的诗集诗经中有“田中有庐，疆场有瓜是剥是菹”的诗句，其中“庐”和“瓜”是蔬菜， “剥”和“菹”是腌制加工的意思。泡菜是一种历史悠久、深受群众喜爱的传统美食。某兴趣小组的同学进行了制作泡菜的实践活动。回答下列问题
4、：(1)按清水与盐质量比为 41 的比例制好盐水后，需将盐水煮沸，其作用是_。(2)为测定泡菜中亚硝酸盐含量，首先要配制_标准显色液，并与样品进行比较。泡菜制作的第 35 天亚硝酸盐含量较高不宜食用，原因是_。(3)若将稀释 105倍的某细菌菌液，用直接计数法和稀释涂布平板法进行计数。直接计数法：用吸管吸取 0.1 mL 该菌液，滴于血球计数板上的_边缘，待该细菌全部沉降到计数室底部，用显微镜直接计数。并计算出每升菌液的细菌数目。稀释涂布平板法计数：在五个固体培养基上分别接种 0.1 mL 该细菌菌液，适宜条件下培养一段时间后，培养基上的菌落数分别为：20、40、152、154、156，则每升
5、菌液中细菌数量为_个。正常操作情况下，上述两种计数法中，_统计获得的数目偏多，原因是_。4回答下列与酵母菌有关的问题：(1)分离培养酵母菌通常使用_(填“牛肉膏蛋白胨” “MS”或“麦芽汁琼脂”)培养基，该培养基应采用_灭菌法灭菌。若将酵母菌划线接种在平板上，培养一段时间后会观察到菌落，菌落的含义是_。(2)酵母菌液体培养时，若通入氧气，可促进_(填“菌体快速增殖” “乙醇产生”或“乳酸产生”)；若进行厌氧培养，可促进_(填“菌体快速增殖” “乙醇产生”或“乳酸产生”)。(3)制作面包时，为使面包松软通常要在面粉中添加一定量的酵母菌，酵母菌引起面包松软的原因是_。5大肠杆菌是与我们日常生活联系
6、非常密切的细菌，请回答有关检测饮用水中大肠杆菌的问题：(1)检测饮用水中大肠杆菌的含量时，通常将样品进行一系列的梯度稀释，将不同稀释度的水样用涂布器分别涂布到琼脂固体培养基的表面进行培养，然后记录菌落数量，这种方法称为_。判断下图所示的 4 个菌落分布图中，不可能是用该方法得到的是_。(2)用上述方法统计样本中菌落数时是否需要设置对照组？_，其原因是需要判断培养基_，对于固体培养基应采用的检测方法是将_的培养基在适宜的温度下放置一段时间，观察培养基上是否有菌落产生。(3)在微生物培养操作过程中，为防止杂菌污染，需对培养基和培养器皿进行_(填“消毒”或“灭菌”)处理；操作者的双手需要进行清洗和_
7、；静止空气中的细菌可用紫外线杀灭，其原因是紫外线能使其内蛋白质变性，还能损伤它的_的结构。(4)检测大肠杆菌实验结束后，使用过的培养基及其培养物必须经过_处理才能丢弃，以防止培养物的扩散。6经人工诱变获得的天冬氨酸缺陷型菌株，菌体自身不能合成天冬氨酸，必须从外界环境中获取天冬氨酸才能生长繁殖。如图是科研人员利用“影印法”筛选天冬氨酸缺陷型菌株的部分过程(注：基本培养基中不含氨基酸，完全培养基中含所有种类的氨基酸)。回答下列问题：(1)过程接种的方法是_。待测培养皿中的培养基是_(填“基本”或“完全”)培养基。(2)过程是将印在同一块丝绒布上的菌落，先后转印至两个不同的平板上。该过程应该先转印到
8、_(填“基本”或“完全”)培养基上，原因是_。(3)完成过程的转印并在 28 的培养箱中培养 2 d 后，两个平板上出现的菌落有的相同，有的不同。完全培养基上出现的菌落 A 和菌落 B 中，不可能是天冬氨酸缺陷细菌株的是菌落_(填“A”或“B”)，原因是_。(4)为了进一步鉴定筛选到的菌株确实是天冬氨酸缺陷型菌株，科研人员又制备了甲、乙两个平板，这两个平板中营养成分的差异是_。将待鉴定菌种接种到两个平板中，置于适宜条件下培养一段时间后，若观察到两个平板中菌落的生长情况是_，则说明该菌株是天冬氨酸缺陷型菌株。7水果酵素饮料中含较多的天然成分。回答下列问题：(1)水果酵素液是一种新型的活菌饮料，由
9、酵母菌、醋酸菌等微生物利用水果中的蔗糖等营养物质共同发酵产生。在接种活菌前，将水果果汁煮沸的目的是_，在发酵的过程中，发现先出现酒味后出现醋味，从物质代谢的角度分析，原因是_。(2)调制水果酵素饮料所用的胡萝卜素，通常采用_法提取，理由是_。(3)调制水果酵素饮料所用的茉莉芳香油的提取流程如下：茉莉花水过程 A油水混合物油层分离与粗提取过程 B过滤茉莉油。过程 A 的方法是_，过程 B 的目的是_。答案1（1）高压蒸汽灭菌 步骤的培养基中石油是唯一碳源（2）稀释涂布平板法 涂布不均匀（3）5.710 7（4）使石油分布均匀，与细菌充分接触，有利于细菌的繁殖(答案合理即可)（5）筛选出分解石油能
10、力最强的细菌2 (1)细胞膜、细胞质(基质)、核糖体(2)碳源、氮源、水和无机盐 琼脂(3)蛋白酶、淀粉酶、脂肪酶 乙醇(4)前发酵为 45 、后发酵为 37 3 （1）除去盐水中的氧气和杀菌（2）亚硝酸盐 适宜的 pH、温度和一定微生物作用下亚硝酸盐转变成致癌物质亚硝胺（3）盖玻片 1.25510 11 _直接计数法直接计数法无论菌体死活均被计数，而稀释涂布平板法当两个或多个细胞连在一起时，平板上观察到的只是一个菌落(合理答案给分)_4 (1)麦芽汁琼脂 高压蒸汽 由一个细胞繁殖而来的肉眼可见的子细胞群体(2)菌体快速增殖 乙醇产生(3)酵母菌分解葡萄糖会产生 CO2，CO 2使面包松软5 (1) 稀释涂布平板法 D(2) 需要 是否被杂菌污染(灭菌是否合格) 未接种(3) 灭菌 消毒 DNA(4)灭菌6 (1)稀释涂布平板法 完全 (2)基本 防止基本培养基混入氨基酸(3)B B 菌落在基本培养基能生长繁殖，说明它能合成天冬氨酸(4)是否含有天冬氨酸 含有天冬氨酸的平板上生长有菌落，另一个平板不能生长7 (1)去除杂菌(或消毒) 酵母菌先进行发酵生成乙醇，然后醋酸菌将乙醇变为醋酸 (2)萃取 胡萝卜素易溶于有机溶剂 (3)水蒸气蒸馏 除水
