1、规范练 2 现代生物科技专题相关应用1(2018浙江 4 月选考， 32 节选)回答与基因工程和植物克隆有关的问题：(1)将含某抗虫基因的载体和含卡那霉素抗性基因的载体 pBI121 均用限制性核酸内切酶EcoR酶切，在切口处形成_。选取含抗虫基因的 DNA 片段与切割后的pBI121 用 DNA 连接酶连接，在两个片段相邻处形成_，获得重组质粒。(2)已知用 CaCl2处理细菌，会改变其某些生理状态。取 CaCl2处理过的农杆菌与重组质粒在离心管内进行混合等操作，使重组质粒进入农杆菌，完成_实验。在离心管中加入液体培养基，置于摇床慢速培养一段时间，其目的是_，从而表达卡那霉素抗性基因，并大量
2、增殖。(3)取田间不同品种水稻的幼胚，先进行_，然后接种到培养基中培养，幼胚发生_形成愈伤组织，并进行继代培养。用含重组质粒的农杆菌侵染愈伤组织，再培养愈伤组织，以便获得抗虫的转基因水稻。影响愈伤组织能否成功再生出植株的因素有：培养条件如光温、培养基配方如植物激素配比、以及_(答出 2 点即可)。2(2017浙江 11 月选考， 32 节选)回答与植物克隆和动物克隆有关的问题：(1)利用植物愈伤组织获得再生植株主要有两条途径：一是由愈伤组织的细胞先分化产生芽和根后再形成一个完整植株的_途径。二是由愈伤组织的细胞产生胚状体后再萌发形成完整植株的胚胎发生途径。另外，也可不通过愈伤组织阶段而直接采用
3、带腋芽的茎段培养成丛状苗，再诱导生根获得再生植株，其原因是腋芽中存在_。(2)利用植物克隆培育新品种，一方面可利用带有目的基因的_侵染植株，或将目的基因通过_的方法导入植物细胞、组织或器官获得转基因植株。另一方面利用异源植物的_进行融合产生杂种植株，或利用异源植物在试管内进行_，对其产生的胚进行培养产生杂种植株。(3)下列属于植物克隆和动物克隆共有的培养方法是_(A.悬浮培养、器官培养 B贴壁培养、传代培养 C器官培养、愈伤组织培养 D原生质体培养、传代培养)。3(2018杭州学军中学 3 月选考模拟) 回答克隆技术和胚胎工程有关的问题：(1)将高度分化的离体植物组织进行培养，脱分化形成_ ，
4、再诱导出_的顶端分生组织，并由此可再生出新的植株。(2)利用高度分化的动物细胞进行克隆动物，必须利用_ 技术形成重组细胞，这种技术需要借助精密的_和高效率的细胞融合法。(3)胚胎移植的途径主要有两条：一是体外受精产生受精卵，形成受精卵需经_，才能进行胚胎移植；二是体内受精，一定时间后从生殖器官中取出早期胚胎移植到受体相应部位。这两种途径对受体动物的要求是_。(4)与植物克隆相比动物难以克隆，这是由于在动物发育过程中，细胞出现了_。A染色体畸变造成遗传物质的丢失B基因突变产生了等位基因C基因选择性表达合成了专一蛋白质D减数分裂过程中同源染色体配对紊乱4(2018稽阳联谊学校 3 月联考) 回答下
5、列关于动物的克隆问题：(1)基因型不同的细胞间的细胞融合就是_，人鼠细胞融合通常会丢失_的染色体，可以进行人类基因的定位。(2)科学家将_生成细胞和瘤细胞进行杂交，形成杂交瘤细胞，对一种克隆的杂交瘤细胞进行传代培养，形成单抗_，就能长久地得到单一的单抗，单抗比一般抗血清的抗体优越得多的原因是_。(3)科学家从一个流产的雌性猕猴的胚胎中，取两个体细胞的核，并分别进行核移植，发育成双胞胎克隆猴，该双胞胎克隆猴相当于是_( 填“同卵”或“异卵”) 双生。克隆动物的成功说明了在胚胎发育和个体发育中，细胞质具有调控_发育的作用。5(2018宁波市 3 月新高考模拟) 下图为某大学农学部奶牛繁育基地成功培
6、育出的一头携带转入赖氨酸基因的克隆牛的大致过程，请据图回答问题：(1)图中获得赖氨酸基因常用的酶是_，若我们已知赖氨酸基因的碱基序列，一般釆用_法获取该目的基因。(2)黑白花奶牛乳腺组织常用_分散成单细胞，然后作为核供体。将得到的体细胞的细胞核移植到去核的未受精的卵细胞中才能发育成新个体，其原因是_(A.卵细胞大，便于操作 B卵细胞含有的营养物质多 C 卵细胞的细胞质可使体细胞核全能性得到表达 D重组细胞才具有全能性 )。(3)从到的过程可获得较多的遗传同质早期胚胎，常采用的方法是进行_。(4)克隆牛的诞生过程中涉及到的现代生物技术主要有：_、_等。6(2018台州中学第四次通练) 动物和植物
7、都可以通过克隆进行无性繁殖。回答下列关于克隆和组织细胞培养的问题：(1)植物克隆的技术基础是_。某些植物在进行多次继代组织培养后，将难以从愈伤组织中分化形成从幼苗和根，这说明培养物的_能力下降。(2)将二倍体甘蓝和二倍体白菜的原生质体融合，再进行组织培养，形成的杂种植株为_倍体。上述过程属于_技术。(3)细胞杂交是指_的细胞之间的融合。由于细胞杂交时染色体容易丢失，所以用来进行基因的_。细胞融合的一项重要应用是单克隆抗体的制备。单克隆抗体的作用之一是可作为特异性_，研究相应的抗原蛋白。答案精析1(1)粘性末端 磷酸二酯键 (2)转化 使 CaCl2处理过的农杆菌恢复细胞的正常状态 (3)消毒
8、脱分化 水稻的基因型、愈伤组织继代的次数解析 (1)构建重组质粒时限制性核酸内切酶剪切得到的是粘性末端，DNA 连接酶连接两个DNA 片段之间形成的是磷酸二酯键。(2)目的基因导入植物细胞常用农杆菌转化法。Ca 2 处理方法可增加细菌细胞壁的通透性，让其处于感受态，以利于重组质 粒导入。故 细胞要正常表达相关基因，应让其恢复为正常状态。(3)不同种类植物或同种植物的不同基因型个体之间存在遗传 的差异，细胞全能性的表达程度大小不同，小麦水稻等作物在多次继代培养后，会 丧失细胞全能性的表达能力。2(1)器官发生 分生组织 (2)农杆菌 显微注射 原生质体 受精 (3)A解析 (1)外植体经脱分化后
9、形成愈伤组织，由愈伤组织形成再生植株主要有两条途径：一是由愈伤组织的细胞先分化产生芽和根后再形成一个完整植株，是植物 组织培养的器官发生途径；二是由愈伤组织的细胞产生胚状体后再萌发成完整植株，是植物组织培养的胚胎发生途径。不通过愈伤组织阶段而直接采用 带腋芽的茎段培养成 丛状苗， 这说明腋芽中含有分生组织，而分生组织中含较高的细 胞分裂素， 细胞分裂素与生长 素之比较高可促进芽的生长。(2)将目的基因导入植物细胞，可以用含有目的基因的 农杆菌直接侵染，或者用显微注射法导入；异源植物可以利用植物体细胞杂交技术或者受精之后的胚胎进行培养，也可以获得杂种植株。(3)贴壁生长是动物细胞培养时的特性；愈
10、伤组织是指植物 细胞在组织培养过程中形成的一种排列疏松而无规则的无定形状态、高度液泡化的薄壁 细胞，动物细胞无愈伤组织培养；传代培养应用于动物细胞培养过程中。3(1)愈伤组织 芽和根 (2)核移植 显微操作仪 (3) 胚胎体外培养 同期发情且未配种 (4)C解析 (1)植物组织培养技术是在人为创造的无菌条件下将离体的植物器官 (如根、茎、叶、茎段、原生质体)、组织或细胞置于培养基内，并放在适宜的 环 境中， 进行连续培养以获得细胞、组织或个体的技术。其流程是：将高度分化的离体植物组织进 行培养，脱分化形成愈 伤组织，再诱导出芽和根的顶端分生组织，并由此可再生出新的植株。(2)动物克隆是一种通过
11、核移植过程进行无性繁殖的技术。不经过有性生殖过程，而是通过核移植生产遗传结构与细胞核供体相同的动物个体的技术。利用高度分化的动物细胞进行克隆动物，必须利用核移植技术形成重 组细胞， 这种技术需要借助精密的 显微操作仪和高效率的细胞融合法。(3)胚胎移植的途径主要有两条：一是体外受精产生受精卵，形成的受精卵需经胚胎体外培养，才能进行胚胎移植；二是体内受精，一定时间后从生殖器官中取出早期胚胎移植到受体相 应部位。这两种途径对受体动物的要求是同期 发情且未配种。(4)动物难以克隆的原因是由于基因的选择性表达导致动物的体 细胞均已发生了分化，并合成了专一蛋白质，基因组中基因的活 动很不完全，不能像受精
12、卵那样发挥细胞的全能性。4(1)细胞杂交 人 (2) 抗体 细胞株 单抗识别抗原部位专一，而一般抗血清的抗体是一群识别不同抗原部位的抗体混合物 (3)同卵 细胞核解析 (1)基因型不同的细胞间的细胞融合就是细胞杂交；人鼠 细胞融合通常会丢失人的染色体，可以进行人类基因的定位。(2)科学家将抗体生成细胞和瘤细胞进行杂交，形成杂交瘤细胞；对一种克隆的杂交瘤细胞进行传代培养，可形成单抗细胞株，就能长久地得到单一的单 抗，单抗比一般抗血清的抗体优越得多的原因是单抗识别抗原部位专一，而一般抗血清的抗体是一群 识别不同抗原部位的抗体混合物。(3)用于核移植的两个细胞核都来自同一个流产的胚胎，即来自同一个受
13、精卵有丝分裂产生的子细胞，所以该双胞胎克隆猴相当于同卵双生；克隆 动物的成功 说明了在胚胎发育和个体发育中，细胞质具有调控细胞核 发育的作用。5(1)限制性核酸内切酶 化学合成 (2)胰蛋白酶 C (3) 胚胎分割 (4)核移植技术 胚胎分割解析 (1)图中的赖氨酸基因为目的基因，获得目的基因常用限制性核酸内切酶。若我们已知赖氨酸基因的碱基序列，一般 釆用化学合成法获取该目的基因。(2)常用胰蛋白酶处理黑白花奶牛乳腺组织，使其分散成单细胞，然后作为核供体。卵细胞的细胞质可使体细胞核全能性得到表达，所以需将得到的体 细胞的细胞核移植到去核的未受精的卵细胞中才能发育成新个体。(3)从到的过程，常采
14、用胚胎分割技术，以获得较多的遗传同质早期胚胎。(4)分析图示可知，克隆牛的诞生过程中涉及到的现代生物技术主要有：核移植技术、胚胎分割技术等。6(1)植物组织培养 (胚胎发生和 )器官发生/器官形成 (2)( 异源) 四 植物细胞工程 (3)基因型不同 定位 探针解析 (1)植物克隆的技术基础是植物组织培养。植物组织培养经过脱分化和再分化，可形成根和幼苗。但在进行多次继代 组织培养后，将 难以从愈伤组织 中分化形成从幼苗和根，这说明培养物的器官发生能力下降。(2)二倍体甘蓝和二倍体白菜进行植物体细胞杂交，形成了异源四倍体。植物体细胞杂交属于植物细胞工程。(3)细胞杂交是指基因型不同的细胞之间的融合。利用细胞杂交时染色体容易丢失，可以对基因进行定位。单克隆抗体的作用之一是采用抗原 抗体杂 交技术，利用抗体作 为特异性探针，研究相应的抗原蛋白。
