1、DBXX/T XXXXXXXXX吉祥草种子种苗质量标准技术规程地方标准编 制 说 明1 立项背景我国传统中药材（民族药材）吉祥草为百合科吉祥草的新鲜或干燥全草。收载于贵州苗族医药研究与开发（1999 年）、贵州省中药材质量标准（1988 年版）及贵州省中药材、民族药材质量标准（2003 年版）及江西省中药材标准、广西中药材标准、中药大辞典。贵州省中药材、民族药材质量标准（2003 年版）称：吉祥草味苦、甘，性凉。归肺、大肠经。具有滋阴润肺，凉血止血功能。用于肺燥咳喘，阴虚咳嗽，咯血，遗精，跌扑损伤。吉祥草还是贵州苗族习用药材，苗药主治肺燥咳嗽，阴虚咳嗽，咽喉肿痛，目赤翳障，吐血，衄血，便血，肺
2、结核，急、慢性支气管炎，哮喘，黄疸型肝炎，慢性肾盂肾炎，遗精，跌扑损伤，骨折，痈肿疖疮等症。吉祥草为贵州百灵企业集团制药股份有限公司的著名苗药制剂“咳速停”糖浆（胶囊）的主要原料，咳速停”是贵州省首个单品过亿的中药制剂产品，2016 年需求量达到 1200 余吨，而且逐年以 20%左右的幅度递增。此外，全国其它一些药业如贵州万才药业公司的“复方吉祥草含片”、“宜肝乐颗粒”，贵州和仁堂药业公司的“咳清胶囊 ”，贵州君之堂制药公司的“ 肝复颗粒”、 贵州金桥药业公司的“ 六味伤复宁酊”，以及江西九华药业公司的“腰疼丸”等都生产有以吉祥草为主要原料的产品。据不完全统计，2016 年全国范围内吉祥草药
3、材的需求量达 2500 余吨。我省以安顺市紫云县吉祥草种植基地为核心基地的吉祥草药材生产基地的年产值约为 680 吨。这些情况表明，吉祥草的确是功能确实、疗效显著、有产区群众基础的特色药材，有较大的市场空间和很好的开发前景，在贵州中药民族药产业中有着重要地位。其需求量还在不断上升，野生资源已被采挖殆尽，人工种植产量不足，供需矛盾突出，已严重制约了吉祥草产业健康持续发展。制定规范化技术操作规程，生产出安全、有效、稳定、可控的药材吉祥草已刻不容缓。2 工作简况项目组承担了贵州省科技厅“贵州省中药现代化科技产业研究开发专项项目贵州苗药吉祥草规范化种植研究（黔科合农字20055046）”、国家发改委“
4、 国家高技术产业化项目中药大品种咳速停糖浆（胶囊）主要原料药材吉祥草规范化生产基地建设”，从 2000 年开始开展吉祥草资源多样性调查与评价研究，吉祥草活体迁地栽培保存研究，吉祥草野生变家种研究，吉祥草生理生化研究，吉祥草生物学特性研究，吉祥草区域试验研究，吉祥草品比试验研究，吉祥草繁殖方式研究，吉祥草种子种苗质量标准研究，吉祥草种植模式试验，吉祥草需肥需水特性研究，吉祥草种植密度试验研究，吉祥草药用成分研究和吉祥草优良种质特性评价技术方法研究，吉祥草产地加工系列试验研究。通过研究确定吉祥草最适生境类型，筛选出吉祥草活体进行迁地栽培保存的最适湿度、光照强度和温度，同时依据调查、收集与保存的吉祥
5、草资源，通过分析株高、叶片数、叶长、叶宽、分蔸数、匍匐茎及总皂苷含量研究，建立吉祥草优良种质特性评价技术体系，并通过吉祥草优良种源种苗扩繁和试验示范研究为下一步实现吉祥草规范化应用，生产安全有效的药材提供技术保障。已获得国家授权发明专利DBXX/T XXXXXXXXXI2 项，发表相关研究论文 3 篇。3 编制过程2012 年开始，随着贵州百灵企业集团制药股份有限公司中药材吉祥草 GAP 基地建设的推进，已开始酝酿编制本标准，成立了以公司技术骨干陈道军为主持人，逐步建立了袁双、龙静艳、李灿、程均军、汪恋、吴小勇、曹明钦、帅兴、向锦涛、刘祥、唐勇为主要成员的标准起草工作小组。起草人员分工协作，其
6、中陈道军负责调研、技术内容和结构的设置，标准起草和征询专家意见；袁双负责标准起草、征询专家意见、技术内容执行、审核与总结编写；李灿、汪恋负责标准试验或验证方案的制定、试验数据总结分析；曹明钦、吴小勇、龙静艳、程均军、帅兴、刘祥、向锦涛等负责标准主要技术内容试验验证实施；唐勇负责执行过程中的财务管理。在编制过程中，起草人员先后数次深入黔中、黔南、黔东南等吉祥草主产区，对标准主要内容进行实地调研，并对部分内容进行反复试验或验证。2016 年 1 月 23 日，陈道军、袁双到贵州省现代中药材研究所参加贵州省中药材标准化技术委员会组织的关于贵州省重要中药材生产技术标准体系制定的会议，吉祥草划分为贵州百
7、灵企业集团制药股份有限公司负责品种之一。2016 年由贵州省中药材标准化技术委员会向贵州质量技术监督局提出立项申请，获得批准。项目下达后，陈道军主持召开编制小组工作会议，在多年来公司对吉祥草基地建设的工作基础上，明确分工，起草工作小组收集、整理资料，编写标准草案。具体任务落实到具体负责人，相关人员每周向主持人汇报工作进度，发现问题，提出解决方案。2016 年 10 月，编制形成了吉祥草种子种苗质量标准技术规程。此后编制小组仍不断对标准内容进行反复验证和完善修改，形成该项地方标准初稿。4 编制原则4.1 坚持科学的原则，标准的内容均来源科学研究和生产实践。4.2 坚持服务于生产的原则。标准的内容
8、紧密结合生产实际，具有科学性、规范性和可操作性。4.3 标准的结构和编写按照 GB/T1.1-2000标准化工作导则制定。4.4 标准的内容以贵州自然条件为基础，为贵州吉祥草产业发展服务。5 确定标准主要技术内容的论据5.1 引用标准本标准的编制引用了GB15618土壤环境质量标准、GB3095环境空气质量标准、GB9137大气污染物最高允许浓度标准、GB5084农田灌溉水质量标准（旱作）、GB3838地表水环境质量标准GB/T 3543.1 3543.7农作物种子检验规程、GB4284 农药安全使用标准、GBT8321.1-8321.7农药合理使用准则、国家药品监督管理局中药材生产质量管理规
9、范（GAP）（试行）、贵州省中药材、民族药材质量标准（2003年版）等技术标准。5.2 种源贵州省中药材、民族药材质量标准（2003 年版收载药材吉祥草（Reineckia carnea (Andr) kunth.），分类依据中国植物志第十五卷。5.3 技术要求5.3.1 种子采集与保存种子采收时间为 10 月份至次年 2 月份，当吉祥草浆果成熟至红色或紫红色时采集浆果，将采集的浆果去除果皮后得到吉祥草种子，待吉祥草种子自然干燥到皱瘪时浸泡在清水中用手反复搓洗，淘洗掉杂质，得到的干净种子继续晒干，播种前浸泡 12 个小时。吉祥草种子可以用无污染的牛皮纸袋包装贮DBXX/T XXXXXXXXXI
10、I藏，长期贮藏应放在冰箱等低温环境下。（图 1:吉祥草果实及种子） 图 1 吉祥草果实及种子5.3.2 吉祥草种子品质检定与种子质量标准制订 5.3.2.1 检验方法（1）扦样：按 GB/T 3543.2 农作物种子检测方法执行。种子批的最大重量为 5kg，分装 10 袋，0.5kg/袋。用单管扦样器每袋都扦样，抽取送验样品 100g，混合均匀，按检验项目要求分样。 （2）净度分析：按 GB/T 3543.3 农作物种子检测方法执行。吉祥草净种子指包裹在吉祥草浆果内的干燥籽籽，净度分析试样 30g。（3）千粒重测定： 按 GB/T 3543.7 农作物种子检规程其他项目检验重量测定进行测定。吉
11、祥草种子采用千粒法测定千粒重。 （4）水分测定：按 GB/T 3543.6 农作物种子检测方法执行。吉祥草种子水分测定采用高温烘干法，水分测定试样 15g，分为 3 份（每份约 5g）。（5）发芽试验：按 GB/T 3543.4 农作物种子检测方法 执行。吉祥草的发芽试验以滤纸或吸水纸作纸床，pH 值为 6.07.5，温度在 2025条件下进行。在混合均匀的净种子中数取 150 粒种子，以50 粒为一个重复，重复 3 次。（6）纯度鉴定：按 GB/T 3543.5 农作物种子检测方法项执行。5.3.2.2 吉祥草种子质量标准的制订经试验研究，将吉祥草种子分为三级种子标准（试行），见表1：吉祥草
12、种子分级表（试行）。表 1 吉祥草种子分级表（试行）项目 一级种子 二级种子 三级种子纯度（%）不低于 99 99 99净度（%）不低于 95 90 85发芽率（%）不低于 90 85 75DBXX/T XXXXXXXXXIII含水量（%）不高于 16 16 16千粒重（g）不低于 30 28 27外观形状 近圆形、米黄色至黄褐色、有光泽、无破损、无病害、无虫蛀。注：以上各项指标为划分吉祥草种子质量级别的依据。检测结果有一项指标不能达到要求，则降为下一级别，检测达不到一级标准降为二级，达不到二级种子降为三级种子，达不到三级种子即为不合格种子。禁止使用不合格种子播种。5.3.3 吉祥草种苗质量标
13、准制定 试验材料与方法：试验所用种苗 1 年生、1.5 年生采自吉祥草主产区，紫云基地的 10 个批次的种苗。种苗质量测定项目：单株重、芽的指标（芽数、芽直径、芽长）、出苗情况五项指标进行进行相关性分析筛选出极显著相关因子、测定并编号，使用类平均系统聚类法对吉祥草种苗进行分级。应用SPSS17.0 软件对以上五项项目指标行统计描述、相关性分析、和聚类分析，根据聚类结果并结合生产实际进行分级，制定分级标准。根据系统聚类的类平均法原理，对单株重、芽的指标（芽数、芽直径、芽长）测定数据进行标准化后，所得到的综合指标即可形成一些自然类。把自然类从大到小排序，然后利用聚类分析方法，计算它们之间的距离，把
14、距离小的逐步两两合并，直到需要的分级数为止。靠近大数的类一般应属一级种苗，靠近小数这边的类应属于等外级。以单株重、芽的饱满度两个指标为主判断种苗质量，并结合感官指标制定种苗分级标准。做分级苗的栽种试验的出苗情况也客观地反映了种苗质量的分级情况，同时也验证了分级苗标准的合理与否，为种苗质量标准的制定提供依据。检验分级：于采收期植株生长停止后对不同级别种苗进行植株生长发育、药材产量调查，即统计成活率、测当年生新苗的苗高、采收并称量每( 株) 丛当年新苗的重量，以检验分级的合理性。选地：选择土质疏松、土层深厚、有机质含量丰富、土壤肥力水平倾斜度相对平行、排灌条件良好面积约 1 亩左右的砂质壤土。整地
15、：翻耕深约 25cm30cm，首先根据试验设计图开厢划分小区，每小区设 1 厢，保持厢面长宽度一致。在每个小区上均匀撒施相同底肥种类和施肥量，然后用锄头使厢内肥料与床土混匀作基肥，并把床土整细耙平。移栽：吉祥草种苗按等级栽种。株距 15cm*20cm,沿着厢面横开沟，沟深 5 8cm，均匀摆放分株苗 7 株，栽种时，用锄头挖起小沟，下面以 1500Kg亩的量放腐熟猪粪作底肥，将吉祥草按照密度要求放入，覆土、压实，浇水。行覆土压实。试验区组设计图：试验记录 5 次。分别以，1、2、3 代替一级苗、二级苗、三级苗。设有A、B、C 三个重复。技术人员应根据观察记录数据和检测结果及时进行数据统计，分析
16、试验结果 ，写出试验总结报告。试验结果如表 1：不同等级苗的测量值；表 2：不同等级苗的芽数、直径、长度；表 3：吉祥草分株苗每十株重量；表 4：不同等级苗的重量；表 5：不同等级苗栽种出苗情况；表 6：1 年生 1.5 年生芽数与单株重量的比较；表 7：吉祥草种苗质量标准（试行）。表 1 不同等级苗的测量值吉祥草种苗分级标准（芽的饱满度）一级 二级 三级单株号芽数（根）直径（mm）长度（mm）芽数（根）直径（mm）长度（mm）芽数（根） 直径（mm）长度（mm）1 3 6.55 35.47 3 5.32 27.68 1 4.8 32.062 3 5.56 16.48 3 4.97 11.28
17、 1 3.57 56.44DBXX/T XXXXXXXXXIV3 3 6.13 20.44 2 5.87 34.08 1 6.01 18.94 3 6.25 32.42 3 5.58 35.72 1 6.3 22.795 3 4.96 39.25 3 5.36 14.55 1 5.22 19.356 3 5.55 33.15 2 5.23 23.06 1 5.89 17.287 4 5.76 54.44 3 4.6 29.07 1 6.25 13.458 4 5.85 30.72 2 5.33 31.3 1 3.55 8.39 5 6.78 28.37 2 5.97 39.83 1 5.95
18、23.3710 5 5.48 24.74 2 6.67 21.96 1 5.17 16.1平均值 3.6 5.887 31.548 2.5 5.49 26.853 1 5.271 22.804注： 以上数据为游标卡尺测量的原始数据。表 2 不同等级苗的芽数、直径、长度（ s，n=10）x等级 芽数（个） 芽直径（mm ） 芽长度（mm）1 级 3.600.90 5.890.52 31.5510.052 级 2.500.50 5.490.55 26.858.703 级 1.000.00 5.270.97 22.8012.72注：芽数组间 P 值 0.000，小于 0.05 有显著性差异；芽直径组
19、间 P 值 0.394，大于 0.05 无显著性差异；芽长度组间 P 值 0.112，大于 0.05 无显著性差异，但多重比较 1 级与 2 比 P 值 0.162.1 级与 3级比 P 值 0.039，所以 1 级与 3 级芽长度有显著性差异。表 3 吉祥草分株苗每十株重量（g）组别 1(g) 2(g) 3(g) 平均值（ ）x单株重（g）一级苗 65.22 57.53 69.14 63.96 6.40二级苗 43.21 40.66 40.25 41.37 4.14三级苗 15.98 19.81 18.64 18.14 1.81普通重量 83.19 116.03 99.2 99.47 9.9
20、5表 4 不同等级苗的重量（ s，n=3）x一级苗 二级苗 三级苗 普通重量（g）63.965.91 41.371.60 18.141.96 99.4716.42注：组间 P 值 0.000，极显著差异。 普通重量表示未经修剪过的重量。表 5 不同等级苗栽种出苗情况DBXX/T XXXXXXXXXV观察时间 一级苗（） 二级苗（） 三级苗（）2006.11.12 20 17 42006.11.19 27 22 72006.11.28 83 43 222006.12.11 103 95 542006.12.20 121 113 89注：样本数：180、：225、:324在冬季的低温环境下，50
21、天的吉祥草不同等级的分株苗出苗情况：67.2% ；：50.2%；：27.5%。分级苗对出苗率有影响。表 6 1 年生 1.5 年生芽数与单株重量的比较（ s，n=10）x组别 芽数（个） 单株重量（g)1 年生 1.600.70 2.800.911.5 年生 3.500.97 4.701.39注：芽数组间 P 值 0.000，小于 0.05 有极显著性差异；单株重量组间 P 值 0.002，小于 0.05 有极显著性差异。结论分株苗选用 1.5 年生的吉祥草苗。采用一级苗、二级苗及三级苗样品进行品质检测，检测依据为贵州省中药材、民族药材质量标准2003 版。检测结果均符合标准要求。根据上述试验
22、和生产实践，将吉祥草的分株苗的质量标准分为三级（试行），见表 7：吉祥草种苗质量标准（试行）。表 7 吉祥草种苗质量标准（试行）项目 一级 二级 三级 外观性状芽数（个） 3 23 12 芽长（mm） 20 819 57芽直径（mm） 5.5 4.55.5 34.5单株重量（g） 5.8 3.5 5.8 1.83.5根茎色白或绿色，粗壮无病斑及破裂伤口，去根的断面正常，鳞片红色或白色。注：以上各项指标为划分吉祥草种苗质量级别的依据。检测有一项达不到标准降为下一级种苗，达不到二级种苗降为三级种苗，达不到三级种苗即为不合格苗。禁止使用不合格吉祥草苗栽种。表 12 通过芽的指标变化指出分级苗之间存在
23、的差异，对种苗进行分级具有实际意义；34 通过分级苗的重量进行相关性分析，具有显著性差异，对种苗分级进行分级有意义；表 5 对栽种了分级苗的出苗情况进行统计，一级及二级苗达到 50%以上，而三级苗尚不足 30%，应避免用三级苗进行繁殖推广，禁止使用等外级苗进行移栽定植；表 6 对 1 年生和 1.5 年生的吉祥草相关进行分析得出，益用 1.5 年的吉祥草分株繁殖；表 7 对分级苗进行归纳，得出分级标准。本试验划分了分级标准，为以后的种植工作提供依据。在公司吉祥草基地建设过程中，通过长期生产实践获得了一些重要理论成果，育苗技术数据来源DBXX/T XXXXXXXXXVI出了以上试验报告，还有相关
24、的论文和专利，部分技术详见已发表论文和发明专利。发表论文：（1）巫小宏,陈道军,宁培洋,安斯杨.吉祥草病虫害及防治技术J.中国现代药物应用,2009,3(17):203；（2）陈道军,袁双,成龙等.底肥用量、密度、栽期对吉祥草产量性状的影响研究J.中华中医药学刊,2014, 32(1): 43-46；（3）安斯扬,袁双,宁培洋等.吉祥草药材质量标准研究J.海峡药学,2015, 27(2):56-59; 发明专利：（1）夏文,宁培洋,巫小宏,陈道军. 吉祥草的人工种植方法，专利号 ZL 200810306717.3；（2）夏文,陈道军,巫小宏,宁培洋. 吉祥草与农作物套种的规范化种植方法，专利号
25、 ZL 201010512956.1。5.4 标志、包装、运输包装上至少应标志名称、规格、生产企业、产地、批号、数量和生产日期。应干燥、清洁、无异味, 采用不影响质量、容易回收和降解的材料，外包装应用纸箱。 运输应清洁、干燥、无异味，不应与污染其品质的货物混合运输。6 专利及涉及知识产权该标准涉及到贵州百灵企业集团制药股份有限公司专利和知识产权，请使用单位与专利权人协商，本文件发布机构不承担任何涉及到专利和知识产权的责任。7 分歧意见的处理经过本标准属于传统中药材民族药材吉祥草种子种苗质量标准，在标准的起草过程中未发生重大分歧意见。8 标准作为强制性或推荐性地方标准的建议本标准为中药材民族药材
26、吉祥草种子种苗质量标准，适用于吉祥草种子种苗的生产和种苗质量的检验验收，建议本标准作为推荐性的地方标准发布实施。9 贯彻标准的要求和措施建议。加强对标准的宣传和执行，以标准来规范生产和销售。本标准中的技术要素是科研与生产紧密结合的结果，建议在实施标准过程中对所发现的问题应及时反馈，以利于标准的修订和完善。10 废止现行有关标准的建议本标准为首次制定，无废止现行有关标准的建议。11 其他应予说明的事项本标准属于吉祥草种子种苗质量标准，目前在我省已初步形成小规模生产及使用，标准的制定将进一步规范生产和使用。12 推广应用的预期效果吉祥草为多年生草本植物，经调查，吉祥草主产我国长江流域以南各省及西南
27、地区，主要分布于江苏、浙江、安徽、江西、湖南、湖北、河南、陕西（秦岭以南）、四川、云南、贵州、广西和广东。生于阴湿山坡、山谷或密林下，海拔 1703200m 。除药用外也常栽培供观赏。根据贵州吉祥草资源调DBXX/T XXXXXXXXXVII查表明，在贵州全省均有不同程度的分布，其中以黔中至黔南、黔东南最盛，黔西北相对较少；吉祥草根系发达，可作为喀斯特石漠化生态修复草本丛最佳物种之一，使原本荒芜的石漠化山区能产出较高经济效益，种植吉祥草对增加植被，提高土地利用价值、防止水土流失，保护贵州省生态环境，防治石漠化有十分重要的作用。西南喀斯特地区，很多县市山区农户就有栽培药用植物的经验，只是由于各种
28、因素的限制没有大规模发展起来。采用人工自然或半自然栽培模式得到的吉祥草产品具有成本低、品质高、经济效益高等特点，吉祥草“短、平、快”的特点使其成为中药材种植产业扶贫的优选品种，按规范化技术要求示范推广吉祥草规范化种植基地粮药模式平均每亩产药材 500Kg（18 个月采收），收购价 7 元/Kg，药材收入 3500 元亩，加上套种作物（玉米及蚕豆）每亩产 800 元，合计 4300 元亩，平均为 2866 元亩年，与传统种植作物玉米比较，总计平均每亩增加产值 1786 元亩年；林药、果药模式平均每亩产药材 375Kg（18 个月采收）， 收购价 7 元/Kg，平均每年增加产值达 1750元亩。直
29、接带动农户 200 多户，与传统种植比较，户均增加产值达 7778 元以上，农户增收效益显著。推进了贵州退耕还林还草、治理生态环境、农村产业结构调整和解决“三农”等工作。根据资源调查情况显示，吉祥草在贵州喀斯特地貌生长已形成优势种群，长势较好；在施工迹地，形成先锋植物。不容置疑，种植吉祥草对于形成吉祥草中药产业链、促进贵州中药产业现代化乃至于促进贵州经济发展，都具有明显的经济效益、社会效益和生态效益。13 标准水平分析本标准在我国属首次制定，确定的技术性能指标充分体现了生产技术与产品的特点，标准的结构和内容科学合理，本标准整体内容达到国内领先水平。吉祥草种苗质量标准技术规程编制组2017 年 2 月 9 日
