1、培养基的分类和成分 自养异养微生物碳源的区别 比较消毒和灭菌 举例说明消毒和灭菌 制备培养基的程序 溶化操作中搅拌的作用 为什么将平板倒置,课题1 微生物的实验室培养,专题2 :微生物的培养与应用,了解有关培养基的基础知识，进行无菌技术的操作，进行微生物的培养。,一、课题目标：,掌握培养基的制备、高压蒸气灭菌和平板划线法等基本操作技术，熟练、规范地进行无菌操作，成功地培养微生物。,无菌技术的操作。,二、课题重点和难点：,三、技能目标：,课前预习,一、平板划线法 稀释涂布平板法 1. 通过接种环在琼脂固体培养基表面连续画线 接种环 烧红 菌液中沾取一环菌液 迅速伸入平板内划35条平行线 第一区域
2、划线的末端开始往第二区域内 最后一区域的划线与第一区相连 2.稀释 不同稀释度的菌液分别涂布在琼脂固体培养基的表面 稀释度足够高时 9 试管灭菌 1 1 酒精 0.1 810s 均匀 转动培养面 分布均匀 二、临时 40c 甘油 -200c 预习自测： C D D D B,接种方法有： 平板划线法和稀释涂布平板法,平板划线法:通过接种环在琼脂固体培养基表面连续画线的操作,将聚集的菌钟逐步稀释分散到培养基的表面.在数次画线后,可以分离到由一个细胞繁殖而来的肉眼可见的子细胞群体,这就是菌落.,微生物的接种技术,（二）、纯化大肠杆菌,菌落：,单个或少数细菌在固体培养基上大量繁殖时，就会形成一个肉眼可
3、见的，具有一定形态结构的子细胞群体，叫做菌落。 菌落是鉴定菌种的重要依据。 一个菌落就是一个种群,菌落,细菌的菌落特征因种而异,问题讨论1-1,（1）为什么在操作的第一步以及每次划线之前都要灼烧接种环？在划线操作结束时，仍然需要灼烧接种环吗？为什么？,操作的第一步灼烧接种环是 每次划线前灼烧接种环是划线结束后灼烧接种环,是消灭接种环上的微生物 ；,消灭接种环上残留菌种 （使下一次划线时，接种环上的菌种直接来源于上次划线的末端，从而通过划线次数的增加，使每次划线时菌种的数目逐渐减少，以便得到菌落。）,是防止细菌污染环境和感染操作者。,（2）在灼烧接种环之后，为什么要等其冷却后再进行划线？,答：以
4、免接种环温度太高，杀死菌种。,（3）在作第二次以及其后的划线操作时，为什么总是从上一次划线的末端开始划线？,答：划线后，线条末端细菌的数目比线条起始处要少，每次从上一次划线的末端开始，能使细菌的数目随着划线次数的增加而逐步减少，最终能得到由单个细菌繁殖而来的菌落。,问题讨论1-2,（2）应从操作的各个细节保证“无菌”。例如，酒精灯与培养皿的距离要合适、吸管头不要接触任何其他物体、吸管要在酒精灯火焰周围等等。,（1）要注意防止杂菌污染，比如试管、移液管要经过灭菌，操作在酒精灯附近进行（移液管和试管口应在离火焰1-2cm处）。,问题探讨2,（1）培养未接种的培养基的作用是对照，若有菌落形成，说明培养基灭菌不彻底。（2）原有培养基灭菌不彻底或杂菌污染。,
