1、高效液相色谱法在中药质量标准 提高中的应用,广东省药检所李华,前言 中药是中国医药学的瑰宝，对中华民族的繁衍昌盛做出了伟大的贡献。为了保证中药的安全性和有效性，数千年来中医药一直处于不断标准化、规范化的进程中，神农本草经则是最早的中药材标准。李时珍的本草纲目是中药材标准规范的深化。历史发展到今天，总结前人经验，补充完善、制定中药系列标准是中药现代化的需要，也是中药国际化，造福全人类的需要。,一、我省中药材质量标准状况,1、部分中药材无质量标准。广东是一个中药材生产、销售、使用的大省，我省用于生产中药成方制剂及临床配方的中药材有上千种，中国药典2005年版收载的中药材有551种；现有质量标准的中
2、药材远不能满足我省中药材的需求和使用，尚有数百种经常使用、疗效较好的广东地产中药材，既无国家药品质量标准也无省级药品质量标准。,2、与药典同名异物广东是“川、广、云、贵地道药材”的主产地之一，“南药”是广东的特产。有些特产药材已收入中国药典如陈皮、广藿香、广金钱草、广防己、广枣、砂仁、巴戟天、沉香、地龙、化橘红、何首乌、佛手、丁公藤等。但尚有大部分广东常用中药材未被中国药典收载，有的其习用名称却与药典收载的名称相同，为同名异物的中药材.,3、已有的质量标准偏低。 广东省中药材标准收载119个品种，建立了定量测定方法的有13个，其中高效液相色谱法5个。,二、高效液相色谱法在国家药品 标准中的运用
3、,高效液相色谱法由于仪器化程度高、分离效能高、准确性和重现性好，更适合中药复杂成分的分离分析和标准色谱图库的建立，成为中药含量测定的主导方法。,（一）、HPLC在部标中药成方制剂的应用,中华人民共和国卫生部药品标准“中药成方制剂”分20册，共4052种，建立量化指标项目的占11%，其中采用高效液相色谱分析方法的有项，占.，见表1。,表1 部颁品种量化指标方法分析,（二）、HPLC在中国药典的应用,HPLC在中国药典的应用，在我国药学工作者的努力下，经历了一个从无到有、从少到多的过程。,表 近3版版药典品含量测定方法分析,三、运用高效液相色谱法进行药品标准定量部分提高工作,中药是多种成分的混合物
4、，其化学成分可有几十种甚至上百种，虽然中药药效是多成分综合作用的结果已渐成共识，但由此认为中药全成分均为有效成分的观点则是片面的，以我们目前的技术及实验条件要想对所有的成分进行测定也是不可能的，选择1 2个有效成分作为中药质量评价的标准，虽然这种方法不够充分、客观，但却是目前我们的技术及实验条件所能做到的。,（一）、指导思想 、 在制定中药标准中突出中医理论的指导作用，反映中医用药与质量标准的内在关系。 、 在检测成分上也要注意以中医临床功能主治与现代药理学相结合进行研究。 、如所测成分含量低，应制定浸出物或增加一味药的含量测定。,表3 多指标测定品种与项目,表4 规定的含量限度为多成分之和,
5、（二）、提高的程度,、以中国药典年版一部为基准。 、中国药典年版一部，成方制剂和单味制剂共收载4个品种，其中有个项目采用了高效液相色谱法进行定量分析，占.6。,、在个分析项目中测定芍药苷的有项，占.，测定黄芩苷的项，占.，测定盐酸小檗碱的项，占.，测定大黄素的项，占.。,（三）、高效液相色谱分析方法建立的一般步骤：,一种高效液相色谱分析方法的建立，是由多种因素来决定的，除了了解样品的性质及实验室具备的条件外，对液相色谱分离理论的理解，对前人从事过的相近工作的借鉴以及分析工作者自身的实践经验，都对分析方法的建立起着重要的影响。通常在确定被分析的样品以后，要建立一种高效液相分析方法必须解决以下问题
6、：,（1）根据所测成分的性质，制定其分析纯化的方法。 （2）根据被分析样品的特性，选择适用于样品分析的高效液相色谱分析方法。 （3）由获得的色谱图进行定性或定量分析。,（四）、高效液相色谱图存在问题、原因及解决方法,液相色谱系统的许多问题都能在谱图上反映出来。其中有一些问题可以通过改变设备参数得到解决；而其他的问题必须通过修改操作程序来解决。对于色谱柱和流动相的正确选择是得到好的色谱图的关键。,峰拖尾,原 因 1、流动相PH选择不当2、干扰峰 3、样品与填料表面残留硅羟基发生反应,解决方法 调整PH值。a、使用更长的色谱柱。 b、改变流动相或更换色谱柱 。a、加入离子对试剂或碱性挥发性修饰剂
7、b、更换色谱柱,峰前延,原 因 1、样品过载 2、样品溶剂选择不恰当 3、柱温低,解决方法 降低样品含量 。a、使用流动相作为样品溶剂 。 升高柱温,峰分叉,原 因 1、保护柱或分析柱污染 2、样品溶剂不溶于流动相,解决方法 1 、取下保护柱再进行分析。 改变样品溶剂。,保留时间波动,原 因 色谱柱没有平衡 流动相组分变化温控不当,解决方法 在每一次运行之前给予足够的时间平衡色谱柱防止变化（蒸发、反应等） 调好柱温,保留时间波动,原 因 1、柱温波动。2、流动相不均匀。3、流通池被污染或有气体 4、检测器出口阻塞5、流动相配比不当或流速变化,解决方法 1、控制好柱子和流动相的温度 2、使用HP
8、LC级的溶剂，高纯度的盐和添加剂。 3、流通池被污染或有气体 4、取出阻塞物或更换管子。 5、更改配比或流速。,基线漂移,6、柱平衡慢，特别是流动相发生变化时 。 1、柱温波动。7、流动相污染、变质或由低品质溶剂配成 8、样品中有强保留的物质。,6、用中等强度的溶剂进行冲洗，更改流动相时，在分析前用10-20倍体积的新流动相对柱子进行冲洗1、控制好柱子和流动相的温度 7、检查流动相的组成。8、使用保护柱,基线漂移,四、 结束语,安全和有效是评价药物的关键，也是药物生物活性的具体体现。如何保证药物的安全有效是中药现代化必须解决的首要问题。 中药质量控制指标只有与其实际利用的功效密切相关，即有效性的控制指标是其效应指标，质量控制才能真正起到控制和评价药材质量的作用，否则作用就不大甚至没有作用。,谢谢！,（020）81865300 ；34345482 Email: ,
