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类型植物组织培养教程+李浚明2-3.ppt

  • 上传人:jinchen
  • 文档编号:4669165
  • 上传时间:2019-01-07
  • 格式:PPT
  • 页数:26
  • 大小:546.50KB
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    植物组织培养教程+李浚明2-3.ppt
    资源描述:

    1、,第三节 植物离体培养体系的建立,一、植物组织培养的阶段划分:通常将组织培养过程划分为四个阶段1、起始培养阶段(诱导阶段)2、增殖培养阶段3、生根培养阶段4、驯化移栽,Stage 0 Selection hardened off,Steps of Micropropagation,二、外植体起始培养(无菌体系建立)起始培养阶段是指无菌体系的诱导和建立过程。主要受外植体、培养基、环境条件等因素的影响。,(一)外植体的起始培养过程1、 起始培养的一般过程:A、选取适宜的基因型(品种);B、选取适宜的外植体;常用外植体有茎尖、茎段、节间、叶片、叶柄等。C、流水冲洗外植体;D、外植体切割、分离及灭菌处

    2、理;E、外植体接种于诱导培养基。F、环境条件控制促进外植体的生长。,2、接种外植体的生长过程:A 细胞分裂的启动;B 细胞增殖;C 组织和器官的形成。,(二)影响外植体起始培养的因素:1、影响外植体起始的因素A 外植体的遗传基础及生理影响B 培养基组成成分:矿物盐类、微量有机成分、生长调节物质、碳源、琼脂、活性炭、酚类化合物、多胺等。C 培养条件:光照、温度、湿度,A 外植体(1) 外植体种类及基因型(2) 外植体供体植株和外植体的来源与生理状态(3) 外植体大小(4) 外植体的极性,外植体种类及基因型,单子叶植物不易诱导器官发生。 b. 木本植物较难诱导。 c. 存在基因型差异(如番茄29%

    3、63%) d. 开始生长季节取材容易诱导。,外植体状态:,外植体大小:外植体越小成苗能力越弱,较大的外植体增殖较快。外植体极性:当外植体以形态学的基部接种于培养基上时,从远离基部的表面诱导出芽、苗数目较多。,B、培养基a 培养基类型:b 碳 源的影响:,C、植物生长调节物质a 细胞分裂素和生长素类b 赤霉素类c 乙烯及其生物合成抑制剂d 其他有机化合物,细胞分裂素和生长素:,a.部分植物单独使用细胞分裂素(CTK)可以形成 无根苗 b.部分植物无根苗的形成需要细胞分裂素和生长素配合使用。 c. 外源CTK与生长素必须维持适当比例以改变内源激素平衡,促进器官发生。 d. 不同细胞分裂素对分化的作

    4、用效果不同 e. 苯基脲衍生物具有较高的细胞分裂素活性(4PU、CPPU 、TDZ),赤霉素类:赤霉素与促进细胞伸长和开花反应,组织培养条件下只在少数植物上对芽的诱导有促进作用。 如马铃薯、甜菜、樱桃等。乙烯及其生物合成抑制剂:具有促进和抑制两方面的影响,但抑制作用多于促进作用。因此在某些植物种类,乙烯抑制剂可以促进芽的形成。AgNO3 、CoCl、AVG,其他有机化合物:腺嘌呤衍生物具有促进器官分化作用。椰子汁等物质也具有促进分化的功能。,3. 培养条件及其他因素(1)光照通常10005000 Lx 16 小时光照。非洲菊1000 lx ,洋葱 16小时,马铃薯连续光照,葡萄要求短日照。光质也影响芽的再生,蓝光有利于器官发生,烟草实验,而红光有利于根的发生。,(2)温度大部分植物要求25 oC,少数要求较低温度(15 20 oC)或较高的温度(30 oC )如菖蒲、水仙、洋葱、龟背竹等。变温处理对有些植物器官发生有促进作用,如豌豆。,(3)湿度:培养室相对湿度以7080为适宜,培养容器内要保持适宜湿度,防止过于干燥或湿度过大。 (4)气体:要注意保持培养容器内良好的通气性。维持适宜的氧气和二氧化碳浓度,防止有害气体的积累。,如何进行外植体的起始培养(无菌体系的建立)?1、选择适宜的外植体;2、选择适宜的培养基;3、创造适宜的环境条件,20050926,

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