1、血液病临床分为三大类型：红细胞 疾病、白细胞疾病、出血和血栓性疾病。临床上常见的疾病有白血病、再生障碍性贫血、骨髓增生异常综合症、血小板减少症、多发性骨髓瘤、淋巴瘤、骨骼纤维化、血友病、地中海贫血等。JAK2 基 因 检 测骨髓增殖性疾病（myeloproliferative diseases, MPD）是一组造血干细胞肿瘤增生性疾病。在骨髓细胞普遍增生的基础上有一系或多系细胞尤其突出,呈持续不断的过度增殖和外周血中成熟细胞数量增多为特征。其临床表现具有异质性，但各亚型几乎都伴有白细胞、血小板及巨核细胞增多，后期出现骨髓纤维化和骨髓衰竭，随病程进展部分可转化为其他疾病。其经典的分类主要分为慢性
2、粒细胞白血病（chronic myelogenous leukemia, CML）、真性红细胞增多症（polycythemia vera, PV）、原发性血小板增多症（essential Thrombocythemia, ET）以及原发性骨髓纤维化（primary myelofibrosis, PMF）等。JAK2是酪氨酸蛋白激酶的一种，可以影响基因的转录调节。JAK2 基因特定位点的突变将破坏正常 JAK2 蛋白酪氨酸激酶活性的自我抑制作用，导致造血细胞的异常增生。JAK2V617F 突变发生在 65%97%的真性红细胞增多症（PV）、23%57%的原发性血小板增多症（ET）及 35%57%
3、的原发性骨髓纤维化（PMF）患者中。根据 JAK2 突变与骨髓增生性疾病的密切关系，在修订的 2008 世界卫生组织（WHO）分类系统中，JAK2 突变成为慢性骨髓增殖性疾病（MPD）主要的诊断指标。检测 JAK2 基因突变，对诊断慢性骨髓增殖性疾病和白血病都有重要意义。华大基因临床检验中心，可以对 JAK2 基因的多个突变位点进行检测，不仅自动化、精确度高，还可以检测新突变基因。STR 嵌 合 体 检 测造血干细胞移植是目前临床上治疗白血病、骨髓瘤、淋巴瘤、重型再生障碍性贫血和地中海贫血等血液系统疾病的根本手段。根据来源，造血干细胞移植可以分为自体、异体同基因（如双胞胎）、异基因（如父母、同
4、胞或无血缘关系的供者）移植。随着移植技术的进步以及骨髓库的完善，异基因造血干细胞移植在临床上的应用越来越广泛。异基因干细胞移植的目的是为受者建立供者型的正常造血与免疫功能，以取代原有的异常的造血及免疫系统。为判断移植是否成功并及时地实施免疫抑制治疗和预后，人们需要对移植后受体体内形成的供、受者外周血细胞嵌合体进行检测以观察其变化趋势。造血细胞嵌合体是异基因造血干细胞移植后供者和受者血细胞共存于受者体内的现象。在造血干细胞移植后，造血嵌合体一般分为 3 种类型：当供者细胞占受者的骨髓或外周血的比例大于 95时，供者细胞完全植入，称为完全的供者嵌合状态；若移植后，受者细胞仍出现在骨髓或外周血中，供
5、者细胞占 2595时，称为混合嵌合状态；若供者细胞占比小于 25，则称为微嵌合状态。供者细胞嵌合率与移植物排斥及疾病的复发呈负相关，因此移植后动态检测嵌合状态对判断移植效果、实施临床干预尤为重要。如今，嵌合体的监测已成为同种异基因造血干细胞移植术后患者的常规检测项目，检测方法已由传统的细胞学和遗传学方法发展到分子生物学方法。STR 基因检测法敏感性高，可靠性好，定量精确，已成为目前国际骨髓移植登记处（IBMTR）推荐的检测供受嵌合状态的“金标准”。STR，即短串联重复序列（short tandem repeat，STR），也称做微卫星 DNA，是由几个碱基对作为核心单位串联重复形成的 DNA
6、序列。STR 广泛存在于真核生物基因组中，具有高度的多态性，按孟德尔规律呈共显性遗传，是目前最理想的 DNA 遗传标记。在医学亲子鉴定中已经得到广泛应用。华大基因临床检验中心是国内少数几家掌握 STR 检测技术的临床检验中心。采用该技术，可以及时准确地动态观察嵌合体的变化，为早期预测移植排斥和白血病复发提供依据；还可以准确判断出复发是供者型还是受者型，为临床治疗提供参考。白 血 病 相 关 融 合 基 因 定 量 检 测白血病（leukemia）属于造血系统的恶性肿瘤，是一组高度异质性的恶性血液病，其特点为白血病细胞呈现异常增生伴分化成熟障碍。临床出现不同程度的贫血、出血、发热及肝脾、淋巴结肿
7、大，可危及生命。白血病融合基因（fusion gene），是白血病的分子生物学特异性标志。近年来，由于分子生物学技术的发展，对白血病细胞分子遗传学改变的了解也不断深入。迄今报道白血病涉及至少数十种融合基因。已经认识到大部分的白血病中存在着染色体结构畸变，包括缺失、重复、倒位、易位等，导致原癌基因及抑癌基因结构变异，原癌基因激活或抑癌基因失活，产生新的融合基因，编码融合蛋白。有些基因是调控细胞增殖、分化和凋亡的转录因子，当基因发生变异，直接影响了下游信号传递途径，导致细胞增殖能力增强、凋亡障碍，分化障碍等，产生白血病表型。一些典型的白血病融合基因是某种白血病的特异性分子诊断标志，如 BCR-AB
8、L 融合基因，可出现在 95%以上的慢性粒细胞白血病（CML）。患者预后效果的好坏，与融合基因的类型有一定关系，如急性早幼粒细胞白血病（APL）特有的 PML-RARa 融合基因，对APL 患者用全反式维甲酸（ATRA）诱导缓解治疗，其预后非常好，复发率低。而有些基因，如 MLL 相关融合基因，预后差，死亡率高。白血病微小残留病，是指在白血病经诱导化疗获完全缓解后或是骨髓移植治疗后，体内仍残留有少量白血病细胞的状态。这些残存的白血病细胞将可能成为白血病复发的根源。白血病一旦复发，病情将更加严重。所以，定期检测白血病微小残留病很有必要。通过检测微小残留病融合基因表达水平，可更早预测白血病的复发；
9、指导白血病的临床治疗，根据融合基因表达水平的多少，决定是否继续化疗；有利于评价药物治疗效果，是否耐药，并依此指导临床更换治疗方案；评价造血干细胞移植的净化效果。华大基因临床检验中心采用实时荧光定量 PCR 基因检测法检测白血病的相关融合基因，灵敏度高、特异性强，可以为白血病的诊断、分型、临床治疗和预后判断提供可靠的依据。人 类 白 细 胞 抗 原 (HLA)高 分 辨 基 因 分 型 检 测目前我国约有 400 万名患者等待造血干细胞移植，同时每年新发病例 4 万人左右。造血干细胞移植是白血病患者、再生障碍性贫血、地中海贫血、重症放射病等人体造血系统及免疫系统严重疾病患者彻底治愈的唯一希望。而
10、在移植过程中，人类白细胞抗原（Human Leukocyte Antigen，HLA）是决定移植排斥反应高低的重要因素。在进行骨髓和其它器官移植时，供者和受者之间 HLA 越接近，排斥反应的发生率就越低，移植成功率和移植器官长期存活率就越高；反之，就越容易发生排斥反应。病人同胞间 HLA 相合的可能性为四分之一，而非血缘关系为1/50001/10000，对于一些罕见的 HLA 类型的患者，配型成功的几率为几万甚至几十万分之一。而我国大部分是独生子女家庭，在骨髓库中寻找与患者 HLA 匹配的志愿者，成为发现供者的主要途径。HLA 的命名含有四组数字，代表 HLA 基因的不同部分，如 HLA-A*
11、01:01:01:02。第一组数字表示 HLA 低分辨基因分型，第二组及以上的数字表示高分辨分型。正如下图，HLA 的低分辨只能识别 HLA 的抗原特异性，就像在地图上看天安门，只识其大概；而高分辨则可以在基因水平上准确识别 HLA，如同看天安门的高清图，可以确切地看到细节。目前我国骨髓库（即中华骨髓库，全称中国造血干细胞捐献者资料库）中的 HLA 分型数据多数是低分辨的，并不能确保供者和患者的 HLA 真正匹配，患者首先需要在骨髓库中筛选出低分辨配型匹配的志愿者，再和这多个低分辨匹配的志愿者逐一进行高分辨复核，才有可能找到真正合适的供者。有的患者与数十个低分辨匹配的志愿者进行复核后，发现他们
12、均不是合适的供者，甚至有的患者始终找不到匹配的供者，只能在 HLA 部分匹配的情况下就进行造血干细胞移植，导致术后出现严重的排斥反应，需要服用大量药物来维持生命。即使最后能够找到较为适合的供者，在低配筛选和多次高配复核的过程中，患者的维持费用和多次低配和高配的配型费用就是一个庞大的数目。更为重要的是，先低配筛选再逐一高配复核的方法，消耗了大量的时间，很多患者等不到配型成功就已经因并发症而离开人世。因此，推广 HLA 高分辨配型可以从根本上提高骨髓配型的效率和准确率。如果骨髓库全部“高分入库”，那么查找匹配骨髓的时间将有可能从几个月缩短为几分钟患者的 HLA 高分数据数据直接与骨髓库中的高分数据
13、进行比对，一步到位找出供者。HLA 高分辨分型技术的推广不仅将为患者节约多次低配费用的额外负担，更重要的是，为患者争取到了大量“救命”的时间。华大基因是中华骨髓库的合作伙伴，承担了国内和国际上大量的 HLA 配型检测任务。目前，华大基因应用新一代的测序技术，只需通过一次实验就能够读取数千份样本的 HLA序列数据，并一次性达到 HLA 分型的高分辨率，同时还可发现新的等位基因。在检测通量、数据质量和成本控制等方面都有质的飞跃。2009 年，华大基因保质保量地完成了中华骨髓库高分辨入库项目，样本结果质评准确率达到 99.75%（骨髓库准确率标准为 97%），真正实现效率和准确率的双赢。华大基因的
14、HLA 高分辨分型技术，使建立高分辨 HLA 数据库成为现实。这将帮助广大患者快速准确地找到合适的供者，也将极大地提高骨髓库的使用率，还可以为 HLA 的科学研究与技术创新提供基础性的数据支持。人 类 血 小 板 抗 原 (HPA)分 型血小板是血液中的有形成分之一，在止血及维持血管内皮细胞的完整性方面具有重要作用。目前，血小板输注已成为肿瘤、恶性血液病、骨髓衰竭等疾病及外周造血干细胞移植患者治疗的一个重要治疗手段。HPA 即人类血小板抗原，血液供者和受者的 HPA 不相合可导致血小板输注无效（PTR）、输血后紫癜（PTP）以及新生儿同种免疫性血小板减少性紫癜（NAITP）等。因此，建立准确的
15、 HPA 分型技术对于血小板减少症的诊断和血小板输注等临床医疗活动具有非常重要的意义。一直以来，医学上一直用传统的血清学方法进行 HPA 分型，由于缺乏高质量、高效价抗血清等多种因素的制约，始终无法对 HPA 进行全面准确的分型。随着对 HPA 基因的深入研究，将基因检测技术应用于血小板分型中，极大地提高了 HPA 分型的水平。华大基因临床检验中心（简称华大临检中心）掌握了多种 HPA 基因分型方法，可以满足不同的分型需求。华大临检中心提供的 HPA 基因检测服务不仅通量高，适合大量样本的规模检测；而且结果稳定；并能够检测出 18 个血小板抗原系统。华大临检中心的 HLA 分型技术已经非常成熟
16、，患者在进行血小板输注前，可以进行 HPA 联合 HLA 分型检测，更具可靠性和和安全性；而且中心对 HPA 进行高通量检测，在成本、准确性上比起其他机构更具优势。华大临检中心提供的 HPA 分型检测结果，不仅可以作为血小板减少症的诊断和血小板输注的依据；还可以在更大范围里建立血小板数据库，一方面可以让受者找到与之匹配的供者，及时进行疾病治疗；另一方面可以更好的研究 HPA 在中国人群中分布的基因频率，给 HPA 相关疾病研究提供依据。Kir PCR-SSP 分 型 检 测Kir (The killer cell immunoglobulin-like receptor)，即杀伤细胞免疫球蛋白
17、样受体，在病毒感染、肿瘤形成、移植受者免疫状态和自身免疫性疾病中发挥着重要作用。在造血干细胞移植中，供者和受者的 HLA（人类白细胞抗原）相合程度越高，移植就越容易成功；而 Kir 则相反，研究表明，供者和受者的 Kir 不相合，会降低排斥的发生风险。因此 Kir 分型可以为骨髓移植供受者的选择提供参考，有效的提高骨髓移植成功率。华大基因临床检验中心采用 PCR-SSP 技术对 kir 进行分型检测，不仅简单、快速、低成本，而且准确性高，可以成为供临床治疗参考的可靠依据。地 中 海 贫 血 基 因 检 测地中海贫血（俗称“软癌”）是一种遗传性溶血性贫血，是由珠蛋白基因的缺陷导致血红蛋白组成成分
18、发生改变。地中海贫血，按照血红蛋白受损伤的位置，主要有 地中海贫血（构成血红蛋白的氨基酸的 链受到损伤）和 地中海贫血（构成血红蛋白的氨基酸的 链受到损伤）。也可以按照基因缺损的数目来分为轻型，中间型和重型地中海贫血。据世界卫生组织和国际地中海贫血协会资料，全世界大约 7%的人群携带地中海贫血基因，每年有 50 万重型地中海贫血新生儿出生。在我国，地中海贫血主要发生在长江流域以南的广东、广西、四川、云南、贵州、湖南、江西、浙江、福建、海南等地，其中两广、云贵以及海南是高发区。我国人群的地贫基因携带率为 1.92%14.95%，其中广东、广西、海南省人群中“地贫”基因携带者占本省总人口的 11%
19、至 25%,每年有数千重型地贫患儿出生。若夫妻为同型地中海贫血的携带者，每次怀孕，其子女有 1/4 的机会为正常，1/2 的机会为带因者，另 1/4 的机会为重型地中海型贫血患者，因此，在遗传咨询及产前诊断方面，这是非常重要的疾病。地中海贫血的症状有1.重型：出生数日即出现贫血，肝脾肿大进行性加重，黄疸，发育不良，头大，眼距宽，马鞍鼻，前额两颊突出，少数患者在肋骨和脊椎之间发生胸腔肿块，亦可见胆石症，下肢溃疡，常见并发症有急性心包炎，继发性脾功能亢进，血色病。2.中间型：轻度至中度贫血，患者大多可存活至成年。3.轻型：轻度贫血或无症状，一般在调查家族史时被发现。对于重型地贫，目前除造血干细胞移植外无有效根治手段。重型地贫患儿需终身接受定期输血和去铁治疗，每年输血及治疗费用约 5 万元/人，并随着年龄增长费用逐渐增加。目前造血干细胞移植是根治地贫的唯一手段，移植费用约 30 万元。因此，在产前对地中海贫血进行筛查显得十分有必要。控制地中海贫血，预防是关键，婚检、孕检和产检是降低地贫儿出生率的三道防线。目前地贫有多种筛查方法，但基因检测是诊断地贫的金标准，基因检测能够大大提高地贫检测的准确性，减少地贫的漏检率，从而降低重型地贫的发病率。
