CD4+CD25+调节性T细胞对哮喘大鼠免疫功能影响.docx

1、CD4+CD25+调节性 T 细胞对哮喘大鼠免疫功能影响来源：创新医学网作者：薛克营,金卫国*,王成国,程立 作者单位：郧阳医学院附属东风医院呼吸内科,湖北 十堰【摘要】 目的:观察 CD4+CD25+调节性 T 细胞(CD4+CD25+ Treg)对 CD4+CD25-T 细胞增殖和Th1/Th2 细胞因子分泌的影响，探讨其在哮喘气道炎症中的作用机制。方法:将哮喘大鼠 CD4+CD25- T细胞分别与卵白蛋白(OVA)免疫耐受大鼠 CD4+CD25+ Treg 细胞和哮喘大鼠 CD4+CD25+ Treg 细胞联合培养，3H 胸腺嘧啶核苷(3H-TdR)掺入法测量细胞增殖情况，ELISA 检

2、测细胞 IL-4、IL-5 和 IFN- 含量。结果:OVA 耐受大鼠 CD4+CD25+ Treg 细胞能抑制 CD4+CD25-T 细胞增殖和 Th2 细胞因子分泌(P0.05);与 C 组相比，B 组 IFN- 水平明显下降，差异有显著性(P0.05 ，#P0.05;与 B 组比较，*P0.05，#P0.053 讨论支气管哮喘是由多种细胞如嗜酸性粒细胞、肥大细胞、T 细胞、中性粒细胞、气道上皮细胞等细胞组分参与的气道慢性炎症性疾病7。其中淋巴细胞产生 Th1、Th2 细胞因子失衡在哮喘的发病机制中起重要作用8-10。CD4+ T 淋巴细胞根据产生细胞因子类型不同而分为 Th1、Th2 细

3、胞亚群。Thl 细胞主要分泌 IL-2、IFN- ，诱导巨噬细胞活化和迟发型超敏反应，也可诱导 B 细胞产生 IgA、IgG 、IgM，但不产生IgE;Th2 细胞主要分泌 IL-4、IL-5、IL-10 、IL-13，诱导肥大细胞、嗜酸性粒细胞生长、分化和产生包括 IgE 在内的免疫球蛋白。其中 IFN-、IL-4 是 Th1 和 Th2 细胞特征性的细胞因子。Th1、Th2 细胞因子可促进本亚群和抑制另一亚群的生长、分化。Thl 细胞产生的 IFN- 能抑制Th2 细胞的增殖和 IL-4 依赖的 IgE 合成;Th2 细胞产生的 IL-4、L-10 可通过加强 IL-4 分泌，促进 Th2

4、细胞分化，抑制 Th1 细胞分化11-13。支气管哮喘存在 T 细胞尤其是 Th2 的过度活化，并认为 Th2 优势应答是哮喘发病的始动因素和进展因素。分泌增加的 Th2 型细胞因子如 IL-4、IL-5、IL-10、IL-13等可以诱导 IgE 产生，刺激嗜酸性粒细胞增殖、活化，进而通过分泌多种促炎介质引起呼吸道炎症和支气管痉挛。Th1 型细胞因子 IL-2、IFN- 等参与 Th1 细胞分化的调节，能够抑制 Th2 细胞因子 IL-4、IL-5 的产生，并阻断 IgE 的合成，从而有效地抑制变应原诱导的气道高反应性。由于 Th1/Th2 细胞因子之间相互作用的失衡在哮喘的发病机制中具有十分

5、重要的意义，因此研究CD4+CD25+ Treg 细胞对效应性 CD4+ T 细胞增殖及 Th1/Th2 细胞因子分泌的影响利于阐明其在哮喘发病中的作用。本研究通过体外实验证实 OVA 免疫耐受大鼠的 CD4+CD25+ Treg 细胞能够抑制效应性CD4+ T 细胞增殖，抑制 Th 细胞因子尤其是 Th2 的分泌，纠正 Th1/Th2 失衡，进而使气道炎症减轻，缓解哮喘症状。但 OVA 免疫耐受大鼠 CD4+CD25+ Treg 细胞未能明显抑制哮喘大鼠效应性 CD4+ T 细胞 IFN- 的分泌，推测可能和 IL-4、IL-5 水平明显下降后，增强 Th0 向 Th1 分化能力，使 CD4

6、+ T 细胞大量向 Th1 分化和活化并大量分泌 IFN- 有关。哮喘大鼠自身的 CD4+CD25+ Treg 细胞虽能抑制CD4+CD25- T 细胞的增殖和 IL-4、IL-5 分泌，但该能力明显弱于 OVA 免疫耐受大鼠 CD4+CD25+ Treg 细胞，且不能提高 IFN- 水平，因此不能纠正 Th1/Th2 细胞因子的失衡，导致了哮喘慢性气道炎症的发生和发展，提示哮喘大鼠的 CD4+CD25+ Treg 细胞存在功能缺陷。本研究表明 CD4+CD25+ Treg 细胞系通过抑制 CD4+CD25- T 细胞的增殖和影响 Th1/Th2 细胞因子的分泌发挥作用;哮喘大鼠 CD4+CD

7、25+ Treg 细胞的抑制功能异常可能和哮喘慢性气道炎症的发生和发展有关。【参考文献】1 Kingsley CI,Karim M,Bushell AR,et al.CD4+CD25+ regulatory T cells prevent graft rejection:CTLA-4- and IL-10-dependent immunoregulation of alloresponsesJ.J Immunol,2002,168(3):1 080-1 086.2 Maloy KJ,Salaun L,Cahill R,et al.CD4+CD25+ T(R) cells suppress in

8、nate immune pathology through cytokine-dependent mechanismsJ.J Exp Med,2003,197(1):111-119.3 薛克营，周咏明，熊盛道，等.支气管哮喘患者外周血 CD4+CD25+ 调节性 T 水平及 Foxp3 mRNA 表达的分析J.中国医师进修杂志,2006,29(9):11-13.4 Xue KY,Zhou YM,Xiong SD,et al.Influence of Danshen injection on airway inflammation and CD4+CD25+ regulatory T cells

9、 of asthmatic ratsJ.Journal of Nanjing Medical University,2006,20(5):292-295.5 薛克营，熊盛道，熊维宁，等.鼻内滴入卵白蛋白诱导大鼠免疫耐受模型的建立 J.中国现代医学杂志，2006,16(18):2 770-2 772.6 王成国，薛克营，程 立，等.磁激活分选法双重分离大鼠外周血单个核细胞 CD4+CD25+调节性 T 细胞J. 郧阳医学院学报 ,2008,27(4):295-297.7 中华医学会呼吸病学分会哮喘学组.支气管哮喘防治指南J.中华结核和呼吸杂志,2003,26(3):132-138.8 Rojas

10、 Ramos E, Martnez Jimnez N, Reyes Salinas A.The Th2 theory in allergy:present and future directionsJ.Rev Alerg Mex,2003,50(2):64-70.9 Teixeira LK,Fonseca BP,Barboza BA,et al.The role of interferon- on immune and allergic responsesJ.Mem Inst Oswaldo Cruz,2005,100(Suppl 1):137-144.10 Koh YI,Choi IS,Ki

11、m WY,et al.Effects of BCG infection on Schultz-Dale reaction,allergen-specific IgE levels,and Th2 immune response in sensitized ratsJ.Korean J Intern Med,2001,16(3):180-185.11 Busse WW,Lemanske RF Jr.AsthmaJ.N Engl J Med,2001,344(5):350-362.12 Martin P,Villares R,Rodriguez-Mascarenhas S,et al.Control of T helper 2 cell function and allergic airway inflammation by PKCzetaJ.Proc Natl Acad Sci USA,2005,102(28):9 866-9 871.13 Rissoan MC,Soumelis V,Kadowak N,et al.Reciprocal control of T helper cell and dendritic cell differentiationJ.Science,1999,283(5 405):1 183-1 186.