1、1清开灵注射液质量标准草案清开灵注射液Qingkailing Zhusheye【处方】 胆酸 3.25g 珍珠母（粉） 50.0g猪去氧胆酸 3.75g 栀子 25.0g水牛角（粉） 25.0g 板蓝根 200.0g黄芩苷 5.0g 金银花 60.0g 【制法】以上八味，板蓝根加水煎煮二次，每次 1 小时，合并煎液，滤过，滤液浓缩至 200ml，加乙醇使含醇量达 60%，冷藏，滤过，滤液回收乙醇，加水，冷藏备用。栀子加水煎煮二次，第一次 1 小时，第二次 0.5 小时，合并煎液，滤过，滤液浓缩至 25ml，加乙醇使含醇量达 60%，冷藏，滤过，滤液回收乙醇，加水，冷藏备用。金 银 花 加 水
2、煎 煮 二 次 ， 每 次 0.5 小时， 合 并 煎 液 ， 滤 过 ，滤 液 浓 缩 至 60ml， 加 乙 醇 使含醇量达 75%，滤过，滤液调 节 pH 值 至 8.0， 冷 藏 ，回 收 乙 醇 ， 再 加 乙 醇 使含醇量达 85%，冷藏，滤过， 滤 液 回 收 乙 醇 ， 加 水 ， 冷藏 备 用 。 水牛角粉用氢氧化钡溶液，珍珠母粉用硫酸分别水解 79 小时，滤过，合并滤液，调节 pH 值至 3.54.0，滤过，滤液加乙醇使含醇量达 60%，冷藏，滤过，滤液回收乙醇，加水，冷藏备用。将栀子液、板蓝根液和水牛角、珍珠母水解混合液合并后，加到胆酸、猪去氧胆酸的 75%乙醇溶液中，混
3、匀，加 乙醇 使含醇量达 75%，调节 pH 值至 7.0，冷藏，滤过，滤液回收乙醇，加水，冷藏备用。黄芩苷用注射用水溶解，调节 pH 值至 7.5，加入金银花提取液，混匀，与上述各备用液合并，混匀，并加注射用水至 1000ml，再经活性炭处理后，冷藏，灌封，灭菌，即得。【性状】本品为棕黄色或棕红色的澄明液体。 【鉴别】 （1）取本品 10ml ，置水浴上蒸干，放冷，残渣加乙醇 1ml 使溶解，取上清液作为供试品溶液。另取栀子苷对照品，加乙醇制成每 1ml 含 4mg 的溶液，作为对照品溶液。照薄层色谱法（中国药典 2010 年版一部附录 B）试验，吸取上述两种溶液各 5l ，分别点于同一硅胶
4、 G 薄层板上，以乙酸乙酯丙酮甲酸水（5：5：1：1）为展开剂，展开，取出，晾干，喷以 10% 硫酸乙醇溶液，在 105 加热至斑点显色清晰。供试品色谱中，在与对照品色2谱相应的位置上，显相同颜色的斑点。 （2）取本品 1ml ，加乙醇 2ml ，混匀，作为供试品溶液。另取胆酸对照品、猪去氧胆酸对照品，加乙醇制成每 1ml 各含 1mg 的混合溶液，作为对照品溶液。照薄层色谱法（中国药典 2010 年版一部附录 B ）试验，吸取上述两种溶液各 5l，分别点于同一硅胶 G 薄层板上，以异辛烷乙酸乙酯冰醋酸（15：7：5）为展开剂，展开，取出，晾干，喷以 10% 硫酸乙醇溶液，在105 加热至斑点
5、显色清晰。供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点。 （3）取黄芩苷对照品，加 70% 乙醇制成每 1ml 含 1mg 的溶液，作为对照品溶液。照薄层色谱法（中国药典 2010 年版一部附录 B ）试验，吸取【鉴别】 （2）项下的供试品溶液及上述对照品溶液各 2l，分别点于同一聚酰胺薄膜上，以醋酸为展开剂，展开，取出，晾干，喷以 1三氯化铁乙醇溶液。供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点。 【指纹图谱】照高效液相色谱法（中国药典 2010 年版一部附录 VI D）测定。色谱条件与系统适用性试验 以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂（色谱柱Phenomenex L
6、una C18 250mm4.6mm，5m） ； 以乙腈为流动相 A，以 0.1甲酸溶液为流动相 B，按下表中的规定进行梯度洗脱；流速为 0.5 ml/min；检测波长为 254 nm；柱温 25。 理论板数按栀子苷峰计算应不低于 100000。时间（分钟） 流动相 A(%) 流动相 B(%)04242656575758501212191910010001008888818100100参照物溶液的制备 取栀子苷对照品适量，精密称定，加甲醇制成每 1ml中含 0.2mg 的溶液，即得。供试品溶液的制备 取本品，滤过，取续滤液，即得。 3测定法 分别精密吸取参照物溶液与供试品溶液各 10l，注入液
7、相色谱仪，测定，记录 65 分钟内的色谱峰，即得。本品指纹图谱中应呈现与栀子苷对照品保留时间一致的色谱峰，并应出现10 个共有峰，以 1、3、5、6、7、8、9、10（S）号峰为标记，经中药色谱指纹图谱相似度评价系统软件计算，与对照指纹图谱相比较，相似度不得低于0.80。图 S 清开灵注射液对照指纹图谱10（S） 栀子苷对照品【检查】山银花：取本品 20ml，加盐酸 3 滴，边加边搅拌，滤过，滤液加氢氧化钠试液调节 pH 值至 7，用水饱和的正丁醇振摇提取 2 次，每次 30ml，合并正丁醇液，用氨试液洗涤两次，每次 30ml，分取正丁醇层，蒸干，残渣加甲醇 2ml 使溶解，作为供试品溶液。另
8、取灰毡毛忍冬皂苷乙对照品，加甲醇制成每 1ml 含 1mg 的溶液，作为对照品溶液。照薄层色谱法（中国药典 2010 年版一部附录 B）试验，吸取上述两种溶液各 2 l，分别点于同一硅胶 G 薄层板上，以三氯甲烷-甲醇- 水（ 6:4:1）为展开剂，展开，取出，晾干，喷以 10%硫酸乙醇溶液，在 105加热至斑点显色清晰。供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，不得显相同颜色的斑点。溶液的颜色 精密量取本品 1ml，置 50ml 量瓶中，加水稀释至刻度，摇匀，与黄色 10 号标准比色液（中国药典 2010 年版二部附录 IX A 第一法）比较，应不得更深。 4pH 值 应为 6.87.5 （
9、中国药典 2010 年版一部附录 G ） 。 炽灼残渣 精密量取本品 5ml，依法测定（中国药典 2010 年版一部附录 J） ，每 1ml 应为 3.0 8.5mg。总固体 精密量取本品 2ml，置 105干燥至恒重的蒸发皿中，蒸干，在105干燥 2 小时，移至干燥器中，冷却 30 分钟，迅速精密称定重量，每 1ml遗留残渣应为 3060mg。有关物质 除蛋白质、树脂、草酸盐外，照注射剂有关物质检查法（中国药典 2010 年版一部附录 S）检查，应符合规定。蛋白质 取本品 1ml，加鞣酸试液 13 滴，不得出现浑浊。 树脂 取本品 5ml，加三氯甲烷 10ml，振摇提取，分取三氯甲烷液，置水
10、浴上蒸干，残渣加冰醋酸 2ml 使溶解，置具塞试管中，加水 3ml ，混匀，放置 30 分钟，可有轻微浑浊，不得出现絮状物或沉淀。草酸盐 取本品 5ml ，置离心管中，滴加 6mol/L 盐酸溶液 5 滴，搅匀，离心，吸取上清液，滤过，取滤液 2ml，调节 pH 值至 56 ，加 3%氯化钙溶液 23 滴，放置 10 分钟，不得出现沉淀。 热原 取本品，依法检查（中国药典 2010 年版一部附录 XIII A） ，剂量按家兔体重每 1kg 注射 5ml，应符合规定。异常毒性 取本品，依法检查（中国药典 2010 年版一部附录 XIII E）,按静脉注射给药，应符合规定。过敏反应 取本品，依法检
11、查（中国药典 2010 年版一部附录 XIII G） ，应符合规定。溶血与凝聚 取本品，依法检查（中国药典 2010 年版一部附录 XIII H） ，应符合规定。其他 应符合注射剂项下有关的各项规定（中国药典 2010 年版一部附录 U ） 。【 含量测定 】胆酸、猪去氧胆酸 照高效液相色谱法（中国药典 2010 年版一部附录 VI D）测定。 色谱条件与系统适用性试验 以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以甲醇-乙腈-0.1%甲酸溶液(68:17:15)为流动相；用蒸发光散射检测器检测。理论板数5按胆酸峰计算应不低于 4000。对照品溶液的制备 取胆酸对照品、猪去氧胆酸对照品适量，精密称定，加甲
12、醇制成每 1ml 含胆酸 0.2mg 和猪去氧胆酸 0.1mg 的混合溶液，即得。供试品溶液的制备 精密量取本品 1ml，置 10ml 量瓶中，加甲醇稀释至刻度，摇匀，滤过，取续滤液，即得。测定法 分别精密吸取对照品溶液 5l、15l，供试品溶液 10l，注入液相色谱仪，测定，以外标两点法对数方程计算，即得。 本品每 1ml 含胆酸（C 24 H 40 O5）应为 1.503.25mg；含猪去氧胆酸（ C 24 H 40 O4）应为 1.003.20 mg。栀子 照高效液相色谱法（中国药典 2010 年版一部附录 D ）测定。 色谱条件与系统适用性试验 以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以乙腈水
13、（10：90）为流动相；检测波长为 238nm。理论板数按栀子苷峰计算应不低于 3000。 对照品溶液的制备 取栀子苷对照品适量，精密称定，加甲醇制成每 1ml 含 30 g 的溶液，即得。 供试品溶液的制备 精密量取本品 5ml，置 50ml 量瓶中，加甲醇稀释至刻度，摇匀，滤过，取续滤液，即得。 测定法 分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各 10l，注入液相色谱仪，测定，即得。 本品每 1ml 含栀子以栀子苷（C 17 H 24 O 10）计，不得少于 0.10 mg。 黄芩苷 照高效液相色谱法（中国药典 2010 年版一部附录 D ）测定。 色谱条件与系统适用性试验 以十八烷基硅烷键合硅
14、胶为填充剂；甲醇水 磷酸（47：53：0.2）为流动相；检测波长为 276nm 。理论板数按黄芩苷峰计算应不低于 3000。 对照品溶液的制备 取黄芩苷对照品适量，精密称定，置 100ml 量瓶中，加 70% 乙醇适量使溶解，加流动相 1ml，再加 70%乙醇稀释至刻度，摇匀；精密量取 5ml，置 10ml 量瓶中，加 70%乙醇稀释至刻度，摇匀，即得（每 1ml 中含黄芩苷 50 g ） 。 供试品溶液的制备 精密量取本品 1ml ，置 100ml 量瓶中，加 70%乙醇稀6释至刻度，摇匀，滤过，取续滤液，即得。 测定法 分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各 10l，注入液相色谱仪，测定，即
15、得。 本品每 1ml 含黄芩苷（C 21 H 18 O 11） ，应为 3.55.5mg 。 总氮量 精密量取本品 0.5ml ，照氮测定法（中国药典 2010 年版一部附录 L 第二法）测定，即得。 本品每 1ml 含总氮（N）应为 2.23.0mg。【功能与主治】 清热解毒，化痰通络，醒神开窍。用于热病，神昏，中风偏瘫，神志不清；急性肝炎、上呼吸道感染、肺炎、脑血栓形成、脑出血见上述证候者。 【用法与用量】 肌内注射，一日 24ml。重症患者静脉滴注，一日 2040ml，以 10% 葡萄糖注射液 200ml 或氯化钠注射液 100ml 稀释后使用。 【注意】 (1) 有表证恶寒发热者、药物
16、过敏史者慎用。(2) 如出现过敏反应应及时停药并做脱敏处理。 (3) 本品如产生沉淀或浑浊时不得使用。如经 10% 葡萄糖或氯化钠注射液稀释后，出现浑浊亦不得使用。(4) 药物配伍：到目前为止，已确认清开灵注射液不能与硫酸庆大霉素、青霉素 G 钾、肾上腺素、阿拉明、乳糖酸红霉素、多巴胺、山梗菜碱、硫酸美芬丁胺等药物配伍使用。(5) 清开灵注射液稀释以后，必须在 4 小时以内使用。(6) 输液速度：注意滴速勿快，儿童以 2040 滴/ 分为宜，成年人以4060 滴/分为宜。(7) 除按 用法与用量 中说明使用以外，还可用 5% 葡萄糖注射液、氯化钠注射液按每 10ml 药液加入 100ml 溶液
17、稀释后使用。 【规格】 （1）每支装 2ml （2）每支装 10ml 【贮藏】密闭。注：1. 胆酸 取本品 20mg，精密称定，置 100ml 量瓶中，加甲醇使溶解并稀释至刻度，摇匀，照清开灵注射液【含量测定】胆酸、猪去氧胆酸项下方法，7依法测定。本品含胆酸（C 24 H 40 O5 ）不得少于 80.0。2. 猪去氧胆酸 取本品 10mg，精密称定，置 100ml 量瓶中，加甲醇使溶解并稀释至刻度，摇匀，照清开灵注射液【含量测定】胆酸、猪去氧胆酸项下方法，依法测定。本品含猪去氧胆酸（ C 24 H 40 O4）不得少于 80.0。3黄芩苷 取本品 10mg，精密称定，置 100ml 量瓶中，加 70% 乙醇适量使溶解，加流动相 1ml，再加 70%乙醇稀释至刻度，摇匀；精密量取 5ml，置10ml 量瓶中，加 70%乙醇稀释至刻度，摇匀，照清开灵注射液【含量测定】黄芩苷项下方法，依法测定。 本品含黄芩苷（C 21H18O11）不得少于 90.0。
