1、黑木耳多糖结构表征抑菌作用抑制肿瘤延缓衰老抗心肌缺血生物活性摘要:黑木耳是我国重要的食用菌作物之一黑木耳中含有大量的活性成分一黑木耳多糖近代，由于黑木耳多糖具有重大保健价值而倍受学术界重视，本文在前人的工作基础上开展了对黑木耳多糖AAP-a 级分的特性、结构以及生物活性，包括抗菌作用、抑制肿瘤作用、抗衰老抗心肌缺血及其分子作用机理等的系统研究主要研究结果如下 1.黑木耳多糖 AAP-a 级分的化学特性表征 将市售黑木耳干品去杂、粉碎、脱脂、浸提超声波协同酶法、离心或过滤、浓缩，醇沉、酶与 Sevage 复合法脱除蛋白质，经冷冻干燥后，即得黑木耳多糖 黑木耳多糖的平均提取率为 8.58采用 DE
2、AE SephadeX A-25 色谱柱对脱除蛋白质后的黑木耳多糖进行分级，并用 Sepbadex G-200 凝胶色谱柱纯化，得到黑木耳多糖 AAP-a 级分，该级分得率为 4.59并对 AAP-a 级分的纯度和理化特性进行了鉴定经过液相色谱，纸层析分析说明，AAP-a 级分是由葡萄糖、岩藻糖、甘露糖、葡萄糖醛酸和鼠李糖组成的杂多糖，摩尔比例为 11.521.271.000.610.23 凝胶柱层析法测得其平均分子量为 165000AAP- a 级分中中性糖含量为58.93，葡萄糖醛酸的含量为 33.82蛋白质含量为 1.90钙、镁、硒、铁元素含量分别为3.01mgg、2.23mg g 、2
3、3.51ttgg 和 1.04mgg 采用原子力显微镜和扫描电镜观察了多糖分子的形貌推测糖分子在固态时是产生大的岛屿状的宏观聚集，分子间分子内结合致密 2.黑木耳多糖 AAP-a 级分的抗菌效果研究 结果表明，AAP-a 级分对大多数革兰氏阳性细菌和革兰氏阴性细菌均有较强的抑菌作用，对部分酵母菌也有良好的抑制生长作用，且抑菌所需浓度低，抑菌 pH 值作用范围广、热稳定性强，其抗菌效果略低于苯甲酸钠，对霉菌没有明显的抑制作用 3.黑木耳多糖 AAP-a 级分对肝癌H22 细胞的生长抑制作用 通过体内给药，结果显示 AAP-a 级分能显著抑制肝癌 H22 细胞的生长，同时明显提高了荷瘤小鼠的免疫器
4、官重量，促进小鼠淋巴细胞的增殖作用和迟发型超敏反应强度，增强免疫作用等，其作用效果与剂量呈正相关上述结果提示，AAP- a 级分的体内抗肿瘤活性是通过增强机体的免疫活性来实现的另外它可使荷瘤小鼠血清的 SOD 含量升高，MDA 值降低说明其抗肿瘤活性还与其抗氧化活性有关 4.黑木耳多糖 AAP-a 级分的抗衰老作用 实验表明，AAP- a 可降低小鼠体内MDA 和脂褐素含量，并能抑制衰老模型小鼠体内 MDA 和脂褐素含量的升高，说明 AAP-a 对细胞结构和细胞物质如脂质、蛋白质等具有良好的保护作用 AAP-a 能提高小鼠体内 GSH-Px活性和 SOD 活性，甚至在衰老模型的某些器官中，它们
5、的活性高于正常对照组 5.黑木耳多糖 AAP-a 级分抗衰老的作用机理 通过 DNA“ladder”和流式细胞仪检测发现，一定浓度的 AAP-a可以调节胸腺细胞的细胞周期，并能在一定程度上抑制胸腺细胞过度凋亡，降低其凋亡率 AAP-a 能下调促凋亡的 Fas 基因的转录，并上调抗凋亡的 Bc1-2 基因的转录，说明 AAP-a 在调控细胞凋亡方面具有下调促凋亡基因表达及上调抗凋亡基因表达的协同作用，从而重塑凋亡调控基因表达的平衡状态，逆转衰老时细胞过度凋亡的趋势从而延缓衰老 6.黑木耳多糖 AAP-a 级分的抗心肌缺血活性 实验证明 AAP-a 具有改善心肌缺血的作用同时还能降低血压，而对心律
6、没有明显影响 AAP-a 50mgKg组在改善心电图 ST 段的上移作用较明显，且有一定程度的缩小心肌梗塞区面积的作用提示 AAP-a 在抗氧自由基这一保护缺血心肌的重要途径中有显著作用，这可能是AAP-a 抗心肌缺血、保护缺血时心肌细胞损伤的机制之一首次报道 AAP-a 能显著提高血清中 PGI代谢产物 6-KetoPGF的水平，而对 TXA的代谢产物 TXB水平的影响不显著，即能促进促缺血心肌组织 PGI的合成，这可能是 AAP-a 保护心肌缺血的又一机制实验同时发现，结扎大鼠冠脉后血清中 NO 为水平显著降低，而 ET 含量明显升高，说明结扎大鼠冠脉后血管舒缩因子失去正常的平衡状态，而中高剂量的 AAP-a 可显著的调整恢复这种状态标题:黑木耳多糖结构表征抑菌作用抑制肿瘤延缓衰老抗心肌缺血生物活性专业:食品科学学位:博士单位:华中农业大学关键词:黑木耳多糖 结构表征 抑菌作用 抑制肿瘤 延缓衰老 抗心肌缺血 生物活性 论文时间:2006分类:TS201.2 S646.6 导师:张声华 语种:中文文摘URL:黑木耳多糖结构表征抑菌作用抑制肿瘤延缓衰老抗心肌缺血生物活性
