1、广东佛山地区地中海贫血基因突变类型分析邹林 1 周少雄 1 胡佩村 2 黄杰 3（1佛山市第二人民医院检验科 广东佛山 528000）（2佛山市第二人民医院呼吸科 广东佛山 528000）（3广东医学院检验学院五年制本科生 广东东莞 523808）【摘要】目的 了解佛山地区 与 地中海贫血患者的基因突变类型，为开展佛山地区 与 地中海贫血的遗传咨询，产前诊断和预防计划提供参考。方法 回顾性分析 2011年 1 月至 2012 年 12 月佛山市第二人民医院地中海贫血基因检测 PCR阳性的 351名患者的地贫基因突变类型。结果 351名地中海贫血患者中 200名 地中海贫血患者，其中东南亚型缺失
2、（ - -SEA）154 例，右侧缺失（- 3.7）20 例，左侧缺失（- 4.2）8 例，缺失型HbH病（- -SEA/-3.7）11 例，缺失型 HbH病（- -SEA/-4.2）7 例。136 名 地中海贫血患者，其中 CD41-42杂合子 53例，ISV-II-654 杂合子 38 例，CD28 杂合子 16例，CD17 杂合子 13例，CD29 杂合子 3例，CD43 杂合子 3例，E 杂合子 5例，CD41-42 纯合子、CD17纯合子、CD71-72 杂合子、CD41-42，ISV-II-654 双重杂合子、 Int杂合子各 1例，15 名 复合型地中海贫血患者。结论 佛山地区的
3、 地贫人群中东南亚缺失型占主导地位，而 CD41-42突变与 ISV-II-654突变是 地中海贫血最常见的基因突变类型。【关键词】地中海贫血；基因突变Analysis on Gene Mutation Types of Thalassemia in Foshan Area of GuangdongZou Lin Zhou Shaoxiong Hu Peicun Huang Jie【Abstract】Objective To explore the gene mutation types of - thalassemia and - thalassemia in Foshan area of
4、Guangdong. Methods Retrospective analysis the 351 cases of Thalassemia patient from Jan 2011 to Dec 2012 in The Second Peoples Hospital of Foshan which were detected postive in PCR method. Results Among the 351 ceses,200 cases were - thalassemia,including 154 cases of - -SEA, 20 cases of -3.7, 8 cas
5、es of -4.2,11 cases of - -SEA/-3.7,7 cases of - -SEA/-4.2。136 cases were- thalassemia,134 cases were heterozygote,including CD41-42 ISV-II-654、 CD28、CD17、 CD29、 CD43、E、CD71-72、 CD41-42 comlexISV-II-654,2 cases of homozygote.And 15 cases were-and -complex thalassemia . Conclusion In Foshan,the common
6、est- thalassemia mutation is - -SEA , the commonest - thalassemia mutation is CD41-42 and ISV-II-65 .【Key words】Thalassemia; Gene mutation;地中海贫血 (以下简称地贫)，是一种危害极大的单基因遗传性疾病。其临床最常见的类型有 地贫与 地贫两种。广东和广西人群中 与 地贫基因携带率合计分别高达1107 1和 2398 2 。严重类型( 包括重型和中间型) 与 地贫均为致死性或致1通讯作者：周少雄，主任技师，佛山市禅城区卫国路 78 号，佛山市第二人民医院检验科
7、 528000，联系电话：0757-88032088 ，手机：13068622783，E-mail： 残性血液病，目前尚无理想的治愈方法，给家庭和社会带来沉重负担。夫妇双方若同为轻型地贫（即地贫基因携带者） ，怀孕以后，对子代的遗传几率是： 1/4 为正常胎儿，1/2 为轻型地贫（同父母一样） ，而 1/4 为重型地贫患者。地中海贫血的遗传与性别无关，男胎女胎发病机率均等。 因此， 开展地贫筛查，指导高风险夫妇在怀孕后的特定时期进行产前诊断，通过淘汰性人工流产，是防止重型地贫儿出生，达到优生优育的重要措施。本文通过对佛山地区 与 地中海贫血患者的基因突变类型分析，明确了本地区的地贫基因分布情况
8、，为本地区开展产前诊断和遗传咨询提供理论依据。1 对象与方法1.1 对象：2011 年 1 月至 2012 年 12 月佛山市第二人民医院送往广州金域检验医学中心进行地中海贫血基因检测 PCR阳性的 351名患者，均为本地户口，年龄主要为 0-40岁。1.2 方法1.2.1 采血：使用基因诊断的真空采血管，如成人用柠檬酸钠或乙二胺四乙酸( EDTA)抗凝全血提取 DNA， 不可用肝素抗凝全血， 及时送检或置 2 8 冰箱中并于 5 d 内检测， 或在 20 存放 1 个月以内检测。1.2.2 方法 分为检测缺失型 -地贫和突变型 -地贫基因型的方法。-地贫采用跨越断裂点的 PCR技术 ( 也称
9、裂口 PCR， gap- PCR) ，检测东南亚型缺失（ - -SEA），右侧缺失（- 3.7），左侧缺失（- 4.2）。-地贫采用 PCR-膜反向点杂交技术( RDB) 检测 17种基因位点突变， 分别是 CD41-42、IVS-II-654、-28、CD71-72、CD17、E、CD31、CD27 /28、IVS1-1、CD43、-32、-29、-30、CD14-15、CAP、Int、IVS1-5。所用标本均为广州金域检验医学中心检测完成。作者进行回顾性分析。2 结果回顾性分析地中海贫血基因检测 PCR阳性的 351名患者，其中 200名 地中海贫血患者，占 56.9%，136 名 地中海
10、贫血患者，占 38.7%，15 名 复合型地中海贫血患者，占 4.4%。（1） 地贫患者的基因突变类型的分析：200 名 地中海贫血患者，- -SEA/ 154例，-3.7/ 20例，- 4.2/ 8例，- -SEA/-3.7 11例，- -SEA/-4.2地中 7例，其中东南亚型缺失（ - - SEA）所占比例最高，43.8%。详见表 1。表 1 地中海贫血患者的基因突变类型及所占比例基因类型 例数（n） 比例/%- -SEA/ 154 43.8-3.7/ 20 5.7-4.2/ 8 2.3- -SEA/-3.7 11 3.1- -SEA/-4.2 7 2.0合计 200 56.9（2） 地
11、贫患者的基因突变类型的分析：136 名 地中海贫血患者，其中 134名均为杂合子，2 名为纯合子。CD41-42 杂合子 53例，占 15.1%，其次为 ISV-II-654杂合子 38例，占 10.8%。以上 2种突变在 地贫中常见。详见表 2。（3） 复合型地贫患者的基因突变类型的分析：15 名 复合型地中海贫血患者，共占 4.4%。详见表 3。表 2 地中海贫血患者的基因突变类型及所占比例基因类型 例数（n） 比例/%CD41-42杂合子 53 15.1CD41-42纯合子 1 0.3ISV-II-654杂合子 38 10.8CD28杂合子 16 4.6CD17杂合子 13 3.7CD1
12、7纯合子 1 0.3CD29杂合子 3 0.8CD71-72杂合子 1 0.3CD43杂合子 3 0.8CD41-42，ISV-II-654 双重杂合子 1 0.3Int杂合子 1 0.3E 杂合子 5 1.4合计 136 38.7表 3 复合型地中海贫血患者的基因突变类型及所占比例基因类型 例数（n） 比例/%- -SEA/CD41-42 杂合子 4 1.1- -SEA/CD28 杂合子 1 0.3- -SEA/CD17 杂合子 1 0.3- -SEA/ISV-II-654 杂合子 1 0.3-3.7 /ISV-II-654 杂合子 2 0.6-3.7 /CD41-42 杂合子 2 0.6-
13、3.7 /CD28 杂合子 1 0.3-3.7 /CD41-42，CD28 双重杂合子 1 0.3-3.7 / CD654,CD28 双重杂合子 1 0.3-4.2/CD41-42 杂合子 1 0.3合计 15 4.43 讨论地中海贫血是我国南方最常见和危害最大,干预效果显著的一种出生缺陷病，被列为广东省出生缺陷重点干预病重之一 3。-地贫是由于第 16 号染色体短臂末端 - 珠蛋白基因缺陷所致，有缺失型和非缺失型两种，缺失型是我国主要类型，而东南亚缺失型（ - -SEA）、 右侧缺失(- 3.7) 和左侧缺失(- 4.2) 是中国人最常见的 -地贫缺失类型。-地贫根据受累的基因可以分为 4
14、种，累及一个基因的静止型( -/)，累及 2个基因的轻型(-/ 或 -/-) ，累及 3个基因的中间型 ( HbH 病，-/ -) 及 4个基因都累及的重型 - 地贫( Barts 水肿，-/-)。-地贫是由于第 11 号染色体短臂 -珠蛋白基因缺陷所致，绝大多数是由于基因发生了点突变，少数是因为基因发生了缺失。目前对地贫的治疗尚无好的办法， 因此对本病重在预防。在本研究中 351名地中海贫血患者中， 200名 地中海贫血患者，东南亚型缺失（ - -SEA）占 154例，右侧缺失（- 3.7）20 例，左侧缺失（- 4.2）8 例，缺失型 HbH病（- -SEA/-3.7）占 11例，缺失型
15、HbH病（- -SEA/-4.2）7 例。 这说明在佛山地区的 地贫人群中东南亚缺失型占主导地位，与广东人常见 地贫主要突变类型一致，同时也与同类研究结果相吻合 4-5。因此在佛山地区 地贫产前监控当中，东南亚缺失型基因应作为重点监控对象。 地中海贫血患者共 136名，共检测出 9种突变，12 种基因型，其中 CD41-42突变 54例，ISV-II-654 突变 38 例，CD28 突变 16例， CD17突变 14例，CD29 突变 3例，CD43突变 3例，E 突变 5例， CD71-72突变、CD41-42，ISV-II-654 双重突变、Int 突变各 1例。由此可以看出 CD41-
16、42突变与 ISV-II-654突变是佛山地区最常见的 地中海贫血基因突变类型，与广东地区同类研究结果基本吻合 6。因此在佛山地区开展 地中海贫血突变基因的产前诊断，尤其注意 CD41-42突变与 ISV-II-654突变。另外有 15名 复合型地中海贫血患者，共有 10 个基因型，有文献显示当名 与 地中海贫血双重杂合子时，筛查多表现 地中海贫血的特征 7。因此对 地贫患者要同时考虑合并 地贫杂合子的可能，防止漏检。本研究所获得的佛山地区地贫人群的基因突变类型分析资料，能够为本地区开展产前诊断和遗传咨询提供理论依，也能够为我市开展以产前诊断为手段的地贫预防计划提供参考。参考文献1 X u X
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