1、1陕西省疟疾实验室工作规范为进一步做好全省消疟工作，规范实验室管理，改进前期工作中存在的问题，根据国家消除疟疾技术方案（2011 版） 和消除疟疾考核评估方案（2013 版） ，现就我省疟疾实验室工作做如下要求：1 镜检镜检是疟疾诊断的重要手段，血片的制作质量直接关系到镜检结果的可靠与否，因此提高血片制作质量，规范血片管理，是镜检工作的基础；省、市、县疾控中心构成了我省疟疾诊断实验室网络，而县疾控中心及其设立的镜检站是血检工作的基本单位，其承担的工作分别为：1.1 镜检站镜检站由县疾控中心确立，对象为能够胜任疟疾血检工作的各类医疗机构或疾病预防控制机构，人员一般包括临床医生和检验科（室）检验人
2、员，工作如下：1.1.1 临床医生就病人发病情况进行甄别，确定是否属不明原因发热病人，对属于不明原因发热病人范畴的，开具疟原虫血检申请单。1.1.2 检验科接到疟原虫血检申请单后，首先完成“*县疟疾血检登记本”中“不明原因发热病人疟原虫血检登记表”各栏目的填写，抽取抗凝血 2-3ml（或制作滤纸血 3 张），同时制作血片至少 2 张，对制作的血片按附件 1 进行染色，镜检和保存，当镜检发现阳性或疑似病人时，报告县疾控中心，由县疾控中心对血片进行复核，当镜检血片确系阴性时，仅保留 1 张血片做上级部门复合用，另 1 张血片和抗凝血（或滤纸血）可自行处理。1.1.3 上述工作程序，各镜检站也可按本
3、机构工作模式加以调整，原则是保证“血检登记本”中各栏目的正确填写和与血片的对应关系，以及血片的制作质量和结果的准确等。1.2 县疾控中心1.2.1 承担辖区内各镜检站人员的专业培训、考核、督导及血片复核等。1.2.2 按照国家消除疟疾技术方案（2011 版） 要求,在辖区内设立镜检站，下达镜检任务。类县以乡镇为单位，年血检不明发热病人数按辖区人口数的 1计算，且流行季节（510 月）血检病人占检测总数的 80%；类县以县为单位，年血检不明发热病人数按辖区人口数的 0.5计算，且流行季节（510 月）血检病人占检测总数的 80%。21.2.3 为确保血片的唯一性，对各镜检站建立“识别码” ， “
4、识别码”一旦确定不得更改，长期有效，其编制原则是：用大写英文字母代替，如：某县 2015 年确定疟疾镜检站为县医院、玉树乡卫生院、石鼓乡卫生院 3 家，则指定其“识别码”分别为 A、B、C，如2016 年石鼓乡卫生院变更为湟源乡卫生院了，则不得使用前一年的 C 标识码，而应用其它历史上未曾使用的英文字母，如 D 等，第三年石鼓乡卫生院又开始从事血检工作了，则继续沿用以前的识别码 C,不得因年份变动另外再赋予其其它英文字母。1.2.4 视情况统一印制并下发*县疟疾血检登记本 （见附件 3） 、样本盒、滤纸血存放塑料袋、干燥剂、试管、注射器等。1.2.5 对下属各镜检站的可疑血片进行复核，确系阳性
5、时，连同血片及 2-3ml 抗凝血（或 3 张滤纸血）送市疾控进行复核，阴性时血片和抗凝血（或滤纸血）可自行处理。1.2.6 按季度填写“疟原虫血片镜检统计表” （附件 4） ，开展疟疾督导和血片复合工作，督导频次每年至少 1 次，血片复核为所有阳性血片和 10%的阴性血片；对复核的每一张血片按照附件 1“疟原虫镜检操作规程”中“疟疾血片制作评判标准”进行量化打分，填写“疟原虫血片镜检复核登记表” ，以60 分为制作合格，以8 分为染色合格，5 分清洁度合格，用下列公式计算各项指标：年血片制作合格率=年血片制作合格数/年血片复核总数100%年血片染色合格率=年血片染色合格数/年血片复核总数10
6、0%年血片清洁度合格率=年血片清洁度合格数/年血片复核总数100%年血片复核一致率=年镜检复核一致血片数/年血片复核总数100%年血片复核率=年镜检复核数/年血片总数100%1.2.7 定期或不定期地检查各镜检站血片质量，核对“疟疾血检登记本”与留存血片是否一致、表格中有无缺项或逻辑错误等，对存在的问题及时通报，并予以纠正。1.2.8 定期收集各镜检机构的血片样本及登记本做长期对应保存，以便世卫组织、国家、省、市的消疟检查和考核之用。1.3 市疾控中心1.3.1 承担县疾控中心人员的专业培训、镜检督导和血片复核工作。1.3.2 对辖区内可疑的阳性血片进行镜检和 PCR 复核，具体见“疟疾样本送
7、检要求” （ 附件 2） 。31.3.3 开展对辖区县疟疾镜检督导和血片复核。督导频次为每年至少 1 次，查看各县血检任务完成情况，血片制作质量及资料是否完整等。血片复核比例为所有阳性血片及 3%的阴性血片，血片复核可结合日常督导工作现场进行，也可集中统一进行。1.3.4 填写 “*市疟疾血检汇总资料” （附件 5） ，方法同前 1.2.5。1.4 省疾控中心1.4.1 承担市、县疾控人员的专业培训、镜检督导和血片复核工作。1.4.2 对辖区内所有阳性血片进行确认，为全省消疟工作提供技术支持，解决各类疑难问题。1.4.3 建立和维护省级疟疾阳性样本库，开展同级实验室质量评估。1.4.4 对辖区
8、市、县疟疾镜检工作进行督导和血片复核，督导频次为每年至少 1 次，血片复核比例为所有阳性血片及 1%的阴性血片，血片复核可结合督导工作现场进行，也可集中统一进行。1.4.5 填写 “陕西省疟疾血检汇总资料” （附件 6） ，方法同前 1.2.5。2 血检资料包括“疟疾血检登记本”和“疟疾血检汇总资料” 。2.1 疟疾血检登记本血检登记本由各镜检站负责填写。血检登记本包括“封面”、“填表说明”、“ 不明发热病人疟原虫血检登记表” 三部分。【封面】 “镜检站”是指当年从事血检任务的医院或乡镇卫生院等；“识别码”由县疾控统一规定，具体见本规范 1.2.3；“编号范围”按照编码规则（识别码+年份后两位
9、+顺序码）填写，如：某县镜检站县医院（识别码为 A）2015 年共做血片 123 张，则编号范围书写为：A15001A15123，“血检年份”为四位阿拉伯数字+“年”字，如：上例“血检年份”应书写为：2015 年。【不明原因发热病人疟原虫血检登记表】按扉页的“填表说明”逐项填写，所有栏目不得空缺，2.2 疟疾血检汇总资料包括省、市、县三级资料，均包括“封面”、“疟原虫血片镜检统计表” 、 “疟原虫血片镜检复核登记表”三部分，均由省、市、县各自填写；县汇总资料除上述三部分外，还4增加了“血检指标” 、 “血片标本盒外部标签”、“ 血片样本盒血检登记本封皮”三部分。省、市血检汇总资料由各疾控按内容
10、专人填写，县汇总资料中的“血检指标”以本规范 1.2.2 为准，各血检站任务量由各县根据计划总量自行分配。为便于查阅，汇总资料内各表格的顺序不得更改；“血检机构任务分解表”中的镜检站和样本盒中的样本排序，按照英文字母 AZ 的顺序逐一填写，相互对应，而随其后的“疟原虫血片镜检统计表”和“疟原虫血片镜检复核登记表”应与之顺序对应，按序装订。血片制作、染色、洁净度的评定等级按本规范中 1.2.5 进行。血片和血检登记本由县疾控按季度或年收取，样本盒外部标签由县疾控统一粘贴，在血片少的情况下，可以将同一年中各镜检站所做的血片置一个样本盒中，不同镜检站的血片相聚 24 个片距，顺序与外部标签一致，不同
11、年份的血片不能放在同一个样本盒中，每个血片样本盒对应一本原始血检登记本，县疾控按样本盒外部标签各镜检站的顺序，将各镜检站原始血检登记本装订成册，封皮注明“*年第*盒/共*盒”后与样本盒对应存放，以便查阅。3 注意事项3.1 县疾控中心送达省、市复核或确认的血片和抗凝血（或滤纸血）一般不予退还，各镜检站应做好同批次的血片的留存工作，以确保自身血片样本的完整性，但省、市进行血片复核工作时所抽取的各镜检站血片，应在工作结束后 5 个工作日内返还。3.2 各镜检站血样采集需在服用抗疟药之前的发热期采集，且制作血片的血、抗凝血（或滤纸血）应为同一次采集的，尽量避免使用肝素做抗凝剂。附件 1 疟原虫镜检操作规程附件 2 疟疾样本送检要求附件 3 县疟疾血检登记本附件 4 县疟疾血检汇总资料附件 5 市疟疾血检汇总资料附件 6 省疟疾血检汇总资料5
