1、1陕 西 省 地 方 标 准生鲜乳中革皮水解物（L-羟脯氨酸）的快速测定编制说明（征求意见稿）2生鲜乳中革皮水解物（L- 羟脯氨酸）的快速测定编制说明（征求意见稿）1 项目任务来源根据“陕西省质量技术监督局关于下达 2017 年第二批地方标准制修订项目计划的通知”（陕质监标201717 号）文件要求，陕西秦云农产品检验检测有限公司为承担单位，农业部饲料质量监督检验测试中心（西安）为协助单位共同完成“生鲜乳中革皮水解物（L-羟脯氨酸）的快速测定”（项目号 SDBXM 1482017）方法标准的制定工作。2 制定标准的背景革皮水解物是利用皮革下脚料甚至动物毛发等物质，经水解而生成的一种粉状物，因其
2、氨基酸或者说蛋白含量较高，故人们称之为皮革水解蛋白粉。皮革水解蛋白被非法添加到牛奶中以提高蛋白质的含量，使牛奶中角质蛋白含量增加，牛奶的口感和风味发生改变，品质下降，不易被消化吸收，营养价值低下，导致人体吸收利用率降低，会严重影响消费者的健康状况。 因其在皮革糅制、染色过程中添加进来的重铬酸钾和重铬酸钠等有毒物质，如果长期食用，重金属离子铬便会被人体吸收、积累、使人体中毒，关节疏松肿大，甚至造成儿童死亡。农业部令第 15 号生鲜乳生产收购管理办法中规定，禁止在生鲜乳生产、收购、贮存、运输、销售过程中添加任何物质。2009 年在浙江金华“晨园乳业“中查出“ 皮革奶“并搜缴出大量白色皮革水解蛋白粉
3、，随后山东、山西、河北也发现过同类产品。2009 年 2 月 6 日，卫生部公布的食品中可能违法添加的非食用物质和易滥用的食品添加剂品种名单（第二批），其中就有革皮水解物。2009 年 3 月 6 日，国家食品药品监督管理局印发了全国打击违法添加非食用物质和滥用食品添加剂专项整治近期工作重点及要求(卫监督发200921 号)的通知，其中革皮水解物是乳及乳制品质量安全专项整治的重中之重。3 制定标准的目的和意义农业部自 2009 年起，至今连续 9 年，每年在实施生鲜乳质量安全监测计划中，除监测脂肪、蛋白等营养指标外，还监测皮革水解蛋白、三聚氰胺、硫氰酸钠、-内酰胺酶等违禁添加物十多个项目。全国
4、每年监测生鲜乳中的皮革水解蛋白项目就达 12000 多批次。2016 年农业部生鲜乳监测计划中，陕西省监测生鲜乳中的皮革水解蛋白项目达 630 批次，异地交叉到陕西抽检生鲜乳皮革水解蛋白项目 200 多批次。目前，本省内 40 多家乳品加工企3业、300 多生鲜乳收购站在收购生鲜乳时检测十多项违禁指标，其中就包括皮革水解蛋白项目。对于生鲜乳中皮革水解物的检测，官方推荐的检测方法是 MRT/B 6-2016生乳中 L-羟脯氨酸的测定等，该类方法重复性好，定量准确，方法检测限低。但对于大批量样品的检测，该类方法前处理过程较复杂、用时较长。而乳品企业大部分用的是显色环法，即用硝酸汞沉淀乳酪蛋白，但水
5、解蛋白不会被除去，并与饱和的苦味酸溶液产生沉淀。该方法虽然能够进行快速筛选，但该方法已时代久远，检测限高，色泽判定不明显，满足不了现阶段乳品质量控制要求。急需要制定一种操作简单，成本低、污染少，检测速度快，准确度和重复性好的方法，以满足质检单位和乳品企业对生鲜乳中 L-羟脯氨酸的快速筛查。4 标准编制原则及研制过程4.1 编制原则在编制过程中，查阅了国内国外有关文献资料，参考了其他行业部门制定的类似的标准方法，本着严格遵循科学依据，并且准确、实用的原则，结合我省现阶段生产和实验室水平，确保方法标准的科学性、可行性和可靠性。完成了检测方法标准的研究工作，起草了标准的征求意见稿和编制说明。编写格式
6、符合 GB/T 1.1标准化工作导则第 1 部分：标准的结构和编写的要求。4.2 研制过程标准制定项目任务下达后，陕西秦云农产品检验检测有限公司和农业部饲料质量监督检验测试中心（西安）领导非常重视，就标准的制定工作进行了详细会谈，明确了项目负责人并成立项目组，选拔有丰富理论知识和实践经验、熟悉业务的人员进入项目组，对每一成员进行了具体分工。制定了具体工作方案和每一阶段完成时间。2017 年 11 月 12 月，课题组通过检索收集国内关于生鲜乳中 L-羟脯氨酸方法标准和文献资料，包括检测原理、样品提取前处理方法和仪器检测条件等，进行整理归类、比较研究，并结合多年来实际检测样品的结果和经验，拟定样
7、品前处理方法和仪器检测条件等初步实验方案。2018 年 18 月，到西安、渭南、宝鸡等地采集 150 多份样品，从样品吸取量、稀释倍数、标准液的浓度、中和样品水解液所需碱液的浓度和体积、仪器条件的选择等各方面进行大量的试验，试验优化后的方法不仅能满足快速筛选，而且方法检测限低，准确性较高。通过不断的优化选择，基本建立了生鲜乳中 L-羟脯氨酸的检测方法。42018 年 9 月10 月，方法学评价和验证比对。对建立的检测方法进行方法学评价，包括实验室内的准确度（回收率）、精密度、线性范围等。按照检测方法农业行业标准的格式，起草完成征求意见稿和编制说明。5 国内外相关标准情况5.1 GB/T9695
8、.23-2008 肉与肉制品 羟脯氨酸含量测定该方法的检测原理是：生鲜乳经过盐酸水解，释放出 L-羟脯氨酸，经氯胺 T 氧化，生成含有吡咯环的氧化物，用高氯酸破坏过量的氯胺 T，羟脯氨酸氧化物与对二甲氨基苯甲醛反应生成红色化合物，在波长 558nm 处进行比色测定。5.2 卫生部推荐方法乳与乳制品中动物水解蛋白鉴定 L-羟脯氨酸的测定方法2009 年前后国内发生多起“皮革奶”事件，随后卫生部专家于新闻媒体发布了乳与乳制品中动物水解蛋白鉴定 L-羟脯氨酸的测定方法，但没有形成标准。该方法是在GB/T9695.23-2008 肉与肉制品 羟脯氨酸含量测定标准的基础上建立的。该方法与 GB/T969
9、5.23-2008 的检测原理、检测步骤基本相同。只是将酸解试剂硫酸改成危险性较小的盐酸，样品适用范围、样品水解温度，所用设备等进行了调整，但也没有设定方法检测限。2009 年至 2016 年，农业部在每年的生鲜乳检测任务中都将此检测方法以附件形式规定为皮革水解蛋白的检测方法。5.3 NY/T 3130-2017生乳中 L-羟脯氨酸的测定2016 年 12 月 31 日农业部奶产品质量安全风险评估实验室（北京）发布了 MRT/B 6-2016生乳中 L-羟脯氨酸的测定标准。该标准是奶业创新团队的一个团体标准。测定乳品中水解蛋白实质是测定其中的 L-羟脯氨酸含量。该方法在 2009 年卫生部公布
10、的方法基础上进行了修改、完善，并增加了高效液相色谱法和氨基酸分析仪法。原理相同，是在其基础上降低了标准曲线的浓度，提高了样品稀释倍数，降低了方法的检出限。比卫生部公布的方法更加完善并提高了检测精度。农业部在 2016、2017 年的生鲜乳检测任务中将此方法列为生鲜乳中皮革水解蛋白的检测方法。该方法在 2017 年申请为农业标准 NY/T 3130-2017生乳中 L-羟脯氨酸的测定，经批准于 2018 年 6 月 1 日颁布实施。5.4 行业内使用的快速方法显色环法该方法的原理是：用硝酸汞沉淀方法除去乳酪蛋白，但水解蛋白不会被除去，并与饱和的苦味酸溶液产生沉淀。5该方法的操作步骤为：取 5mL
11、 乳样，加入除蛋白试剂（ 硝酸汞溶液）5mL 混合均匀，过滤，沿滤液试管壁慢慢加入饱和苦味酸溶液约 0.6mL 形成环状接触面。若环层颜色清亮则不含水解动物蛋白为合格乳；若呈现白色环状则含水解动物蛋白为异常乳，掺有水解动物蛋白粉越多，白色环状愈明显。 该方法虽然操作简单，但对于冷冻后的乳样，白色环状现象不太明显，并且由于目视法观察沉淀层准确性差、精密度低，只适用于大剂量定性检测，该方法的检测限为 500mg/L。同时硝酸汞有毒对人体健康有害，对环境也不利。6 方法的研制和试验条件的确定6.1 检测原理的确定测定生鲜乳和乳制品中 L-羟脯氨酸含量的方法较多，但分光光度计法是非常经典、应用最广泛的
12、检测方法之一，不仅准确度高且稳定性好。即生鲜乳经过盐酸水解，释放出 L-羟脯氨酸，经氯胺 T 氧化，生成含有吡咯环的氧化物，用高氯酸破坏过量的氯胺 T，羟脯氨酸氧化物与对二甲氨基苯甲醛反应生成红色化合物，在波长 558nm 处进行比色测定。6.2 测定步骤的确定经典的分光光度计法测定步骤大概是生鲜乳样品经盐酸水解、转移、定容；吸取试液、调节 pH 值，再转移、定容；吸取试液加入氧化剂、加入显色剂，比色。此方法在进行大批量样品的检测时，每一个样品要多次转移、定容，并逐一调节 PH 值，逐一比色。过程较复杂、用时较长。本方法是在以上方法的基础上，依据酶标仪的检测原理，借鉴 ELISA 试剂盒的操作
13、方法，建立一种简便快捷的检测方法，即生鲜乳经过盐酸水解、转移，加入一定量的碱液达到 pH值要求，再定容；在空白酶标板上依次加入样液、氧化剂、显色剂，酶标仪扫描，以达到对生鲜乳中皮革水解蛋白的快速筛查的目的。6.3 加入氢氧化钠溶液浓度的确定根据方法的反应原理，在 pH 约为 8.2 时，L-羟脯氨酸经氯胺 T 氧化，生成含有吡咯环的氧化物。而前处理过程中，样品水解时，向 2mL 生鲜乳中加入 12mol/L 盐酸 2mL，若要 pH为 8.2 左右，需要加入氢氧化钠溶液的量大概为 24 mmol。如果加入的氢氧化钠溶液浓度过高、体积过小，多一滴少一滴对 pH 结果影响都很大，造成检测结果偏差较
14、大。故预计加入10mL 不同浓度的氢氧化钠溶液，并进行试验。6在 6 个羊乳样品（编号为 Y2018-）和 6 个牛乳样品（编号为 N2018-）的水解液中加入不同浓度的氢氧化钠溶液，然后测量其 pH 值。 实验结果见表 1，当加入 10mL 2.2mol/L 氢氧化钠溶液后，水解液的 pH 值为 12；当加入 10mL 2.3mol/L 氢氧化钠溶液后，水解液的 pH 值为 49 ；当加入 10mL 2.4mol/L 氢氧化钠溶液后，水解液的 pH 值为 612，且大部分试液的pH 值大于 8；通过对实验结果的比较，最终确定向水解液中加入 10mL 2.3mol/L 氢氧化钠溶液。表 1 水
15、解液中加入不同浓度氢氧化钠溶液后的 pH 值样品编号加入 2.2mol/L 后试液的pH 值加入 2.3mol/L 后试液的 pH 值加入 2.2mol/L 后试液的 pH 值Y2018-201 1 5 8Y2018-202 1 5 9Y2018-203 1 6 6Y2018-204 1-2 6 10Y2018-205 1 5 10-11Y2018-206 1 7 8-9N2018-221 1-2 4 9-10N2018-222 1-2 4-5 10N2018-223 2 6 8-9N2018-224 1 4 11N2018-225 1 5 11-12N2018-226 1-2 9 9-106
16、.4 方法检测限的确定根据本实验条件，随机选取 10 批空白羊乳样品（编号为 Y2018-）和 12 批空白牛乳样品（编号 N2018-）。标准曲线为 0.00、0.50 、1.00、 1.50、2.00、4.00ug/mL ，按照实验步骤进行检测，酶标板的排列见表 2，测定结果见表 3 和图 1。实验结果表明，标准工作液在 0.054.00g/mL 浓度范围内有良好的线性关系。羊乳和牛乳的吸光值没有明显区别，空白牛乳和羊乳的吸光值在 0.065-0.089 范围内，平均值为X=0.0732，标准差为 SD=0.00525。 7依据检测限公式 LL= X+3SD=0.089，如果以吸光值为 0
17、.089 对应的样品浓度拟定为检测限时，实际操作时不易判断阳性样品。如果拟定阳性样品的吸光值0.1 时，则很容易判定阳性样品。根据以上测定结果，当试液浓度为 0.50ug/mL，其吸光值0.1，其对应的样品浓度为 12.5mg/L，同时为了消除不同人员，不同实验室间的误差，并参考农业部指定 MRT/B 6-2016生乳中 L-羟脯氨酸的测定的标准的检测限 30mg/L，所以拟定该标准的检测限为20mg/L。表 2 检测限试验酶标板的排列1 2 3 4 5 6 7A Cal_1 0.00 Y2018-98 Y2018-98 N2018-81 N2018-81 N2018-119B Cal_2 0
18、.50 Y2018-99 Y2018-99 N2018-92 N2018-92 N2018-119C Cal_3 1.00 Y2018-100 Y2018-100 N2018-102 N2018-102 N2018-121D Cal_4 1.50 Y2018-101 Y2018-101 N2018-107 N2018-107 N2018-121E Cal_5 2.00 Y2018-103 Y2018-103 N2018-108 N2018-108 N2018-123F Cal_6 4.00 Y2018-104 Y2018-104 N2018-111 N2018-111 N2018-123G Y
19、2018-91 Y2018-91 Y2018-106 Y2018-106 N2018-116 N2018-116 N2018-124H Y2018-97 Y2018-97 Y2018-115 Y2018-115 N2018-117 N2018-117 N2018-124表 3 检测限试验样品吸光值1 2 3 4 5 6 7A 0.064 0.067 0.082 0.088 0.075 0.076 0.075B 0.101 0.103 0.075 0.074 0.070 0.068 0.068C 0.137 0.151 0.072 0.073 0.069 0.072 0.065D 0.164 0
20、.168 0.081 0.089 0.071 0.071 0.072E 0.196 0.181 0.072 0.075 0.070 0.071 0.086F 0.339 0.318 0.072 0.072 0.070 0.073 0.0818G 0.069 0.071 0.069 0.070 0.068 0.074 0.067H 0.073 0.073 0.072 0.071 0.069 0.074 0.073图 1 标准曲线和回归方程7 方法的确认7.1 检测限确认在空白羊乳 Y2018-131 和空白牛乳 N2018-142 样品中添加标准溶液，制成含量为 20mg/L的阳性样品，阳性羊乳
21、标记为 Y 20-，阳性牛乳标记为 N 20-，同时做 8 平行。标准曲线为0.00、 0.50、 1.00、1.50、 2.00、4.00ug/mL 。酶标板的排列见表 4，标准曲线和回归方程见图2，测定结果见表 5 ，回收率结果计算见表 6。实验结果表明，空白样品的吸光值为 0.690.81 ，含量为 20 mg/L 的阳性样品吸光值为0.101 0.123，阳性样品吸光值明显高于空白样品吸光值，易于判定结果。所以检测限定为20 mg/L 是合理的。而且羊乳的回收率是 125.5%，RSD 值是 18.2%；牛乳的回收率是136.4%，RSD 值是 14.5%,能够满足实验要求。表 4 检
22、测限确认试验酶标板的排列1 2 3 4 5 6A Cal_1 0.00 Y20-1 Y20-1 N20-1 N20-1B Cal_2 0.50 Y20-2 Y20-2 N20-2 N20-29C Cal_3 1.00 Y20-3 Y20-3 N20-3 N20-3D Cal_4 1.50 Y20-4 Y20-4 N20-4 N20-4E Cal_5 2.00 Y20-5 Y20-5 N20-5 N20-5F Cal_6 4.00 Y20-6 Y20-6 N20-6 N20-6G Y2018-131 Y2018-131 Y20-7 Y20-7 N20-7 N20-7H N2018-142 N20
23、18-142 Y20-8 Y20-8 N20-8 N20-8表 5 检测限确认试验样品吸光值1 2 3 4 5 6A 0.065 0.060 0.112 0.103 0.107 0.121B 0.101 0.090 0.105 0.114 0.108 0.105C 0.135 0.145 0.121 0.112 0.102 0.110D 0.161 0.152 0.113 0.105 0.117 0.111E 0.191 0.201 0.111 0.104 0.102 0.120F 0.328 0.332 0.115 0.107 0.115 0.107G 0.073 0.081 0.102 0
24、.104 0.101 0.106H 0.069 0.078 0.112 0.123 0.115 0.106图 2 标准曲线和回归方程10表 6 检测限回收率实验结果样 品类 别样品编号 添加量（mg/L）测定含量（mg/L）减空白后回收率%平均值%RSD 值%Y2018-131 0 9.38 /Y20-1 20 32.45 115.35Y20-2 20 33.96 122.92Y20-3 20 39.26 149.39Y20-4 20 33.59 121.03Y20-5 20 32.45 115.35Y20-6 20 35.10 128.59Y20-7 20 29.05 98.33羊乳Y20-
25、8 20 40.02 153.18125.5 18.2N2018-142 0 6.73 /N20-1 20 37.37 153.19N20-2 20 31.69 124.82N20-3 20 31.32 122.93N20-4 20 37.37 153.19N20-5 20 35.10 141.84N20-6 20 35.10 141.84N20-7 20 29.43 113.48牛乳N20-8 20 34.72 139.95136.4 14.57.2 方法的回收率试验在空白羊乳样品 Y2018-98 和空白牛乳 N2018-117 中分别添加标准溶液，制成含量分别11为检测限 2.5 倍的
26、50mg/L 和检测限 10 倍的 200mg/L 阳性样品，同时做 6 平行，标准曲线为0.00、1.00、2.00、4.00、6.00、8.00ug/mL。酶标板的排列见表 7，样品的吸光值见表 8，根据各添加浓度的实际测定值计算添加回收率和变异系数见表 9。图 3 结果表明，标准工作液在 1.008.00ug/mL 浓度范围内有良好的线性关系。从表 9中的结果可以看出，在空白羊乳添加浓度为 50mg/L，测定回收率范围为 121.5143.1%，平均值为 134.9%，变异系数为 7.3%；添加浓度为 200mg/L，测定回收率范围为122.5136.6%，平均值为 126.6%，变异系
27、数为 5.1% 。在空白牛乳添加浓度为 50mg/L，测定回收率范围为 125.5139.0%，平均值为 133.0%，变异系数为 5.3%；添加浓度为200mg/L，测定回收率范围为 127.9141.9%，平均值为 132.9%，变异系数为 6.4%。试验结果表明，该方法的准确度和精密度能够达到对 L-羟脯氨酸检测的定性要求。表 7 回收率试验酶标板的排列1 2 3 4 5 6 7 8A Cal_1 0.00 Y50-1 Y50-1 Y200-3 Y200-3 N50-5 N50-5B Cal_2 1.00 Y50-2 Y50-2 Y200-4 Y200-4 N50-6 N50-6C Ca
28、l_3 2.00 Y50-3 Y50-3 Y200-5 Y200-5 N200-1 N200-1D Cal_4 4.00 Y50-4 Y50-4 Y200-6 Y200-6 N200-2 N200-2E Cal_5 6.00 Y50-5 Y50-5 N50-1 N50-1 N200-3 N200-3F Cal_6 8.00 Y50-6 Y50-6 N50-2 N50-2 N200-4 N200-4G Y2018-98 Y2018-98 Y200-1 Y200-1 N50-3 N50-3 N200-5 N200-5H N2018-117 N2018-117 Y200-2 Y200-2 N50-4
29、 N50-4 N200-6 N200-6表 8 回收率试验测定结果1 2 3 4 5 6 7 8A 0.068 0.064 0.170 0.175 0.432 0.448 0.174 0.165B 0.126 0.133 0.168 0.182 0.446 0.451 0.166 0.18012C 0.190 0.214 0.159 0.165 0.445 0.436 0.486 0.494D 0.312 0.335 0.169 0.174 0.430 0.456 0.441 0.466E 0.465 0.487 0.171 0.185 0.182 0.167 0.441 0.468F 0.6
30、61 0.684 0.168 0.178 0.175 0.180 0.447 0.468G 0.068 0.076 0443 0.427 0.185 0.168 0.486 0.504H 0.069 0.080 0.472 0.482 0.161 0.174 0.443 0.476图 3 标准曲线和回归方程表 9 回收率试验统计结果样 品类 别样 品编 号添加量（mg/L）测定含量（mg/L）减空白后回收率%平均值%RSD 值%Y2018-98 0 13.36 /Y50-1 50 81.17 135.6Y50-2 50 82.86 139.0羊 乳Y50-3 50 74.09 121.5134
31、.9 7.313Y50-4 50 80.50 134.3Y50-5 50 84.89 143.1Y50-6 50 81.51 136.3Y200-1 200 258.30 122.5Y200-2 200 286.64 136.6Y200-3 200 261.67 124.2Y200-4 200 267.41 127.0Y200-5 200 262.01 124.3Y200-6 200 263.70 125.2126.6 5.1N2018-117 0 15.05 /N50-1 50 82.52 134.9N50-2 50 84.55 139.0N50-3 50 83.87 137.6N50-4
32、50 77.80 125.5N50-5 50 79.15 128.2N50-6 50 81.51 132.9133.0 5.3N200-1 200 295.41 140.2N200-2 200 270.78 127.9N200-3 200 271.46 128.2N200-4 200 273.48 129.2N200-5 200 298.79 141.9牛 乳N200-6 200 274.83 129.9132.9 6.47.3 与行业标准 NY/T 3130-2017 检测结果的吻合情况在空白羊乳样品 Y2018-98 和空白牛乳 N2018-117 中分别添加标准溶液，制成含量分别为检测限
33、 2.5 倍的 50mg/L 和检测限 10 倍的 200mg/L 阳性样品，同时做 6 平行，标准曲线为0.00、1.00、2.00、4.00、6.00、8.00ug/mL。依据行业标准 NY/T 3130-2017生乳中 L-羟脯氨酸的测定方法进行测定。标准曲线见图 4，根据各添加浓度的实际测定值计算添加回收率和变异系数见表 10。14从表 10 中的结果可以看出，在空白羊乳添加浓度为 50mg/L，测定回收率范围为108.3116.3%，平均值为 112.4%，变异系数为 3.3%；添加浓度为 200mg/L，测定回收率范围为 103.9110.7%，平均值为 106.4%，变异系数为
34、2.6% 。在空白牛乳添加浓度为50mg/L，测定回收率范围为 106.4112.3%，平均值为 109.6%，变异系数为 2.1%；添加浓度为 200mg/L，测定回收率范围为 104.2110.8%，平均值为 107.0%，变异系数为 2.7%。表 11 比较结果表明，该方法测定结果的回收率和变异系数与行业标准方法测定的结果基本吻合，可以达到对革皮水解物（L-羟脯氨酸）的快速测定。图 4 标准曲线和回归方程表 10 行业标准 NY/T 3130-2017 方法回收率结果样 品类 别样 品编 号添加量（mg/L）测定含量（mg/L）减空白后回收率%平均值%RSD 值%Y2018-98 0 1
35、2.28 /Y50-1 50 68.94 113.3Y50-2 50 67.00 109.4Y50-3 50 67.805 111.0羊 乳Y50-4 50 66.445 108.3112.4 3.315Y50-5 50 70.115 115.7Y50-6 50 70.45 116.3Y200-1 200 228.88 108.3Y200-2 200 223.48 105.6Y200-3 200 233.68 110.7Y200-4 200 222.88 105.3Y200-5 200 220.08 103.9Y200-6 200 221.68 104.7106.4 2.6N2018-117
36、0 13.01 /N50-1 50 68.28 110.5N50-2 50 67.38 108.8N50-3 50 69.18 112.3N50-4 50 68.3 110.6N50-5 50 67.39 108.8N50-6 50 66.19 106.4109.6 2.1N200-1 200 223.01 105.0N200-2 200 234.61 110.8N200-3 200 231.41 109.2N200-4 200 221.41 104.2N200-5 200 228.61 107.8牛 乳N200-6 200 222.41 104.7107.0 2.7表 11 与行业标准 NY
37、/T 3130-2017 方法检测结果的比较本标准测定结果 行业标准验证结果序号 添加样品回收率%RSD 值%回收率%RSD 值%1 羊乳添加浓度为 50mg/L 134.9 7.3 112.4 3.32 羊乳添加浓度为 200mg/L 126.6 5.1 106.4 2.6163 牛乳添加浓度为 50mg/L 133.0 5.3 109.6 2.14 牛乳添加浓度为 200mg/L 132.9 6.4 107.0 2.78 验证试验结果9 与现行法律法规法规和强制性标准的关系本标准的制定过程中严格贯彻国家有关方针、政策、法律和规章等、严格执行国家强制性标准和行业标准。与相关的各种基础标准相衔接，遵循了政策性和协调同一性的原则。10 标准在编写过程中意见分歧情况本标准在制定过程中没有大的意见分歧。11 标准作为强制性或推荐性标准的意见该标准经制定后建议作为推荐性标准发布。（该标准联系人：赵彩会，电话 13772150258，邮箱 )
