1、【摘要】 目的 研究 Brg1 蛋白在宫颈癌中的表达，探讨其与肿瘤发展的关系 。方法 应用免疫组化 S-P 法研究 40 例宫颈癌中 Brg1 蛋白的表达和正常宫颈及癌前病变组织中的表达，初步探讨其与宫颈癌的发生、发展甚至预后的关系。结果 40 例宫颈癌组织中 Brg1蛋白的表达率为 75.0%，子宫颈上皮内瘤变组织（ CIN）中为 47.5%，正常组织中为27.5%，存在明显的差异。结论 Brg1 蛋白在宫颈癌组织中存在明显的高表达，并与宫颈癌的发生发展有一定的相关性。 【关键词】 宫颈癌；Brg1；免疫组化Brg1 Protein expression in cervical cancer
2、Wang Xiuming，He LianzhiDepartement of Medical Oncology,The Second Hospital of Wuhu,Wuhu 24100,ChinaAbstract Objective To investigate the expression of Brg1 protein in cervical cancer, and to study its relation with tumor development.Methods The expression of Brg1 protein detected by immunohistochemi
3、cal in 40 cases of cervical cancer was analyzed for their roles in cervical cancer development and prognosis.Results In 40 cases of cervical cancer, 75% of Brg1 protein expression were datected which was higher than that in CIN tissue 47.5% and in normal tissue 27.5%. There were significant differen
4、ces among three groups.Conclusion An increased expression of Brg1 protein in cervical cancer was associated with the development.Key words Cervical cancer；Brg1； Immunohistochemical20 世纪 90 年代以来由于实验室技术的发展，目前已被克隆和未被克隆的抑癌基因已达 30 余种，而且新的抑癌基因还在不断出现。Brg1 基因作为一种新发现的抑癌基因，国外有人在研究 Brg1 与肺癌、前列腺癌、膀胱癌、乳腺癌等的关系中，发
5、现它是一种重要的抑癌基因。本研究通过免疫组化的方法，观察 Brg1 基因在宫颈癌、子宫颈上皮内瘤变（CIN） 、正常宫颈组织中的表达，探讨 Brg1 基因在宫颈癌的发生发展中的作用。1 材料与方法1.1 材料来源 选择弋矶山医院和我院 2005 年 7 月至 2007 年 6 月的石蜡切片宫颈癌标本共 40 例，为IaIIb 期，CIN 标本 40 例，为 CINIICINIII 期；正常宫颈 40 例；宫颈癌标本有淋巴转移 11 例，无淋巴转移 29 例。1.2 Brg1 蛋白免疫组化检测技术 选取最佳石蜡组织块，脱蜡至水化后，采用抗原修复处理的链霉素抗生物素蛋白 S-P法染色，DAB 显色
6、，实验步骤按说明书进行。S-P 试剂盒购自北京中杉金桥生物有限公司，Brg1 抗体为美国 Santa Cruz 公司，用已知阳性切片作为阳性对照，以磷酸盐缓冲液（PBS）代替一抗作为阴性对照。结果判断标准：Brg1 染色阳性细胞为细胞核呈棕黄色至深褐色，部分细胞质同时为黄色，若只有细胞质着色，可视为阴性。其中阳性细胞75%为强阳性。1.3 统计学方法 组间率的比较采用 2 检验，应用 SPSS13.0 进行统计分析，以 P0.05） 。见表 2。表 1 Brg1 蛋白在正常宫颈组织、 CIN 及宫颈癌组织中的表达强度，表 2 Brg1 蛋白在正常宫颈组织、CIN 及宫颈癌组织中的阳性表达率（略
7、） 。本组 40 例宫颈癌标本均为 Ia-IIb 期手术标本，随着临床期别的升高，其阳性率明显升高，但差异无统计学意义（2=1.18，P0.05） ，分别比较任意两组之间的差异亦无统计学意义（P0.05） ；而在有淋巴结转移的宫颈癌组织中，其阳性率较无淋巴结转移组高，但差异无统计学意义（2=0.38，P0.05） 。见表 3。表 3 Brg1 蛋白的表达与宫颈癌临床期别和淋巴结转移的关系（略）3 讨论Brg1 是 SWI/SNF 家族的重要组成成分，定位于人类染色体 19p，其 mRNA 长约 5247 bp，基因编码的蛋白质相对分子量 2.05105。它主要通过 ATP 水解产生的动力来影响
8、细胞分裂过程中染色质的重排，使一些特异性的基因不能表达和抑制1 。Murphy 等研究发现，Brg1 可以 E2F 非依赖方式抑制 c-fos 的转录2-3 ，表明它是一种重要的抑癌基因。也有人研究发现，SWI/SNF 家族与许多基因的激活有关，也与转录的抑制有关，它主要通过转录的活化和抑制功能来控制肿瘤的生长4 。不同的研究发现 Brg1 基因在前列腺癌及胃癌组织中高表达，而在肺癌组织及多种肿瘤细胞系中表达下调或缺失5-7 。本研究结果表明 Brg1 蛋白在宫颈鳞癌组织中高表达，其阳性率明显高于宫颈上皮内瘤变组织和正常宫颈组织。在本研究中，我们同时还发现 Brg1 蛋白在宫颈鳞癌中的表达以强
9、阳性表达为主，而在正常组织和子宫颈上皮内瘤变组织中，其表达以弱阳性为主，这说明 Brg1 蛋白在癌组织中的表达强度明显高于正常组织和子宫颈上皮内瘤变组织。Brg1 作为抑癌基因，其蛋白或 mRNA 却在宫颈癌等组织中高表达，且表达强度明显高于其他组织，分析其原因，可能与其启动子异常甲基化、基因突变及其转录激活功能异常等因素有关。这时，异常表达的基因产物可能已失去抑癌基因原有的生物学效应，即功能丢失或产生转录激活作用。国内有人研究在胃癌、前列腺癌中 Brg1 高表达与肿瘤的分期、有无淋巴结转移及浸润深度等临床病理因素有关5-6 。本研究结果发现 Brg1 表达与宫颈癌的临床分期、有无淋巴结转移等
10、因素有一定的相关性，且随着肿瘤分期的增加，Brg1 蛋白的表达有逐渐增加的趋势，只不过这种差异没有统计学意义。同时我们发现，在有淋巴结转移的宫颈癌组织中，Brg1 蛋白的表达明显较无淋巴结转移组高，但进一步进行统计学分析则无统计学意义，这可能与样本量过小有关。提示 Brg1 在术前预测宫颈癌分期，判定有无淋巴结转移方面可能有益，也许可以作为评价肿瘤恶性度及进展和预后的一个指标。Brg1 蛋白在正常宫颈组织、宫颈上皮内瘤变以及宫颈癌组织中其阳性表达率逐渐升高，这表明随着由正常宫颈组织至宫颈上皮内瘤变最后到宫颈鳞癌的发生发展过程中，Brg1 基因可能与宫颈癌的上述发展过程有一定的相关性，Brg1
11、基因的这种功能丢失或转录激活作用均可能发挥着一定作用。总之， Brg1 基因作为一种抑癌基因，在子宫颈癌组织却表现为癌基因的活性，究其原因，可能是 Brg1 基因在宫颈组织中发生了功能丢失或转录激活作用，从而失去了其抑癌作用，进而在宫颈癌的发生发展的过程中可能起着一定的作用，为我们判断宫颈癌的生物学行为和预后提供一个参考。【参考文献】1 陈春林, 张随学 . 在体女性盆腔动脉血管网数字化三维模型构建方法及意义J. 中国实用妇科与产科杂志. http:/ 2 徐玉静,欧阳振波,刘萍,陈春林. 磁共振成像在子宫肌瘤动脉栓塞术中的应用价值 J. 中国实用妇科与产科杂志. 2011(04) 3 方驰华
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