1、磺胺类药物的吸收与分布,【目的】学学习血液和组织中药物含量的测定方法,了解磺胺类药物在体内的分布动力学规律与临床意义。 【原理】吸收:药物自用药部位进入血液循环的过程称为吸收。分布:药物随血液循环到达机体各部位的过程称为分布。磺胺嘧啶的测定原理:磺胺类药物为氨基苯类化合物,在酸性溶液中可与亚硝酸钠其重氮反应生成重氮盐,此盐在碱性溶液中与麝香草酚起偶联反应形成橙红色偶氮化和物,将该化合物在525nm波长下比色,其OD值与磺胺类药物浓度成正比。,【药品】 20%磺胺嘧啶钠(SD-Na),0.05%SD, 7.5和15%三氯醋酸, 肝素、 0.5%麝香草酚,0.5%亚硝酸钠,蒸馏水 【仪器】 分光光
2、度计,离心机,电子秤,刻度离心管,试管,手术器械,组织研磨器,小鼠灌胃器,移液管,托盘天平。 【动物】 小鼠,体重2022g,【方法、步骤 】,1取小鼠两只,记为给药组和对照组,给药组灌胃给予20%SD-Na0.1ml/10g,对照组给予等容积生理盐水。 2.给药组于药后30min通过摘眼球取血。对照组在实验开始时同法取血(用于装血样的离心管需提前用肝素抗凝,取血后摇匀)。 3.将离心管编号,准确吸取抗凝血0.2ml,加入盛有7.5%三氯醋酸2.8ml的离心管中,充分摇匀。,【方法、步骤 】,4.取血后,颈椎脱臼处死上述两只小鼠,分别剪开腹腔和颅腔,迅速剖取上述小鼠的肝,肾,脑并用滤纸沾去血液
3、。 5.准确称取脑,肝,肾组织各200400mg,分置与组织研磨器中,按100mg组织加三氯醋酸1ml制备匀浆,倒入相应编号的离心管中,离心,3000r/10min,【方法、步骤 】,6.准确吸取各管上清液1.5ml分别加至相对应编号的试管中,标准管吸取对照管上清液1.4ml,加0.1ml标准SD溶液(1mg/ml)然后各管依次加入0.5ml亚硝酸钠,充分摇匀后加入1.0ml麝香草酚并摇匀。7.以对照管做参比,525nm波长测OD值。,操作流程图,血0.2ml 血沉淀液 离心 脑 (3000r/10min) 取上清液 肾 300400 三氯醋酸 1.5ml 肝 (1ml/100mg) 组织匀浆研磨 血药浓度浓度值 光密度 测定液 组织药物浓度,OD值测定,三氯醋酸2.8ml,亚硝酸钠0.5ml麝香草酚1.0ml,对照组给予生理盐水 给药组给予磺胺并于30min后实验,计算:,OD标=1.0,注意事项: 1、集血瓶和注射器用时需提前用肝素润洗 2、给药组取血间隔为药后半小时 3、每次所取样品中磺胺的浓度不一样,磺胺很容易被污染,所以实验过程中注射器等应该清洗干净,避免交叉污染 4、配平时用烧杯配平,左重右轻。 5、分光光度计提前预热,比色杯先润洗,不能碰到比色杯光滑面。,谢谢聆听,