1、真菌的微生物检验右江民族医学院检验医学系潘国刚真菌（Fungus ）具有典型细胞结构（细胞核、细胞器、细胞壁）细胞壁含几丁质和（或）纤维素无根、茎、叶，不含叶绿素以腐生或寄生方式摄取养料能进行有性生殖和（或）无性繁殖第一部分 病原性真菌概述 对人类致病的真菌分为：浅部真菌： 侵犯皮肤、毛发、指甲，为慢性，对治疗有顽固性，但影响身体较小，深部真菌： 可侵犯全身内脏，严重的可引起死亡。此外有些真菌寄生于粮食、饲料、食品中，能产生毒素引起中毒性真菌病。一、生物学性状（一）形态结构 真菌细胞结构比细菌复杂 细胞壁为几丁质 (Chitin)（多聚 N乙酰葡萄糖组成）， 并含葡聚糖，甘露聚糖及蛋白质，某些
2、酵母菌还含类脂体。 细胞内有较为典型的 核结构和细胞器 。真菌形态分单细胞和多细胞两类 单细胞真菌主要为酵母和类酵母菌（如隐球菌、念珠菌），呈 圆形或椭圆形 。以出芽方式繁殖。 多细胞真菌由菌丝和孢子组成菌丝分枝交织成团，形成菌丝体（Mycelium ），并长有各种孢子，这类真菌即一般称为霉菌（Mold ）。 由于生活环境（如营养、温度、氧气等）的改变 ，有些真菌的 孢子与菌丝两种形态可以互变 ，这类真菌称为 二相性真菌 （dimorphic fungus），如球孢子菌、组织胞浆菌及芽生菌。真菌孢子和细菌芽胞的区别真菌孢子 细菌芽胞抵抗力不强，60-70 短时间杀死强，煮沸短时间不死数目一条菌
3、丝可产生多个孢子一个细菌体只形成一个芽孢作用 为繁殖方式之一 不是繁殖方式形成位置 可在细胞内外形成 只在细菌细胞内形成形状 形态、色泽多样 圆形或椭圆形真菌的形态构成营养菌丝菌丝气生菌丝 生殖菌丝有性孢子由同一菌体或不同菌体上的二个细胞融合形成绝大多数属于非致病性真菌所具有大分生孢子小孢子菌属、表皮癣菌属分生孢子分生孢子梗的顶端或侧面小分生孢子 毛癣菌属芽生孢子 隐球菌、念珠菌关节孢子厚膜孢子叶状孢子菌丝细胞直接形成新型隐球菌子囊孢子菌丝末端形成膨大的囊状结构即孢子囊，内含很多孢子根霉菌无性孢子孢子真菌菌丝形态真菌孢子形态（二）培养特性 大多数真菌 营养要求不高 ，常用沙保氏培养基（ SDA
4、）培养。 浅部病原性真菌的最适温度为 22 28，生长缓慢，大多于 14 周出现典型菌落。 深部病原性真菌培养 在 37 中生长最好， 生长较快， 经3-4天即长出菌落。真菌菌落类型类型 定义 特征 颜色 举例酵母型菌落为单细胞真菌的菌落，形态与一般细菌菌落相似，以出芽形式繁殖光滑、湿润，一般为乳白色新型隐珠菌白色念珠菌毛癣菌一般为乳白色可产生各种色素。类酵母型菌落外观似酵母菌落，但可见伸入培养基中的假菌丝 ，由伸长的芽生孢子形成光滑、湿润，丝状菌落为多细胞真菌的菌落，由许多管状、分枝菌丝体组成绒毛状、絮状、粉末状、颗粒状、石膏状。（三）变异性 真菌易发生变异，在人工培养基 中多次传代或孵育过
5、久，可出现形态结构、菌落性状、色素及毒力等改变。（四）抵抗力 真菌对干燥、阳光、紫外线及一般化学消毒剂 有一定的耐受力 ，但充分暴露于阳光，紫外线及干燥情况下大多数真菌可被杀死，且对 2.5%碘酒，10% 福尔马林都敏感，一般可用福尔马林薰蒸被真菌感染的房间。 对热敏感 ，一般 601 小时可杀死真菌菌丝和孢子。二、致病性与免疫性（一）致病性真菌引起的疾病大致包括1. 真菌性感染：主要是外源性感染 浅部真菌 侵犯皮肤、指甲及须发等组织，顽强繁殖，发生机械刺激损害 ，同时产生酶及酸等代谢产物，引起炎症反应和细胞病变。 深部真菌 侵犯皮下，内脏及脑膜等处，引起慢性肉芽肿及坏死。2条件致病性真菌感染
6、：主要是内源性感染（如白色念珠菌），亦有外源性感染（如曲霉菌）。3过敏性真菌病：由真菌性过敏原（如孢子抗原）引起过敏症，如哮喘，变态反 应性肺泡炎和癣菌疹等。4真菌毒素中毒症：侵犯害肝、肾、脑、中枢神经系统及造血组织。如黄曲霉毒素、某些镰刀菌素和黑葡萄穗素。（二）免疫性1非特异性免疫： 人类对真菌感染有天然免疫力。皮肤分泌短链脂肪酸和乳酸、血液中转铁蛋白、中性粒细胞和单核巨噬细胞的吞噬作用，以及正常菌群的拮抗作用 。2特异性免疫： 真菌感染中细胞免疫是机体排菌杀菌及复原的关键，T 细胞分泌的淋巴因子、以T 细胞为主导的迟发型变态反应引起免疫病理损伤能局限和消灭真菌，以终止感染。三、微生物学诊断
7、（一） 直接检查1不染色标本的直接镜检：直接采取标本制片、显微镜下直接观察，若发现真菌菌丝或孢子存在时，即可初步判定为真菌感染。1）标本制备：2）检查方法：3）封固液： KOH 溶液： 本液适于检查致密的难以透明的材料（如毛发、指甲、鳞屑等）。 墨汁： 主要用于检查有荚膜的真菌（如新型隐球菌等） 。 水合氯醛石炭酸乳酸封固液： 此液透明力较强，只限于不透明的标本。 生理盐水： 为观察真菌的出芽现象可用生理盐水代替氢氧化钾溶液。2染色标本检查：1）革兰氏染色：各种真菌均为革兰氏阳性 ，为深蓝色。常用于酵母菌、白色念珠菌、孢子丝菌、诺卡菌及组织胞浆菌等。2）乳酸酚棉蓝染色3）糖原染色： 菌体均染成
8、红色。用于标本直接涂片及组织病理切片染色。4）嗜银染色（GMS）： 染成黑色。5）粘蛋白卡红染色法（MCS ）：主要用于新型隐球菌荚膜的染色。隐球菌荚膜和细胞壁呈红色，细胞核呈黑色。6）荧光染色：主要使用吖啶橙和氢氧化钾来染直接涂片、培养涂片及组织切片 。（二）培养检查 本法可确定菌种，辅助直接检查的不足； 通常用沙保氏培养基（SDA ）（2228）； 深部真菌可用血琼脂或脑心葡萄糖血琼脂37培养；（三）免疫学试验 用于检测深部感染真菌的 抗体，作为辅助诊断组织胞浆菌、念珠菌、曲霉菌。 检测深部感染真菌的 抗原， 用于早期、快速、特异的诊断。 乳胶凝集法检测新型隐球菌病患者的荚膜多糖抗原 ELISA法检测白色念珠菌感染者的甘露聚糖抗原 免疫荧光法检测孢子丝菌病患者的可溶性抗原四、防治原则 真菌感染尚无特异预防，主要注意公共卫生和个人卫生； 碘化物治疗孢子丝菌病、毛霉菌病有一定疗效； 制霉素、 灰黄霉素、克霉唑（三苯甲霉唑）等外用或内服对癣症和白色念珠菌病等有较好疗效； 近年报道5- 氟胞嘧啶（ 5-FC）治疗单细胞真菌感染疗效显著； 二性霉素B可用于深部全身真菌感染。第二部分 浅部真菌浅部真菌主要为皮肤丝状菌（D ermatophytes），侵犯皮肤、毛发、指甲等角化组织引起癣症，又称癣菌(Ringworm)，分为三属，共37个种。
