（浙江选考）2019高考生物二轮复习 第八部分 生物技术实践（课件+练习）（打包4套）.zip

1专题训练 20 微生物的利用、酶的应用一、选择题1.要筛选得到纯净的菌种,通常在固体培养基上划线分离,下列操作正确的是( )A.每次划线时,接种环都需蘸菌液一次B.划线分离时,需要把接种环深入到培养基中进行接种C.在超净台中接种时要在酒精灯火焰旁进行D.划线分离后将培养皿正放在恒温培养箱中培养答案 C解析 采用划线分离,菌种只蘸取一次,A 项错误;划线分离,接种环在培养基表面进行划线操作,B 项错误;微生物培养的关键是无菌操作,因此,在超净台上接种时,需要在酒精灯火焰旁进行,以防止空气中微生物的污染,C 项正确;划线分离结束后,培养皿倒置于恒温培养箱中,D 项错误。2.下列关于制备固体培养基时倒平板的叙述,正确的是( )A.倒好的培养基和培养皿要进行灭菌处理B.应将打开的皿盖放到一边,以免培养基溅到皿盖上C.为防止微生物污染,要在酒精灯火焰旁进行操作D.倒好培养基的培养皿,要立即将平板倒过来放置答案 C解析 培养基应该在倒平板之前进行高压蒸汽灭菌,A 项错误;倒平板时,用左手将培养皿打开一条稍大于瓶口的缝隙,右手将锥形瓶中的培养基(约 10~20 mL)倒入培养皿,左手立即盖上培养皿的皿盖,不能打开皿盖,B 项错误;为防止微生物污染,要在酒精灯火焰旁进行操作,C 项正确;倒好培养基的培养皿等培养基凝固后要倒过来放置,D 项错误。3.固定化酶是从 20 世纪 60 年代迅速发展起来的一种技术。科研人员用海藻酸钠作为包埋剂来固定小麦酯酶,以研究固定化酶的相关性质和最佳固定条件。酶活力为固定化酶催化化学反应的总效率,包括酶活性和酶的数量。图甲、乙、丙为部分研究结果。下列有关叙述错误的是( )A.由图甲可知,固定化酯酶比游离酯酶对温度变化适应性更强B.由图乙可知,浓度为 3%的海藻酸钠包埋效果最好C.由图丙可知,固定化酯酶一般可重复使用 3 次,之后若继续使用则酶活力明显下降2D.固定化酶的酶活力较高,主要原因是增大了酶与底物的接触面积答案 D解析 由图甲可知,当温度变化时,游离酶的酶活力比固定化酶变化明显,说明固定化酯酶比游离酯酶对温度变化适应性更强,A 项正确;当海藻酸钠浓度较低时,凝胶的孔径较大,固定化酶容易流失,所以酶活力较低,浓度大难以形成凝胶珠,B 项正确;由图丙可知,当使用次数多于 3 次时,酶活力显著下降,C 项正确;固定化酶的优点是不溶于水,易于产物分离,可反复使用,能连续化生产且稳定性好,D 项错误。4.如图是研究人员从红棕壤中筛选高效分解尿素细菌的过程示意图,下列有关叙述错误的是( )A.在配制步骤②③的培养基时,应先调 pH 值后髙压蒸汽灭菌B.步骤③纯化分解尿素细菌的原理是将聚集的细菌分散,以获得单菌落C.步骤③采用涂布平板法接种,并需向牛肉膏蛋白胨培养基中加入尿素D.步骤④挑取③中不同种的菌落分别接种,比较细菌分解尿素的能力答案 C解析 在配制步骤②③的培养基时,应先调 pH 值后髙压蒸汽灭菌,A 项正确;步骤③纯化分解尿素细菌的原理是将聚集的细菌分散,以获得单菌落,B 项正确;要筛选出能高效分解尿素细菌,所选用的培养基要以尿素为唯一氮源,但牛肉膏和蛋白胨中都含有尿素,因此步骤③所用的培养基中不能含有牛肉膏蛋白胨,C 项错误;步骤④挑取③中不同种的菌落分别接种,比较细菌分解尿素的能力,D 项正确。二、非选择题5.(2018 宁波模拟)研究小组从土壤中筛选以多环芳烃(PAHs)为碳源和能源的细菌,用以降解工业废水和生活污水中的 PAHs。请回答下列问题。(1)为了从土壤中筛选 PAHs 降解菌,需配制以 为唯一碳源的培养基,培养基经 [A.121 ℃(500 g/cm 2压力),15 min B.90 ℃(500 g/cm 2压力),15 min C.121 ℃(1 kg/cm 2压力),15 min D.90 ℃(500 g/cm 2压力),30 min]高压蒸汽灭菌,待冷却至 60 ℃后倒平板。 (2)倒平板时应使锥形瓶的瓶口通过火焰,目的是 。在倒平板的过程中,如果培养基溅在皿盖与皿底之间的部位,则这个平板不能用来培养 PAHs 降解菌,原因是 。 (3)制备土壤稀释液,用 方法接种于固体培养基表面,培养时,需将培养皿 并放在37 ℃恒温培养箱中培养 24 h。 (4)用划线法纯化 PAHs 降解菌的过程中,在第二次及其后的划线操作时,须从上一次划线的末端开始划线,原因是 。 3答案 (1)PAHs C(2)防止杂菌污染 空气中的微生物可能在皿盖与皿底之间的培养基上滋生(3)涂布 倒置(4)使细菌数随着划线次数的增加而逐渐减少,最终得到由单个细菌繁殖而成的菌落解析 (1)为了从土壤中筛选 PAHs 降解菌,需配制以 PAHs 为唯一碳源的培养基,培养基经过高压蒸汽灭菌〔121 ℃(1 kg/cm 2压力),15 min〕,待冷却至 60 ℃后倒平板。(2)倒平板时应使锥形瓶的瓶口通过火焰,目的是防止杂菌污染,在倒平板的过程中,如果培养基溅在皿盖与皿底之间的部位,则这个平板不能用来培养 PAHs 降解菌,原因是空气中的微生物可能在皿盖与皿底之间的培养基上滋生。(3)制备土壤稀释液,用涂布方法接种于固体培养基表面,培养时,需将培养皿倒置并放在 37 ℃恒温培养箱中培养 24 h。(4)用划线法纯化 PAHs 降解菌的过程中,在第二次及其后的划线操作时,须从上一次划线的末端开始划线,原因是使细菌数随着划线次数的增加而逐渐减少,最终得到由单个细菌繁殖而成的菌落。6.下图为“大肠杆菌的培养和分离”实验的基本流程,请回答下列问题。A.配制培养基 → B.灭菌 → C.培养(液体培养基) → D.划线分离和培养(固体培养基) → E.菌种短期保存(1)A 过程配制的是通用细菌培养基,称为 培养基。配制时除了加入特定的营养物质以外,还要加入一定量的氯化钠,以维持 。对培养基 pH 的调节,应该在 B 过程的 (填“前面”或“后面”)。 (2)E 过程所需的温度是 。 (3)D 过程后,一个菌体便会形成一个 ,这种分离方法是 的通用方法,也是筛选特定菌株的最简便方法之一。 答案 (1)LB 渗透压 前面 (2)4 ℃ (3)单菌落 消除杂菌污染解析 (1)培养微生物的培养基为 LB 培养基,培养基中加入一定浓度氯化钠用于维持培养液的渗透压,培养基应调节好 pH 后再进行灭菌。(2)短时间内保存菌种,将菌种接种于斜面上,置于 4 ℃冰箱进行保存。(3)经过分离,一个菌体形成一个单菌落,单菌落是消除杂菌污染的通用方法,也是筛选特定菌株的最简便方法之一。7.下列是有关大肠杆菌的培养实验,请回答下列问题。(1)配制培养大肠杆菌的培养基时,根据“细菌喜荤,霉菌喜素”的规律,通常在培养基中加入蛋白胨和 作为营养物质。 4(2)大肠杆菌培养和分离的实验中,在 中进行扩大培养,培养液经 后,在LB 固体培养基上进行 ,并将培养皿 放在恒温培养箱中培养,可以获得如图效果。为了检测接种、培养过程是否受杂菌污染以及 ,应同时将未接种的培养基放入恒温培养箱培养。 (3)对于获得的纯菌种,通常可以依据 的形状、大小等特征进行初步的鉴定。 (4)关于“大肠杆菌培养和分离”的操作中,下列叙述正确的是 。 A.高压蒸汽灭菌结束时,打开排气阀使压力表指针回到零后,开启锅盖B.倒平板时,应将打开的皿盖放到一边,以免培养基溅到皿盖上C.为了防止污染,接种工具经火焰灭菌后应趁热快速挑取菌落D.用记号笔标记培养皿中菌落时,应标记在皿底上答案 (1)酵母提取物 (2)LB 液体培养基 稀释 分离 倒置 无菌操作是否规范 (3)菌落 (4)D解析 (1)配制培养大肠杆菌的培养基时,根据“细菌喜荤,霉菌喜素”的规律,通常在培养基中加入蛋白胨和酵母提取物作为营养物质。(2)大肠杆菌培养和分离的实验中,在 LB 液体培养基中进行扩大培养,培养液经稀释后,在 LB 固体培养基上进行分离,并将培养皿倒置放在恒温培养箱中培养,可以获得如图效果。为了检测接种、培养过程是否受杂菌污染以及无菌操作是否规范,应同时将未接种的培养基放入恒温培养箱培养。(3)对于获得的纯菌种,通常可以依据菌落的形状、大小等特征进行初步的鉴定。(4)高压蒸汽灭菌结束,等待压力表指针回到零后,才能开启锅盖,不能打开排气阀使压力表指针回到零,A 项错误;倒平板过程中不能打开培养皿的皿盖,B 项错误;接种环在火焰上灼烧后,待冷却后才可以快速挑取菌落,C 项错误;用记号笔标记培养皿中菌落时,应标记在皿底上,D项正确。8.(2018 浙江新高考研究联盟第二次联考)回答下列有关果胶酶生产及固定化应用的问题。(1)用射线处理一些霉菌后,稀释并接种在以较低浓度果胶为 的培养基中,可获得产果胶酶的高产菌株。通过观察比较培养基上 可判断菌株是否属于同一种类。 (2)在分离高产果胶酶菌种的试验操作中,对于获得纯化的果胶酶高产菌单菌落影响最大的是 。 A.实验所用的霉菌孢子来源于多个菌株B.涂布前涂布器未在酒精灯火焰上的灼烧灭菌C.已添加果胶的蔗糖豆芽汁培养基作为选择培养基D.实验操作过程中未打开超净台的过滤风(3)黑曲酶在发酵过程中除分泌果胶酶外,常还分泌蛋白酶、淀粉酶、欲检测黑曲霉在某种环境下分泌的总酶(蛋白质)量,可将提取液稀释后加入 试剂,在特定光程下测定 OD 值,并利用以 绘制的标准曲线定量。 (4)利用 或交联法对果胶酶进行固定化处理时,果胶酶与介质间均可形成新的化学键,固定化酶柱使用结束后用大量清水洗涤,其目的是 。 5答案 (1)唯一碳源 菌落的形态特征 (2)C (3)双缩脲 总酶(蛋白)含量为横坐标,以 OD 值为纵坐标〔或反映总酶(蛋白)含量和 OD 值关系〕 (4)共价偶联法 洗去残留的果胶解析 (1)获得产果胶酶的高产菌株,应以果胶为唯一碳源和营养物质,并对培养后的菌落形态进行观察,进而确定不同菌株的类别。(2)在分离菌株时,若实验所用的霉菌孢子来源于多个菌株,可增加菌株类型,增加选择的方向,不会影响果胶酶高产菌株的筛选;涂布前,若涂布器未在酒精灯火焰上灼烧,可能会减少菌落的数量,但对高产菌株的筛选、纯化不会有太大影响;添加蔗糖的豆芽汁,会使一些不能分解果胶的菌株生长,影响筛选;实验操作时未打开过滤风,可能会一定程度上影响菌株筛选,但不会明显影响分解果胶菌株的筛选。(3)测定蛋白质,应加入与蛋白质能够发生反应的试剂,即双缩脲试剂,然后以总酶的量为横坐标,以 OD 值为纵坐标绘制标准曲线。(4)若让果胶酶和介质之间形成新的化学键,应采用共价偶联法和交联法对果胶酶进行固定化处理,实验结束后,对固定化酶柱进行洗涤,主要目的是洗去残留的底物,即果胶。9.已知某细菌的两种突变类型细菌Ⅰ和细菌Ⅱ的营养条件和菌落特征都相同,但细菌Ⅰ能分解有机物 A 而不能分解有机物 B,细菌Ⅱ能分解有机物 B 而不能分解有机物 A。现有这两种类型细菌的混合液样品,要将其分离,有人设计了一种方案,部分操作步骤如图。(1)步骤一使用的是 培养基,其中含有细菌生长所需的水、无机盐、碳源和氮源等营养物质,此外还必须加入 ,以利于对不同菌种进行分离操作。 (2)步骤一采用 方法接种,此接种法可使接种细菌逐渐稀释,经适宜条件培养,可形成单个、独立的 ,最终可能得到纯种的细菌;要进行上述接种操作,必须在 及酒精灯火焰附近进行,以避免杂菌污染。 (3)步骤三中,若对其中某瓶培养液中 A、B 两种有机物的含量进行测定,当培养液中检测出如下的实验结果,其中能说明培养液中只有细菌Ⅰ的是 。 A.有机物 A 与 B 含量都明显下降 B.有机物 A 含量明显下降,B 含量基本不变C.有机物 A 含量基本不变,B 含量明显下降D.有机物 A、B 含量都基本不变答案 (1)LB 固体 琼脂 (2)划线 菌落 超净台 (3)B6解析 (1)步骤一表示将菌种分离培养,使用的是 LB 固体培养基,其中含有细菌生长所需的水、无机盐、碳源和氮源等营养物质;固体培养基中需要加入琼脂作为凝固剂。(2)根据题图文字信息“蛇形线末端”可以确定步骤一采用划线分离接种,此接种法可使接种细菌逐渐稀释,经适宜条件培养,可形成单个、独立的菌落,最终可能得到纯种的细菌;要进行上述接种操作,必须在超净台及酒精灯火焰附近进行,以避免杂菌污染。(3)若 A 与 B 两种有机物含量都明显下降,说明瓶中同时存在细菌Ⅰ和细菌Ⅱ,说明两者未分离;若 A 含量明显下降,而 B 含量基本不变,说明培养液中只有细菌Ⅰ;若B 含量明显下降,而 A 含量基本不变,说明培养液中只有细菌Ⅱ;如果化合物 A、B 含量都基本不变,说明培养液中没有这两种细菌。1专题训练 21 生物技术在食品加工中的应用、浅尝现代生物技术一、选择题1.菊花茎的切段在发芽培养基培养的过程中,有关描述错误的是( )A. 茎的切段不能带有叶片B.要始终保持在无菌环境中培养C.培养基中苄基腺嘌呤与萘乙酸的比例要较高D.茎的切段经过脱分化和再分化可形成丛状苗答案 A解析 菊花茎的切段上可以带有少量叶片。2.家庭中制作泡菜的方法:新鲜的蔬菜经过整理、清洁后,放入彻底清洗并用白酒擦拭过的泡菜坛中,然后向坛中加入盐水、香辛料及一些“陈泡菜水”,密封后置于温度适宜的地方。下列与此过程相关的叙述,不正确的是( )A.用白酒擦拭泡菜坛的目的是消毒B.加入“陈泡菜水”的作用是提供乳酸菌菌种C.制作泡菜的过程中,有机物的干重和种类将减少D.若制作的泡菜咸而不酸最可能的原因是大量的食盐抑制了乳酸菌的发酵过程答案 C解析 用白酒擦拭泡菜坛的目的是消毒;“陈泡菜水”中含有大量的乳酸菌菌种,制作泡菜时加入“陈泡菜水”可以实现接种乳酸菌菌种的目的;制作泡菜的过程中,由于呼吸作用的消耗,有机物的干重将减少,但坛内有机物的种类将增加;若放入的食盐过多,抑制了乳酸菌的发酵,就会使制作的泡菜“咸而不酸”。3.将无根的非洲菊幼苗转入无植物激素的培养中,在适宜的温度和光照等条件下培养一段时间后,应出现的现象是( )答案 B解析 题中培养的虽是无根的幼苗且培养液中无植物激素,但是幼苗本身仍然可以产生生长素等植物激素,从而在适宜的温度和光照条件下促进幼苗生根。4.如图是利用微生物制作果酒、果醋的流程示意图。请据图判断,下列说法正确的是( )挑选葡萄 冲洗 榨汁 A 醋酸发酵 果醋A.冲洗葡萄时,先去除烂籽粒和枝梗,再用清水冲洗掉污物B.榨汁前,榨汁机和发酵瓶都需要用体积分数为 70%的盐酸消毒C.制作葡萄酒的装置采用长而弯曲的导管排气可以防止杂菌污染D.在葡萄酒深层发酵时接种醋化醋杆菌可以发酵得到葡萄醋答案 C2解析 冲洗葡萄时,先去除烂籽粒,再用清水冲洗掉污物,最后去除枝梗,A 项错误;榨汁前,榨汁机和发酵瓶都需要用体积分数为 70%的酒精消毒,B 项错误;制作葡萄酒的装置采用长而弯曲的导管排气可以防止杂菌污染,C 项正确;果酒制作需要无氧环境,且温度为 25~30 ℃,而果醋制作需要不断通入氧气,且温度为 30~35 ℃,因此在葡萄酒深层发酵时接种醋化醋杆菌不能发酵得到葡萄醋,D 项错误。二、非选择题5.利用酵母菌也可制作葡萄酒,下图为实验室制作葡萄酒的基本流程。(1)上述流程中,A 为 过程,该过程中酵母菌的呼吸类型主要是需氧呼吸。B 为 过程。用 KMnO4溶液浸泡葡萄的目的是 。发酵瓶中葡萄汁的装量应控制在容器的 2/3 以下,主要原因是发酵过程有大量 产生,会使发酵液溢出。 (2)具有耐高糖和耐酸特性的酵母菌是理想的酒精发酵菌种,对野生酵母菌进行诱变后通过筛选可以得到具有这些特性的突变菌,诱变及筛选过程如下:步骤 1:野生菌液体培养一段时间后接受紫外线照射诱变处理。步骤 2:制备选择培养基。在基本培养基的基础上,注意添加 和调低 pH,加 后灭菌,制成固体培养基。 步骤 3:将紫外线照射后的菌液 ,涂布在培养基平面上。 步骤 4:根据是否能在培养基上生长筛选出突变菌。答案 (1)菌种扩大培养 接种 消毒 二氧化碳 (2)高浓度蔗糖(葡萄糖) 琼脂 稀释解析 (1)上述流程中,A 为菌种扩大培养过程,该过程中酵母菌的呼吸类型主要是需氧呼吸。B 为接种过程。用 KMnO4溶液浸泡葡萄的目的是消毒。发酵瓶中葡萄汁的装量应控制在容器的 2/3 以下,主要原因是发酵过程有大量二氧化碳产生,会使发酵液溢出。(2)要筛选出具有耐高糖和耐酸特性的酵母菌,需要在基本培养基的基础上,注意添加高浓度蔗糖(葡萄糖)和调低 pH 值;要制备固体培养基,培养基中需要加入凝固剂——琼脂。接种时,将菌液稀释,涂布在培养基平面上。6.下图表示菊花的嫩枝离体培养过程,请据图回答下面的问题。(1)若使用自然生长的嫩枝进行组织培养,需将材料放在 70%乙醇中浸泡 10 min,再放入 溶液中浸泡 5 min,然后用另一该溶液浸泡 5 min,最后在超净台中用 清洗。 (2)实验中使用的生长素是人工合成的 ,培养基中的生长素和细胞分裂素用量的比值 (填“高”或“低”)时,有利于芽的分化。 (3)待生根后,将苗移至草炭土或蛭石中,用玻璃罩或塑料布保持 以上的湿度,2~3 d 后打开玻璃罩逐渐降低湿度进行锻炼,直到将罩全部打开处于自然湿度下为止。 3A.8% B.30% C.60% D.80%答案 (1)5%NaClO(5%次氯酸钠或 NaClO) 无菌水 (2)NAA(萘乙酸) 低 (3)D解析 (1)植物组织培养时,对实验材料用 70%乙醇浸泡后,用 5%NaClO 溶液浸泡。(2)菊花的嫩枝离体培养过程中,使用的生长素是人工合成的萘乙酸(NAA)。(3)待生根后,将苗移至草炭土或蛭石中进行湿度锻炼,先用玻璃罩或塑料布保持 80%以上湿度,2~3 d 后打开玻璃罩逐渐降低湿度进行锻炼,直到将罩全部打开处于自然湿度下为止。7.某研究小组为了生产梨酿制醋酸,具体流程如图 1 所示,请回答下列问题。梨 浑浊的梨汁 澄清的梨汁 酒精发酵 醋酸发酵图 1(1)图 1 中乙过程可加入 酶,为证明该酶的效果,可分别取等量浑浊的梨汁和澄清的梨汁,各加入等量的 ,预计后者出现的沉淀物比较少。 (2)适宜条件下进行酒精发酵,发酵完毕的标志是 ,待沉淀后,可用 (方法)将上清液(即果酒)取出。若培养液酒精浓度超过 时,酵母菌会死亡。 (3)若用于醋酸发酵的醋杆菌被杂菌污染,欲消除污染的杂菌,常用方法是 。 (4)用适宜方法获得优质醋杆菌的菌种,若要扩大培养,适宜的培养基是 。 A.MS 培养基B.添加蔗糖的豆芽汁C.含蛋白胨、酵母提取物、NaCl 及其他适宜添加物的培养液D.尿素、葡萄糖,K 2HPO4,NaCl,酚红,琼脂糖配制的培养基(5)图 2 表示不同醋杆菌接种量(5%、10%、15%)与醋酸发酵的关系,据图判断,下列叙述错误的是 。 A.发酵液中的醋杆菌进行需氧呼吸B.培养时间越长,培养液的 pH 越低C.接种后 20 h,接种量为 5%的醋酸产量最少,主要是因为发酵速度较慢D.接种后 70 h,接种量为 15%的醋酸产量最少,与菌体生长繁殖消耗较多营养物质有关答案 (1)果胶 95%乙醇 (2)停止产生气泡 虹吸法 16% (3)单菌落的分离/划线分离法/涂布分离法 (4)C (5)B4解析 (1)图 1 中乙过程可加入果胶酶,使果汁澄清。为证明该酶的效果,可分别取等量浑浊的梨汁和澄清的梨汁,各加入等量的 95%乙醇,预计后者出现的沉淀物比较少。(2)适宜条件下进行酒精发酵,发酵完毕的标志是停止产生气泡,待沉淀后,可用虹吸法将上清液(即果酒)取出。若培养液酒精浓度超过 16%时,酵母菌会死亡。(3)若用于醋酸发酵的醋杆菌被杂菌污染,欲消除污染的杂菌,常用方法是单菌落的分离/划线分离法/涂布分离法。(4)用适宜方法获得优质醋杆菌的菌种,若要扩大培养,适宜的培养基是含蛋白胨、酵母提取物、NaCl 及其他适宜添加物的培养液。(5)发酵液中的醋杆菌进行需氧呼吸,A 项正确;在发酵过程中,醋酸含量先增多后略有降低,故培养液的 pH 先降低后略有上升,B 项错误;接种后 20 h,接种量为 5%的醋酸产量最少,主要是因为发酵速度较慢,C 项正确;接种后 70 h,接种量为 15%的醋酸产量最少,与菌体生长繁殖消耗较多营养物质有关,D 项正确。8.苯酚及其衍生物广泛存在于工业废水中,对环境有严重危害。小明同学准备依据图 1 操作步骤,从处理废水的活性污泥中分离筛选酚降解高效菌株。请回答下列问题。图 1(1)酚降解菌富集培养基含有蛋白胨、K 2HPO4、MgSO 4、苯酚和水,其中可作为碳源的有 。 (2)将采集到的样品接种培养,苯酚用量应随转接次数增加而逐渐 ,以达到富集酚降解菌的目的。若图 1 平板中菌落过于密集,应进一步 ,以便于菌落计数与分离。制备平板培养基时除了需要水、营养物质外,还必须添加 。 (3)图 2 为连续划线法示意图,在图中 (填图中序号)区域更易获得单菌落。 (4)采用比色测定法(使用苯酚显色剂)检测降解后的废水中苯酚残留量。先制作系列浓度梯度并进行显色反应,下表中 1~5 号比色管的苯酚浓度应分别为 。 管号 1234 56苯酚浓度/(mg·L-1)1如果废水为 50 mg/L 苯酚溶液,降解后约有 21%的苯酚残留,则需将残留液稀释 (填序号:①5 ②10 ③20)倍后,再进行比色。 答案 (1)蛋白胨、苯酚 (2)增加 稀释涂布 凝固剂 (3)③ (4)0、0.2、0.4、0.6、0.8 ③5解析 (1)蛋白胨、苯酚中含有碳元素,均可以作为碳源。(2)分析实验可知,实验目的是筛选酚降解菌,因此将采集到的样品接种培养,苯酚用量应随转接次数增加而逐渐增加,以达到富集酚降解菌的目的。若图 1 平板中菌落过于密集,应进一步稀释涂布,以便于菌落计数与分离。平板培养基属于固体培养基,制备该培养基时需要加入琼脂作为凝固剂。(3)图 2 为划线分离,随着划线次数的增加,菌种进一步被稀释,因此图中③区域更易获得单菌落。(4)进行实验时,首先需要设置浓度为 0 的苯酚作为空白对照组,并且 6 号试管苯酚浓度为 1 mg/L,由此可见,浓度梯度应该为 0.2,即表中 1~5 号比色管的苯酚浓度应分别为 0 mg/L、0.2 mg/L、0.4 mg/L、0.6 mg/L、0.8 mg/L。如果废水为 50 mg/L 苯酚溶液,降解后约有 21%的苯酚残留,即残留液中苯酚浓度约为 10.5 mg/L,比色管中苯酚的浓度范围为 0~1 mg/L,故需要将残留液稀释 20 倍后再进行比色。