1、ICS 65.020.30B 43DB 37山 东 省 地 方 标 准DB37/T XXXXXXXXX奶山羊人工授精技术规程Technical regulations for artificial insemination of dairy goatsXXXX-XX-XX 发布 XXXX-XX-XX 实施山 东 省 质 量 技 术 监 督 局 发 布DB37/T XXXXXXXXXI前 言本标准按照GB/T 1.12009给出的规则起草。本标准由山东省畜牧兽医局提出。本标准由山东省畜牧业专业标准化技术委员会归口。本标准起草单位：山东农业大学、青岛市畜牧兽医研究所。本标准主要起草人：王建民、程明
2、、赵金山、李培培、纪志宾。DB37/T XXXXXXXXX1奶山羊人工授精技术规程1 范围本标准规定了奶山羊的人工授精室建设、种公羊选择与管理、器械消毒、采精、精液品质检查、精液稀释、母羊发情鉴定、输精等技术环节。本标准适用于奶山羊的规模羊场、养殖小区和人工授精站（点）。2 术语和定义下列术语和定义适用于本文件。2.1 奶山羊 dairy goat以生产羊奶为主要经济用途的山羊。2.2 种公羊 stud ram符合品种标准、具有种用价值并参加配种的公羊。2.3 假阴道 artificial vagina模拟母羊阴道环境条件的采精工具，由外壳、内胎、漏斗、集精杯等组成。2.4 采精 semen
3、collection用人工模拟且具有自然交配感的工具获得公羊精液的方法。2.5 精液 semen由公羊的生殖器官产生并排出体外含有精子的体液。2.6 精子活力 sperm viability精子的活动能力。在38 左右、400倍显微镜下，观察到的呈直线运动精子数占总精子数的比例。常用0.1至0.9表示。DB37/T XXXXXXXXX22.7 精子密度 sperm density每毫升精液中的精子数。在显微镜下观察，根据精子之间的空隙大小评定为三级，即空隙小于一个精子长度时为“密”；空隙约为一个精子长度时为“中”，空隙大于一个精子长度时为“稀”。3 人工授精室3.1 建造要求3.1.1 采精室
4、面积 10 m215 m 2、精液品质检查室 10 m2和输精室 10 m2。3.1.2 室温应保持在 18 25 ，室内及周围环境卫生状况良好。3.2 器具物品常用仪器、物品等参见附录A。4 种公羊选择与管理4.1 种公羊选择所选用种公羊应符合品种特征和达到一级以上要求，并具有良好的种用体况。4.2 种公羊管理4.2.1 非配种期种公羊可集中饲养，配种期单圈或小群饲养。4.2.2 成年公羊在配种前 45 d 更换为配种期日粮，并定人、定时采精，第一周采精 1 次，第二周采精 2 次，逐渐增加采精频率，至配种前 1 周达到每隔 1 d 采精 1 次。4.2.3 初次使用的青年公羊，采精训练从
5、8 月龄开始，刚开始每周采精 1 次，周岁后正常采精。4.2.4 正常采精时，每周可采精 3 d5 d，每天可采精 12 次，采精间隔为 2 h。冬春季节宜上午采精，夏秋季节宜早上采精。5 器具消毒5.1 器具清洗5.1.1 所有器具使用前，应先用中性皂粉彻底清洗，再用清水冲洗干净；直接接触到精液的器械如集精杯等还要用蒸馏水再冲洗两遍；晾干备用。5.1.2 采精结束后，假阴道、集精杯应立即放进水中浸泡，先用清水冲洗一遍，再进行正常清洗。5.2 器具消毒5.2.1 玻璃棒、镊子、纱布、医用凡士林、生理盐水棉球等用高压蒸汽灭菌锅 121 灭菌 15 min。5.2.2 假阴道内胎、集精杯用 75
6、%酒精进行表面灭菌。用长柄镊子夹持酒精棉球，从内向外旋转，擦拭消毒内胎及集精杯，或用酒精喷壶将内胎及集精杯等表面喷湿消毒。5.2.3 开膣器应用 0.1 %新洁尔灭或 10 %高锰酸钾溶液浸泡消毒。DB37/T XXXXXXXXX36 采精6.1 台羊6.1.1 台羊应为健康母羊，四肢健壮，体型大小合适。6.1.2 初次采精的公羊应选择发情期母羊作为台羊；对训练有素的公羊可用非发情期母羊或假台羊。6.2 清洗种公羊包皮采精之前，应用剪刀剪去阴茎包皮前端的长毛，并用灭菌湿毛巾将包皮周围擦拭干净。6.3 假阴道的安装6.3.1 安装前，先检查假阴道外壳是否有裂缝或小孔；内胎是否漏气或沙眼，边缘是否
7、有裂口；活塞是否漏气。用前将内胎放入开水中浸泡 3 min5 min。6.3.2 安装时，先将内胎装入外壳，光面朝内，两头伸出外壳等长，然后依次将内胎两端翻套在外壳上，调整内胎方向和紧张度，使其稍绷紧且无扭转，最后在两端分别套上橡皮圈固定。6.3.3 把集精杯装在假阴道一端。从假阴道采精口一端，用消毒玻棒蘸取少许医用白凡士林油均匀涂于假阴道内胎的前 1/3 段。6.3.4 从注水孔向假阴道与内胎夹层中加入 50 55 的热水 150 mL180 mL，左右晃动使内胎受热均匀；用温度计检测内胎表面温度达 40 42 为宜。从注水孔向假阴道夹层内吹入适量空气，使假阴道采精口端的内胎胀起呈三角形。6
8、.4 采精方法6.4.1 采精场所要固定，场地平坦避风，环境卫生、安静。6.4.2 把公羊牵到采精现场后，不要立即采精，让其空爬跨两次。6.4.3 采精员蹲于台羊右后侧，右手持假阴道，与地面呈 3540角倾斜；当公羊爬跨台羊伸出阴茎时，迅速用左手托住阴茎包皮，顺势将阴茎导入假阴道内；待公羊用力前挺完成射精后，将假阴道后撤竖起，放掉内胎中间空气，取下集精杯，盖上集精杯盖，编号待检。7 精液品质检查7.1 射精量成年公羊每次射精量应为0.5 mL2.0 mL，一般为1.0 mL。7.2 感官检查正常精液呈乳酪白色，无味或略带腥味。颜色或气味异常的精液均不可用于输精。7.3 显微镜检查用移液枪吸取原
9、精液5 L10 L，滴在洁净预热过的载玻片上，盖上盖玻片，在400倍生物显微镜下观察。原精精子活力在0.6以上、精子密度达到“中”以上时，方可稀释使用。8 精液的稀释8.1 配制稀释液DB37/T XXXXXXXXX48.1.1 复合稀释液的配制8.1.1.1 基础液：三羟甲基氨基甲烷（Tris）3.40 g，柠檬酸 1.90 g，葡萄糖 0.55 g，蒸馏水加至100 mL，定容，用 0.25 m 的滤膜滤过除菌。配成的基础液在 4 下保存备用，保存期不超过 7 d。8.1.1.2 稀释液：取基础液 80 mL，加入新鲜卵黄 20 mL，青、链霉素各 5 万单位，充分混匀。稀释液应现用现配，
10、储存时间不超过 12 h。8.1.2 其他可供选择的稀释液。包括 0.9 %注射用生理盐水，或维生素 B12 注射液，或煮沸过滤的鲜羊奶均可作为稀释液。但这类稀释液保持时间短，精液稀释倍数不宜过高。8.2 稀释精液8.2.1 根据原精液品质确定稀释倍数。精子活力达 0.6 以上，可作 15 倍稀释；精子密度在 25 亿以上，可作 10 倍以上稀释。8.2.2 在作 3 倍以下稀释时，先把稀释液与原精液同时置于 30 左右的水浴锅或恒温箱中等温预热，再将稀释液沿杯（瓶）壁缓缓加入精液中，然后轻轻摇动或用无菌玻棒搅拌，使之混合均匀。8.2.3 在作高倍稀释时，应分多次完成，每次不超过 3 倍，放置
11、 10 min 后再次稀释。8.2.4 稀释后精液需再次检验品质，精子活力在 0.3 以上、精子密度达到“中”以上时方可使用。8.2.5 把合格的精液分装在离心管或 0.25mL 的细管中，注明种公羊号、采精时间、精液量及活力等。9 精液的保存运输9.1 保存把装有精液的离心管或精液细管束放进装满30 温水的500 mL烧杯内，一同放入4 冰箱中，约2 h后温度可降至4 。9.2 运输在运输途中，要维持低温，避光，防震。9.3 使用9.3.1 稀释后 2 h 内的精液可直接使用，不需要降温处理。9.3.2 到达输精点后的精液，使用前应在室温条件下自然升温，经检查合格后尽快使用。已升温的精液不得
12、再降温储存。10 母羊发情鉴定10.1 外部观察法奶山羊发情特征明显。发情母羊一般表现为兴奋不安、不断鸣叫、频频摆动尾巴、食欲减退；主动接近公羊，有爬跨行为；外阴部充血、肿胀、流出粘液。10.2 阴道检查法DB37/T XXXXXXXXX5先将母羊保定好，消毒外阴部；再把内窥镜镜筒（或开膣器）涂上凡士林插入母羊阴道，打开电源（或用手电筒）观察阴道内部变化。如发现阴道黏膜充血、有透明黏液渗出，子宫颈口开张、潮红、有黏性分泌物时，即可定为发情。11 输精11.1 输精时间11.1.1 通常做法是在母羊出现发情特征 12 h 时输精。如早晨发现母羊发情，可在当天下午输精；如傍晚发现母羊发情，则在翌日
13、上午输精。为提高受胎率，可在第一次配种后 6 h8 h 进行第二次输精。11.1.2 根据发情鉴定结果确定的最佳输精时间，一般是母羊发情特征刚好消失、行为变安静时，或者子宫颈口开张、颜色潮红时。11.2 输精方法11.2.1 先将母羊保定，对外阴部清洗、消毒；再将经消毒的开膣器轻缓地插入阴道，打开阴道，寻找子宫颈口，最后将输精器插入子宫颈口内 1 cm1.5 cm 处，注入精液。11.2.2 用过的输精器及开膣器须再经清洗消毒后，方可给另一只母羊输精使用。11.3 输精量11.3.1 正常情况下，每只母羊的输精量为原精液 0.05 mL0.10 mL，稀释精液 0.15 mL0.20 mL。1
14、1.3.2 初配母羊阴道狭窄，开膣器无法充分展开，找不到子宫颈口，可采用阴道输精，但输精量至少增加一倍。12 记录档案12.1 种公羊采精及精液品种检查记录包括采精日期、公羊耳号、射精量、精液颜色、精液气味、精子活力、精子密度、稀释倍数、稀释液、稀释后精液量等。12.2 母羊输精配种产羔记录包括配种母羊号、与配公羊号、输精日期及次数、预产期、实产期、产羔数及同胎羔羊数等。12.3 档案管理按照畜禽标识和养殖档案管理办法的规定执行。DB37/T XXXXXXXXX6A A附 录 A（规范性附录）奶山羊人工授精室所需仪器和物品品名 单位 数量 品名 单位 数量假阴道 套 5 冰箱 台 1集精杯 个
15、 10 干燥箱 台 1羊输精器 支 2 广口保温瓶 个 2羊开膣器 把 2 长玻棒 支 2医用凡士林 瓶 1 量杯 250 mL 个 2400 倍生物显微镜 台 1 量杯 100 mL 个 2载、盖玻片 套 1 短玻棒 支 2擦镜纸 本 2 30 立升液氮罐 个 10100 温度计 支 2 烧杯 500 mL 个 2消毒锅 个 1 漏斗 个 2电子天平 0.01110 g 台 1 烧杯 300 mL 个 24 孔数显衡温水浴锅 台 1 瓷盘 2030 cm 个 1试管刷（大、小各 1 个） 个 2 100 mL 容量瓶 个 2手术剪 把 1 有盖瓷盘 个 2镊子（长、短各 1 把） 把 2 操作台 套 1一次性采精手套 包 2 消毒脱脂棉花 包 1假阴道内胎（另配） 条 5 消毒脱脂纱布 卷 1精液过滤纸 包 2 2 mL 塑料注射器 支 10备注：蒸溜水、75 %酒精、2 %碘酊、登记本、药匙、桌椅、标签、毛巾、肥皂、洗衣粉、笔、记录本、工作服、纸巾、分析纯柠檬酸三钠、葡萄糖、青（链）霉素、生理盐水等。_
