1、ICS 65.020.30B 44DB 37山 东 省 地 方 标 准DB 37/T XXXXX 驴冷冻精液人工授精技术规范Artificial Insemination Regulation of Donkey Frozen SemenXXXX-XX-XX 发布 XXXX-XX-XX 实施山 东 省 质 量 技 术 监 督 局 发 布DB37/ XXXXXI前 言本标准按照GB/T 1.12009给出的规则起草。本标准由山东省畜牧兽医局提出。本标准由山东省畜牧业标准化技术委员会归口。本标准起草单位：山东省农业科学院奶牛研究中心、青岛农业大学、东阿阿胶股份有限公司、聊城大学、聊城市畜牧站。本标
2、准主要起草人：王长法、王秀革、孙玉江、嵇传良、刘桂芹、于杰、孙艳、王金鹏、杨春红、黄金明、鞠志花、张瑞涛、姜桂苗、李海静、张燕、姜强、姜永红、王俊海、刘万成、赵爱民。DB37/ XXXXX1驴冷冻精液人工授精技术规范1 范围本标准规定了驴冷冻精液人工授精的操作技术要求。本标准适用于大、中型母驴的人工授精技术应用。2 规范性引用文件下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅所注日期的版本适用于本文件。凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。DB37/T 2309 德州驴冷冻精液生产技术规程NY/T 13352007 牛人工授精技术规程3 术语及定义
3、下列术语和定义适用于本标准。3.1 冷冻精液 frozen semen是将原精液过滤、离心后，用稀释液等温稀释、平衡后快速冷冻，在液氮中保存的细管精液。3.2 冷冻精液解冻 thawing of frozen semen冷冻精液使用前使冷冻精子重新恢复活力的处理方法。3.3 发情期 estrus peroid母驴出现发情行为和生殖生理变化持续的时间，一般为5 d8 d。3.4 发情鉴定 estrus detection通过外部观察或其他方式确定母驴发情程度的方法。3.5 妊娠诊断 pregnancy diagnosis采用外部观察、直肠检查和超声波检查等方法判断母驴受精后其是否妊娠的方法。生产
4、中一般在配种后35 d45 d 通过直肠检查法判断母驴是否妊娠。DB37/ XXXXX24 适用对象达到适配标准的育成驴，初配年龄2.5岁,体重70 %成年体重；健康，膘情适中的经产母驴。参见GB/T 24877。5 输精准备5.1 器具清洗和消毒凡是接触精液和母驴生殖道的输精用器具都应进行清洗和消毒。参见NY/T 1335-2007中5.1。输精枪参见附录A图A.1。5.2 冷冻精液解冻按DB37/T 2309规定执行。5.3 冷冻精液质量检查按DB37/T 2309规定执行。冷冻精液品质要求，显微镜下解冻后活力达到35 %以上。6 母驴发情鉴定母驴的发情鉴定采用外部观察、直肠检查和超声波检
5、查的方法。6.1 外部观察通过母驴的外部表现症状和生殖器官的变化判断母驴是否发情和发情程度（见附录B表B.1）。6.2 直肠检查6.2.1 检查准备检查人员剪短并磨光指甲，带一次性长臂手套，手套和驴外阴涂上润滑液。6.2.2 检查方法五指并拢成锥形，手心向下，轻轻插入直肠内，手指扩张，以便空气进入直肠，引起直肠努责，将粪排出。检查人员手指继续伸入，当发现母驴努责时，应暂缓，直至狭窄部，以四指进入狭窄部，拇指在外。此时可采用以下两种检查方法：下滑法：手进入狭窄部，四指向上翻，在第 3、第 4 腰椎处摸到卵巢韧带，随韧带向下捋，就可摸到卵巢。由卵巢向下就可摸到子宫角、子宫体。托底法：一只手进入盲肠
6、狭窄部，四指向前下摸，就可以摸到子宫底部，顺子宫底向左上方移动，便可摸到子宫角。到子宫角上部，轻轻向后拉就可摸到左侧卵巢。6.3 超声波检查 6.3.1 检查准备DB37/ XXXXX3在一次性长臂手套的中指处挤入一定量的耦合剂，将B超探头浸入到耦合剂中，用长臂手套将探头导线包裹。6.3.2 检查方法将探头置于手掌心处，五指并拢成锥形，携带B超探头进入肠道。手持探头，寻找卵巢，将探头紧贴于卵巢上并将卵巢压在直肠壁上，轻微转动探头即可观察到卵巢上卵泡的发育情况。7 输精7.1 输精时间确定7.1.1 外部观察法通过母驴的外部表现症状和生殖器官的变化判断母驴是否发情或发情程度（见附录B表B.1），
7、进入发情盛期时适宜输精。7.1.2 直肠检查法触摸卵巢时，卵泡壁非常薄，有一触即破的感觉。触摸时，部分母驴有不安和回头看腹的表现。有时在触摸的瞬间卵泡破裂，卵子排出，直检时则可明显摸到排卵凹及卵泡膜。此时宜立即输精。8 h12 h卵泡仍未破裂，宜再输精一次。7.1.3 超声波检查法卵泡的B超图像是一个中部黑、边缘亮的椭圆。随着发情的发展椭圆不断增大，发情后期将要排卵时，由于卵泡变软，用探头轻压卵泡时，卵泡会发生变形。观察到卵泡直径不再继续扩大时，或卵泡直径40 mm时，即可输精。7.1.4 输精部位穿过子宫颈和子宫分叉处至排卵侧子宫角基部。7.2 输精方法轻轻按摩肛门口，使母驴环状括约肌放松，
8、清除直肠粪便，用消毒水擦洗外阴部，用清水洗净，用消毒毛巾或纸巾擦干外阴。将解冻后的细管精液每5支一组装入输精枪，套上一次性套管。配种员一只手带消毒一次性长臂手套，五指形成锥形，将输精枪缓慢插入母驴阴道内，握住子宫颈，将输精枪顶端插入子宫体输精部位，另一只手缓缓将精液推入子宫内。慢慢拔出输精枪，持续轻压驴背腰部，使其伸展。8 妊娠检查 8.1 外部观察母驴妊娠后阴道被黏稠分泌物粘连，手不易插入。随着妊娠日期增加，母驴食欲增强，性情变温和，行为变安稳，出气粗，被毛光亮。怀孕中后期腹围增大，腹壁一侧突出，有时可观察到胎动。8.2 直肠检查DB37/ XXXXX4输精后二个情期未发情，通过直肠触摸检查
9、子宫，可查出两侧子宫角不对称，孕侧子宫角基部膨大。膨大部有鸡蛋大小，触之硬有弹性，有时柔软有波动感。在人工授精60 d后可查出膨大部如垒球或稍大，膨大部内液体波动明显。8.3 超声波诊断用B超检查母驴的子宫及胎儿、胎动、胎心摶动等。母驴怀孕15 d20 d，孕角侧卵巢比另一侧卵巢大，孕侧子宫角基部出现蚕豆大小的突起胚泡，有黄体，子宫壁变厚，有弹性。9 数据记录输精后，应做好繁殖及育种等相关数据记录，记录内容及格式参见附录C。DB37/ XXXXX5A A附 录 A（资料性附录）驴用输精枪图 A.1 驴用输精枪主要部件平面图DB37/ XXXXX6B B附 录 B（资料性附录）母驴发情外部表现症
10、状和生殖器官的变化表 B.1 母驴发情鉴定外部表现症状和生殖器官的变化期别 发情初期（不接受爬跨期） 发情盛期（接受爬跨期） 发情末期（不接受爬跨期）外观表现母驴兴奋不安，食欲减退，吧嗒嘴、抿耳、游走，追逐爬跨它驴，而它驴爬跨不予接受，一爬就跑。母驴游走减少，闪阴排尿，吧嗒嘴、抿耳，有口涎流出，它驴爬跨时站立不动、塌腰、后肢张开，频频举尾，愿接受爬跨。母驴性欲减弱、偶有吧嗒嘴，它驴爬跨时，有时后踢，不愿再接受爬跨。生殖器官变化阴户肿胀、松弛、充血、发亮，子宫颈口微张，有稀薄透明黏液流出，阴道壁潮红。子宫颈口红润开张，阴道壁充血，黏液显著增加，流出大量透明而黏稠的分泌物，俗称“吊长线” 。黏液量减少，浑浊黏稠。子宫颈口紧闭，有少量浓稠黏液，阴唇消肿起皱，下联合处有茶色干痂。卵泡变化卵巢变软，光滑，有时略有增大。相当于卵泡的发育期和生长期。一侧卵巢增大，卵泡直径大于 40 mm 以上。相当于卵泡成熟期和排卵期。此时期为适宜输精时间。卵巢体积显著缩小，在卵泡破裂的地方形成黄体。相当于黄体形成期。DB37/ XXXXX7C C附 录 C（资料性附录）配种妊检记录表表 C.1 配种妊检记录表序号 母驴号 配种日期 与配驴号 配种员 妊检日期 妊检结果 备注1234567891011121314151617_
