1、ICS 65.120B 25DB 37山 东 省 地 方 标 准DB 37/T XXXXXXXXX饲草中中性洗涤纤维(NDF)的测定Determination of neutral detergent fiber in forageXXXX-XX-XX发布 XXXX-XX-XX实施山 东 省 质 量 技 术 监 督 局 发 布DB37/ XXXXXXXXXI前 言本标准按照GB/T 1.12009 给出的规则起草。本标准由山东省畜牧兽医局提出。本标准由山东省畜牧业标准化技术委员会归口。本标准由山东省畜牧总站起草。本标准主要起草人：姜慧新、翟桂玉、柏杉杉、王兆凤、刘栋、曹阳、崔山、郭文娟、张磊、
2、刘瑞菊。DB37/ XXXXXXXXX1饲草中中性洗涤纤维(NDF)的测定1 范围本标准规定了饲草中中性洗涤纤维(NDF)的测定方法。本标准适用于草捆、草粉、草颗粒、草块和青贮饲料等饲草产品中中性洗涤纤维的测定。2 规范性引用文件下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅所注日期的版本适用于本文件。凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。GB/T 6435 饲料中水分的测定GB/T 6682 分析实验室用水规格和试验方法GB/T 14699.1 饲料采样GB/T 20195 动物饲料 试样的制备NY/T 2129 饲草产品抽样技术规程3 术语和定
3、义下列术语和定义适用于本标准。3.1 饲草 forage指可用于饲喂家畜的草类植物，包括牧草和饲料作物及部分农副资源加工产品。3.2 中性洗涤剂 neutral detergent指用于清洗样品中脂肪、淀粉、蛋白质和糖类等成分的中性合成洗涤剂，在25 下pH值为6.97.1。3.3 中性洗涤纤维 (NDF) neutral detergent fiber用中性洗涤剂洗去饲草中的脂肪、淀粉、蛋白质和糖类等成分后，残留的不溶解物质的总称。包括半纤维素、纤维素、木质素及少量的硅酸盐等。4 原理试样在一定温度下，经中性洗涤剂处理，除去细胞内容物中大部分脂肪、淀粉、蛋白质和糖类等，剩下半纤维素、纤维素、
4、木质素等细胞壁成分及少量硅酸盐等杂质，即为中性洗涤纤维(NDF)。DB37/ XXXXXXXXX25 试剂与材料5.1 无水亚硫酸钠（Na2SO3）。5.2 丙酮（CH3COCH3）。5.3 中性洗涤剂：称取 18.61 g 乙二胺四乙酸二钠（Na 2EDTA）和 6.81 g 四硼酸钠（Na 2B4O710H2O），加适量温水溶解；称取 4.56 g 无水磷酸氢二钠（Na 2HPO4），加适量温水溶解；称取 30.00g 十二烷基硫酸钠（USP）加适量温水溶解；冷却后将上述三种溶液混合，加入 10 mL 三甘醇（C 6H14O4）或乙二醇乙醚（C 4H10O2），用水定容至 1000 mL，
5、适当的搅拌和加热有助于溶解。此溶液的 pH 值在 6.97.1（一般不用调整）。5.4 耐高温 -淀粉酶稀释液：8.0 mL -淀粉酶（1005温度下活性为 8000 U/g，工业级）加水稀释至 250mL。5.5 滤袋：孔径小于 45m，可封口并能迅速渗透的特制无纺布滤袋。5.6 干燥袋：内置干燥剂的拉口密封袋。注：除非另有说明，所用试剂均为分析纯，水符合 GB/T 6682三级水的标准。6 仪器设备6.1 铡草粉碎机：将饲草样品铡短并粗粉。6.2 实验室用样品粉碎机：将粗粉后样品细粉至 0.42 mm (40 目)。6.3 网筛：孔径为 0.42 mm(40 目)。6.4 电子分析天平：分
6、度值 0.0001 g。6.5 电热恒温鼓风干燥箱：温度可控制在 102 2 。6.6 全自动纤维分析仪：能自动加入洗涤溶液，并排除废液，消煮温度控制在 100 0.5 ，压强保持 68.95 KPa172.375 KPa，确保每个样品能充分洗涤。6.7 手压式封口机。7 样品的采集与制备7.1 采样按 NY/T 2129 要求进行采样，鲜绿饲草按 GB/T 14699.1 要求采样。7.2 样品的制备先按照 GB/T 20195 和 GB/T 6435 方法测定采集样品和试验样品水分含量，再按照以下步骤制备试验样品：将草粉、草块和草颗粒等长度较短的饲草样品，用实验室用样品粉碎机粉至过孔径为
7、0.42 mm（40 目）的网筛，充分混合后用四分法缩分至 100 g，装袋，作为试验样品。 干草捆等长度较长的饲草产品，先用铡草粉碎机粗粉，再经实验室用样品粉碎机粉至过孔径为 0.42 mm（40 目）的网筛，充分混合后用四分法缩分至 100 g，装袋，作为试验样品。鲜绿饲草和青贮料，先用电热恒温鼓风干燥箱在 65 下烘干或晾干，并根据样品长短，按照以上方法进行试验样品的制备。8 试验步骤DB37/ XXXXXXXXX38.1 称样用标记笔给滤袋编号，称滤袋重（m 1）（滤袋不用预干燥）。称量0.45 g0.55 g（准确至0.0002 g）试样（m 2），小心倒入滤袋底部，避免样品粘在封样
8、线以上。同时称空白滤袋重（m 0）。8.2 封口用封口机在距滤袋口4 mm处封口。8.3 脱脂将装有样品的滤袋放入250 mL的烧杯中，加入足量的丙酮直至覆盖滤袋，浸泡并振荡10 min，倒出，重复3次。脱脂过程在通风橱中进行。8.4 消煮8.4.1 置盘将滤袋均匀摆放到消煮容器内，如有滤袋架，则把滤袋逐层平铺到滤袋架上，并在顶层放置重锤，确保洗涤液能完全浸溶滤袋中的样品。8.4.2 加液8.4.2.1 加入中性洗涤剂，直至浸没顶层滤袋。然后搅拌，并加入 20 g 无水亚硫酸钠。8.4.2.2 如样品中淀粉含量高，例玉米全株青贮等，在加入中性洗涤液的同时，添加 4 mL 耐高温-淀粉酶，糊化样
9、品中的淀粉；温水洗涤时，加入 250 mL 耐高温 -淀粉酶稀释液，完全分解样品中淀粉。8.4.3 洗涤中性洗涤剂浸没顶层滤袋，加热升温至100 ，自动搅拌1 h，排液；设置热水器处于工作状态，水温70 ，温水浸没顶层滤袋，自动搅拌5 min，排液；多次重复冲洗，直至滤袋表面无泡沫和中性洗涤剂。滤袋在丙酮中浸泡3 min5 min，取出后在通风橱中晾干。8.4.3 烘干在通风橱中风干滤袋，至丙酮完全挥发，放入电热恒温鼓风干燥箱中于102 2 烘干2 h4 h，取出滤袋，快速装入干燥袋，放置干燥器中冷却至室温后迅速称量（m 3），再烘干，冷却，称量，直至两次称量之差小于0.002 g。9 试验数据处理9.1 结果计算试样中中性洗涤纤维（NDF）的含量以质量分数 1表示，数值以%计，按式（1）计算：.(1)0231mc 式中：DB37/ XXXXXXXXX4m1滤袋的质量，单位为克（g）；m2试样的质量，单位为克（g）；m3消煮后滤袋烘干质量，单位为克（g）；c1校正因子，空白滤袋因素（消煮后空白滤袋烘干质量/原空白滤袋质量m 0） 。注：按照GB/T 6435测定采集样品与试验样品的水分含量，如结果不一致，则应参照 GB/T 20195方法对检测值进行校正，还原采集样品的中性洗涤纤维含量。9.2 重复性在重复性条件下获得的两次独立测定结果的允许相对偏差3 %。_
