1、探究温度对酶活性影响的实验设计遵义县团溪中学 黄定梅 “新陈代谢与酶”是高中生物学的一个重要内容，学生必须通过实验探究酶的活性及其特征，为此，我先后尝试用唾液淀粉酶催化淀粉水解，过氧化氢酶催化 H2O2 分解来研究温度和 PH 值对酶活性的影响，但实验效果不佳，于是我对此实验作了改进，取得了良好的实验效果，其具体实验方案如下：一、实验目的1、学会探索影响酶活性因素的方法。2、探索 a淀粉酶不同温度下催化淀粉水解的情况。二、实验原理淀粉遇碘后，形成蓝紫色复合物，a淀粉酶可以催化淀粉逐步水解成麦芽糖和葡萄糖，麦芽糖和葡萄糖遇碘后不显色。三、实验材料和用具试管 12 支，试管刷 1 把，试管架 1
2、个，刻度吸管 2 支，恒温水浴箱 2 台（水温分别保持在 60、100） 、塑料烧杯 1 个（冻冰） ，铅笔 1 支，1%淀粉溶液，0.1%a淀粉酶溶液，卢戈氏碘液，蒸馏水。四、实验准备1、实验前教师应配制好 1%淀粉溶液和 0.1%的 a淀粉酶溶液，卢戈氏碘液。2、课前 90min，打开 2 个温水浴箱，并调好温度。五、实验步骤和实验记录温度对淀粉酶活性的影响处理 处理 处理1A 1B 1C 1D 2A 2B 2C 2D 3A 3B 3C 3D1.0%淀粉 2ml + + - - + + - - + + - -0.1%a-淀粉酶 1ml - - + - - - + - - - + -蒸馏水
3、1ml - - - + - - - + - - - +实验预处理 2/5min 60/5min 96/5min酶促反应酶- 反应 每组将预处理试管 A 中底物和试管 C 中酶混合、试管 B 中底物和试管 D 中蒸馏水混合，分别在各自温度下再保温 5min1 滴碘液 1 滴碘液 1 滴碘液鉴定实验1A+1C 1B+1D 2A+2C 2B+2D 3A+3C 3B+3D鉴定反应 溶液颜色 深蓝色 深蓝色 黄色 深蓝色 深蓝色 深蓝色六、实验结论：在不同温度下，a-淀粉酶的活性不同，低于最适温度， a-淀粉酶的活性没有全部释放，高于最适温度 a-淀粉酶的活性随着温度的升高而消失。从以上实验表格可知，在 2时，a-淀粉酶的活性最低，几乎没有活性，在 60时，a- 淀粉酶的活性最高，即 60为最适温度，在 96时，a-淀粉酶活性完全丧失。七、说明：1）对照组均为深蓝色，实验组中冰水组颜色为深棕色，60时为黄色，100时为深蓝色。2）水浴箱水温 100时，敞开盖后只能维持 96。所以测定的是 96下酶的活性，但也可以观察到明显现象。3）水浴锅要保持水温 60时，应设定在 61，敞开盖时的实际温度为 60.1左右。试 管编 号反 应性 质
