1、日常分析的注意点,岛津国际贸易（上海）有限公司,维护流程图,吸滤头,单向阀,柱塞密封圈,线路过滤器,手动进样器,检测器,日常维护,材料：不锈钢烧结，孔径10um 故障：堵塞 表现：连接管中不断有气泡生成 措施：用520的稀硝酸，以长时间浸泡为主，超声波清洗23分钟即可，再用蒸馏水清洗 注意点：吸滤头拆下时不能将塑料管剪断,吸滤头,日常维护,单向阀,LC-10ATvp泵：串联 式往复泵,LC-10ADvp泵：并联式 往复泵,一对入出口单向阀,两对入出口单向阀,日常维护,单向阀结构,流动相,工作原理,日常维护,表现1 ：泵无法吸液或排液，流路不通 故障：宝石球粘附于垫片 措施：1）用针筒推抽入口单
2、向阀，抽推出口单向阀，测试单向导通性（注意用手抵住另一端）2）拆下单向阀，放入异丙醇或水中，用超声波清洗,单向阀,日常维护,表现2 ：系统压力波动大 故障：宝石球或塑料垫片受污导致密封不好 措施：拆下单向阀，放入异丙醇或水中，用超声波清洗,单向阀,日常维护,现象：系统压力波动大或从下部清洗口漏液 故障：密封圈磨损而导致密封不良 措施：更换密封圈 注意点：拆卸泵头前，柱塞杆复位，用FUNC键选择（PSET）设置1回车,柱塞密封圈,日常维护,现象：系统压力波动大或压力偏高 故障：堵塞 措施：5稀硝酸，超声波清洗 判断依据：关闭排液阀，断开出口管路，设定流1ml/min，如压力3kgf/cm2，则可
3、能堵塞。,线路过滤器,排液阀,压力传感器,线路过滤器,流动相,日常维护,紫外检测器,参比池,样品池,光线,光电倍增管,入口,出口,日常维护,表现：噪声大，基线不易稳定。 故障：样品池受污 检查方法：设定250nm波长，通甲醇或水，检查SMPL EN和 REF EN，如两者相差教大（超过30%），则样品池受污。 措施：从入口注入异丙醇清洗样品池；如污染严重， 需拆解样品池，超声清洗透镜。,紫外检测器,日常维护,更换氘灯（紫外检测器）,判断氘灯能量：设定220nm波长，检查参比池能量REF EN如能量低于800（出厂标准仅供参考），需更换氘灯。 操作注意点：不要用手直接接触氘灯表面，以及M1反射镜
4、。,关于样品的注入,手动进样阀7725i,日常维护,操作注意点： 1）插针应插到底 2）进样应使用液相色谱专用平头进样针 3）清洗应使用专用针口清洗器,手动进样器,定子,转子,塑料箍,弹簧,不锈钢套,手动进样器的原理图,LOAD 装填状态,INJECT进样状态,交叉污染的原因,微量注射器针,红色部位表示样品可能残留,手动进样法,一般的方法1.在进样状态INJECT清洗针口2.在装填状态LOAD插入微量注射器3.注入样品4.切换到进样状态LOADINJECT,手动进样法,便捷的方法（不需清洗）1.进样状态INJECT插入微量注射器2.切到装填状态LOAD3.注入样品4.切换到进样状态LOADIN
5、JECT,有机溶剂的优与劣,等级选择,什么时候需要 “HPLC”级有机溶剂,1. 等浓度洗脱法的微量分析用光谱进行判断 2. 梯度洗脱法分析,1. 等浓度洗脱法的微量分析,优级,噪声,噪声,目的成分,目的成分,HPLC级,优级,HPLC级,测试波长上的噪声水平与流动相的吸光度成正比,乙腈,2. 梯度洗脱法分析,需要“HPLC”级有机溶剂 理由：即使没有注入被测样品，因流动相的不纯物质，在混合比例变化过程中产生吸收而出峰。,梯度洗脱法的注意点,1.流动相使用HPLC级有机溶剂和纯水2.查看并保存空白实验的数据（基线扣除）。 3.遵守分析周期（分析时间+平衡时间）（一般初次分析数据不采用）,谈谈缓
6、冲液,谈谈缓冲液,选择缓冲液的步骤1 .确定最佳分离状态时的流动相pH值2 .选择具有与流动相pH值相近的pKa 的缓冲液（即使浓度稀也具有较强能力的缓冲液）3 .确认检测波长下缓冲液是否有大的吸收（在波长210nm附近进行检测时，不能用醋酸和 柠檬酸的缓冲液）,代表性弱酸的pKa,pK1 pK2 pK3醋酸 4.8柠檬酸 3.1 4.7 5.4磷酸 2.1 7.2 12.3,关于脱气,超声脱气和在线脱气,脱气的目的,1. 防止由气泡的产生引起的故障2. 防止由溶解（在液体中的）气体量 的变动引起的检测不稳定程度 示差折射率检测器*使折射率变化 UV检测器（200nm以下）*溶解氧气有吸收 荧
7、光检测器*溶解氧气有消光作用,脱气的方法,1. 吸气器法（流动相抽滤）*可以抑制制做流动相时产生的气泡*只是暂时的脱气法*不能解决因溶解气体造成的问题 2. 超声脱气法法 3. 使用氟树脂膜的减压脱气法,超声脱气法,使用超声波震荡器，一般超声波震荡 15 分钟以上。 注意流动相在超声震荡脱气过程中，温度会升高，应待其降至室温后再上机使用。 由于液体对气体的溶解作用，时间长后气体会再溶入流动相中，应引起注意。,使用氟树脂膜的减压脱气法,氟树脂膜,真空室,往送液泵,真空泵,控制器,流动相,予处理柱和防护柱,机理不同，作用也不同,予处理柱和防护柱的位置,予处理柱,防护柱,泵,进样器,分析柱,防护柱的
8、作用,代替分析柱捕集样品中的杂质，容易更换，降低成本。,予处理柱的作用,用于免除流动相的影响例如1. 在离子色谱分析中，免除多价离子的不 良影响。2. 在梯度洗脱分析中，使鬼峰后移，不影 响目的成分的分析。3. 防止硅胶载体的溶解。 （使用碱性或含有胺的流动相时）,关于ODS柱补修,一般情况下ODS柱不能再生，如使用不当引起柱效降低或损坏，用此方法补修可临时应急，最好更换新的色谱柱,分析柱的保养,在使用新柱之前，最好用强溶剂在低流量下（0.2-0.3ml/min)冲洗30min，长时间未用的分析柱也要用样处理 定期使用强溶剂冲洗分析柱 使用缓冲盐时，要先用水冲洗，再用有机溶剂冲洗 净化样品 优化分离条件 不使用时，要封紧入出口，避免固定相干枯,分析柱的维护, 症状：系统压力过高，峰型变差（拖尾峰，前沿峰，分叉峰），保留时间的改变 延长柱寿命的方法：1 使用保护柱2 反冲柱3 修补柱头4 换柱头过滤片,峰的变形,根部变宽,有肩 或 分叉,峰产生有肩或分叉的原因,1. 柱子劣化（入口处产生不均匀的空隙） 2. 样品变异劣化（生成氧化物、分解物等）,判断标准所有的峰都产生有肩峰或分叉时则为柱子劣化,柱的补修,用分析时的两倍流量送液，反复多次填充,填料的取出,容器,甲醇送液,未污染的部分,旧的色谱柱,恢复例,柱修补后,谢 谢！,
