1、寄生虫病诊断、流行、 防治 与临床,（1）询 问 病 史 (History)：感染史、排虫 史及临床症状,（2）体 格 检 查 (Physical examination)： 皮下包块、皮疹,一、Diagnosis of Parasitosis,患者，男，59岁，高校教师，长沙市人，因生食鱼片1月余在腹部皮肤出现匍行疹。经皮肤组织活检，在切片中发现棘颚口线虫幼虫切面，后从组织块中分离到残存的虫体。,一、寄生虫病诊断(Diagnosis of Parasitosis),（1）询问病史 ( Taking History)感染史、排虫史及临床症状,（2）体格检查 ( Physical Examina
2、tion)皮下包块、皮疹,（3）实验室检查 (Laboratory test),实验室检查 (Laboratory test),1、基本原则 ( Basic principle )2、注意事项 (Note)3、病原学检查方法 ( Etiological test),（1）寄生虫通过宿主的排泄物、分泌物、 血 液离开人体，繁殖力强，感染较 重直接到宿主的排泄物、分泌 物、血液中 查找离体阶段。,1、基本原则( Basic principle ),A. Lumbricoides egg,S. Japonicum egg,B. Malayi Microfilaria,Trichomonas vagi
3、nalis,（2）寄生虫通过宿主的排泄物、分泌物、血液离开人体。对感染较轻、数量较 少或离体阶段个体太小者，可采取浓集法查找离体阶段。,1、基本原则( Basic principle ),Ancylostoma egg,Clonorchis.sinensis egg,（3）寄生于体内却在肛周产卵或虫卵在 经过肛门时粘附在肛门周围采 用肛门拭子法查虫卵。,1、基本原则( Basic principle ),Enterobius. vermicularis egg,Taenia egg,（4）有离体阶段的寄生虫在查不到离体 阶段时，又高度怀疑为感染者或进 行大面积人群调查可采用免疫 学检查。,1、
4、基本原则( Basic principle ),Circumoval precipitin test (COPT),（5）寄生于体内却无离体阶段或呈隐性 感染可采用组织活检法查寄生 阶段和血清学检查。,1、基本原则( Basic principle ),Toxoplasma gondii trophozoite,Trichinella spiralis cyst,（1）注意蠕虫卵之间和原虫包囊之间的鉴别，以及蠕虫卵与各种相似物之间的鉴别；,2、注意事项 (Note),（2）注意各种检查方法的适应对象。,（3）有些寄生虫要注意采集标本的时间及 送检的时间。,（4）有些寄生虫的离体阶段有间隙性排放
5、 的特点，应反复多次检查。,（5）有些寄生虫的离体阶段具有感染性，实验室检查时应防止实验室感染。,（6）血清学检查应考虑交叉反应、假阳性和假阴性的存在，仅有辅助诊断意义。,2、注意事项 (Note),寄生虫病实验室诊断 Laboratory diagnosis of parasitic diseases,病原学诊断免疫学诊断分子生物学诊断,1.粪便检查* 2.血液检查* 3.活体组织检查 4.其他排泄物或抽取液的检查 5.动物接种,病原学诊断,病原学诊断 粪便检查,原虫的滋养体多种蠕虫卵,生理盐水直接涂片法,1.直接涂片法,原虫的包囊,生理盐水直接涂片法 碘液直接涂片法,1.直接涂片法,病原学
6、诊断 粪便检查,直接涂片法简便易行，但若用粪量过少，则存在一定的漏检率。,1.直接涂片法,病原学诊断 粪便检查,重力沉淀法,适合于比重大于水的原虫包囊及各种蠕虫卵。,重力沉淀法,1.直接涂片法 2.浓集法,病原学诊断 粪便检查,1.直接涂片法 2.浓集法,病原学诊断 粪便检查,浮聚法,饱和盐水浮聚法 硫酸锌浮聚法,饱和盐水浮聚法,病原学诊断 粪便检查,1.直接涂片法 2.浓集法,钩虫粪类圆线虫毛圆线虫,钩蚴培养法,1.直接涂片法 2.改良加藤氏法 3.浓集法 4.线虫幼虫培养法,病原学诊断 粪便检查,1.直接涂片法 2.改良加藤氏法 3.浓集法 4.线虫幼虫培养法 5.毛蚴孵化法,病原学诊断
7、粪便检查,棉拭子法透明胶纸法,1.直接涂片法 2.改良加藤氏法 3.浓集法 4.线虫幼虫培养法 5.毛蚴孵化法 6.肛门拭子法,病原学诊断 粪便检查,病原学诊断 粪便检查,病原学诊断 血液检查,疟原虫 丝虫 利什曼原虫 弓形虫,病原学诊断 血液检查,1.薄血膜法(查疟原虫）,采血,推片,画线,染色,镜检,病原学诊断 血液检查,2.厚血膜法(查疟原虫和微丝蚴）,采血,涂片,溶血,染色,镜检,1.薄血膜法(查疟原虫）,病原学诊断 血液检查,注意事项： 1.玻片的洁净程度对涂制血膜的质量有直接关系，因此要求严格按规程清洗玻片。,2. 采血时间：疟疾现症病人可随时取血，一般以寒热发作时或发作后数小时取
8、血为好；夜现周期型淋巴丝虫感染调查则应在212时之间采 血。,病原学诊断 组织活检, 皮肤,皮肤利什曼病皮肤阿米巴病猪囊尾蚴病肺吸虫病棘腭口线虫病盘尾丝虫病疥疮,病原学诊断 组织活检, 皮肤 骨髓,杜氏利什曼原虫,病原学诊断 组织活检, 皮肤 骨髓 淋巴结,内脏利什曼病锥虫病弓形虫病 丝虫病,病原学诊断 组织活检, 皮肤 骨髓 淋巴结 肌肉,旋毛虫病囊虫病裂头蚴病肺吸虫病,病原学诊断 组织活检, 皮肤 骨髓 淋巴结 肌肉 直肠,溶组织内阿米巴血吸虫卵,病原学诊断 组织活检, 皮肤 骨髓 淋巴结 肌肉 直肠 肺,卫氏并殖吸虫成虫/虫卵溶组织内阿米巴卡氏肺孢子虫,痰液,病原学诊断 其他标本检查,卫
9、氏并殖吸虫蛔虫幼虫钩虫幼虫粪类圆线虫幼虫卡氏肺孢子虫溶组织内阿米巴滋养体,痰液 尿液,埃及血吸虫卵肾膨结线虫卵阴道毛滴虫艾氏小杆线虫成虫,病原学诊断 其他标本检查,痰液 尿液 阴道分泌物,阴道毛滴虫溶组织内阿米巴滋养体,病原学诊断 其他标本检查,痰液 尿液 阴道分泌物 十二指肠抽取液,蓝氏贾第鞭毛虫华支睾吸虫卵肝片形吸虫卵布氏姜片虫卵溶组织内阿米巴大滋养体,病原学诊断 其他标本检查,痰液 尿液 阴道分泌物 十二指肠抽取液 鞘膜积液,班氏微丝蚴,病原学诊断 其他标本检查,痰液 尿液 阴道分泌物 十二指肠抽取液 鞘膜积液 脑脊液,弓形虫耐格里属阿米巴广州圆线虫,病原学诊断 其他标本检查,病原学诊断
10、 动物接种,在怀疑弓形虫感染时，可采取血液、骨髓、淋巴结、脑脊液沉淀的涂片染色镜检，但阳性机会不大，因此常将上述材料接种小白鼠以分离病原体。,1.皮内试验(IDT) 2.间接血凝试验(IHA) 3.免疫荧光法（IF） 4.免疫酶染色试验（IEST） 5.酶联免疫吸附试验（ELISA） 6.胶体金免疫测定技术（CGIA）,免疫学诊断,免疫学诊断,酶联免疫吸附试验（ELISA）,1) 抗原包被 2) 加样（一抗） 3) 洗涤 4) 加酶标抗体（二抗） 5) 洗涤 6) 加底物显色 7) 观察结果,免疫学诊断,胶体金免疫测定技术（CGIA）,Dipstick,+ ,C T,免疫学诊断,存在的问题1.
11、 不同寄生虫之间的交叉反应，2. 难以区分现症感染与既往感染。,解决办法1. 单一组分抗原，2. 检测短程抗体。,分子生物学诊断,1.核酸分子杂交技术,*,虫体 DNA模板,标记的 DNA 探针,分子生物学诊断,2. PCR技术,分子生物学诊断,2. PCR技术,50l反应体系 10PCR缓冲液 5l P1 0.2mol/L P2 0.2mol/L dNTP 200mol/L Taq酶 2U 样本DNA 0.1g H2O 补足50l,分子生物学诊断,2. PCR技术,94 4 94 1 56 1 72 1 72 8,35 Cycles,分子生物学诊断,2. PCR技术,PCR技术具有高度的敏感
12、性，有严格的操作要求，若操作不当，很容易出现假阳性和假阴性，因此，在试验中应严格遵守操作规程，并同时设立阳性、阴性和空白对照。,湖 南 63794 76.705 4652.9,湖 南 63794 76.705 4652.9,感染虫种数 感染人数 平均感染率（%） 构成比（%）1 499871 33.8267 56.67092 256684 17.3700 29.10053 96225 7.3009 10.90914 24109 1.6315 2.73325 4372 0.2959 0.49576 686 0.0464 0.07787 95 0.0064 0.01088 16 0.0011 0.
13、00189 2 0.0001 0.0002,单一与多虫感染的感染率及构成比,（二）寄生虫病的流行特点,1、地方性：,a. 中间宿主与媒介昆虫的分布,（二）寄生虫病的流行特点,1、地方性：,a. 中间宿主与媒介昆虫的分布,b. 生活习惯和生产方式 ( 血吸虫的感染方式),（二）寄生虫病的流行特点,1、地方性：,a. 中间宿主与媒介昆虫的分布,b. 生活习惯和生产方式 ( 血吸虫的感染方式),c. 气候,2、季节性：,a. 媒介昆虫的季节性所致,b. 人类生产、生活活动形成感染季节性,（二）寄生虫病的流行特点,2、季节性：,a. 媒介昆虫的季节性所致,b. 人类生产、生活活动形成感染季节性,c.
14、寄生虫在外界发育及活动的季节性,（二）寄生虫病的流行特点,3、自然疫源性,a. 基本概念： 有些人体寄生虫无明显宿主特异性， 可寄生于多种动物，这些寄生虫可在 无人参与的情况下在动物之间相互传播。这种性状称自然疫源性。,b. 人兽共患寄生虫病(parasitic zoonoses): 在脊椎动物与人之间自 然传播的寄生虫病。,c. 意义：(a) 反映寄生虫在自然界的演化过程； (b) 反映寄生虫病在流行病学和防治中的复杂性；,（二）寄生虫病的流行特点,（三）流行三环节,1、传 染 源 体内有寄生虫生存、繁殖，并能将 寄生虫排出体外的人和动物。,2、传播途径 寄生虫由传染源排出以后，经过一定的方
15、式再侵入其他易感者所经过 的途径。,经口感染,蛔虫、蛲虫、溶组织内阿米巴、肺吸虫、 肝吸虫、带绦虫等,感染方式小结,经 口 感 染,自 体 外 感 染,自 体 内 感 染,输 血 感 染,经 胎 盘 感 染,直 接 接 触 传 播,由 节肢 动物 传 播,经皮肤、粘膜感染,蛔虫、蛲虫、溶组织内阿米巴、肺吸虫、肝吸虫、带绦虫等,钩虫、血吸虫、丝虫等,丝虫、疟原虫、利氏曼原虫,阴道毛滴虫、疥螨,弓形虫,疟原虫,猪带绦虫,蛲虫,感染方式小结,（三）流行三环节,1、传 染 源 体内有寄生虫生存、繁殖，并能将 寄生虫排出体外的人和动物。,2、传播途径 寄生虫由传染源排出以后，经过一定的方式再侵入其他易感
16、者所经过 的途径。,3、易感人群 对寄生虫有较高感受性的人群。,（四）影响寄生虫病流行的因素,1、自然因素 温度、湿度、雨量、植被、地理环 境等。,各省（区、市）总感染率分级 标化感染率（%） 省（区、市） 17.029.9 黑龙江、内蒙古 北 30.039.9 吉林、宁夏、北京、天津、山西 40.049.9 河北、新疆、甘肃、青海、陕西、上海 50.059.9 湖北、西藏、山东、辽宁 60.069.9 江苏、河南、安徽 70.079.9 广东、云南、湖南、江西 80.089.9 浙江、贵州、四川、福建、广西 90.0 海南 南,（四）影响寄生虫病流行的因素,1、自然因素 温度、湿度、雨量、植
17、被、地理环 境等。,3、社会因素 国家政策、经济状况、科学水平、文化教育、医疗卫生、防疫保健、生产方式。,2、生物因素 中间宿主、媒介昆虫。,原则：切断寄生虫病流行的三环节,（一）消 灭 传 染 源 普查、普治病人、带虫者以及 保虫宿主,（二）切断传播途径 加强粪便和水源管理，注意环境和个人卫生，控制和消灭传 播媒介及中间宿主,（三）保 护 易 感 者 加强个体防护，提高自我保护意识,患者周，男，25岁，某部战士，四川五胜县人，因粪便毛蚴孵化阳性而入院。 患者1965年入伍，驻四川省西昌专区某地，该地为血吸虫病流行区，入伍后，曾参加水稻种植，常与疫水接触。1967年间因经常有间歇性腹泻，怀疑患
18、血吸虫病，在本单位先后作毛蚴孵化检查八次，均为阴性。后又发现肝、脾肿大。1970年8月曾在部队医院割治扁桃腺，住院期间曾作过血吸虫皮内试验，呈阳性反应，但因乙状结肠组织镜检未见虫卵而未能确诊。出院回原单位后，于一次腹泻后在卫生队又做粪便毛蚴孵化检查，结果孵出毛蚴，才确诊为血吸虫病。,体格检查：肝可触及，有压痛。脾于肋缘下约 2cm处触及，中等硬度，无压痛。余无异常。 化验结果：白细胞总数7400，嗜酸性粒细胞10%，肝功能正常。 治疗经过：服用血防-846（20%花生油制剂），每天2.7克，共7天，总剂量为18.9克， 治毕出院。,讨论题本病例病史中，哪些项目可作为诊断的依据或参考？现在我们还可以增做哪些试验以帮助诊断，怎样知道患者是否治愈？驻在血吸虫病流行区的部队，应采取哪些措施保障官兵不感染血吸虫。,谢 谢！,
