1、动物实验基本训练 病理生理学 阎春玲 人体机能学实验室,一、目的要求,了解病理生理学实验课的特点掌握实验的基础知识和基本技能掌握各种实验器械的使用方法,二、注意事项,1. 遵守实验室守则，不准迟到早退，不准大声喧哗 2. 穿隔离衣，不准穿拖鞋 3. 分组实验，选出小组长 4. 实验结束后处死动物，打扫卫生,（一）实验动物的抓取固定方法,1. 小鼠抓取固定方法 2. 大鼠抓取固定方法 3. 豚鼠抓取固定方法 4. 蛙类抓取固定方法 5. 兔的抓取固定方法,三、基本技能,兔的抓取固定方法,1. 抓取：右手抓住兔颈部的毛皮提起，然后左手托其臀部，让其体重重量的大部分集中在左手上。 2. 固定：家兔的
2、固定分为盒式、台式和马蹄形三种。盒式固定：适用于兔耳采血、耳血管注射等情况；台式固定：做血压测量、呼吸和手术；马蹄形：用马蹄形固定器可使兔取用背卧位和腹卧位,（二） 实验动物编号标记方法,常用的标记法有染色、耳缘剪孔、烙印、号牌等方法。1. 颜料涂染 这种标记方法在实验室最常使用，也很方便。 编号的原则：先左后右，从上到下。,2. 烙印法,用刺数钳在动物耳上刺上号码，然后用棉签蘸着溶在酒精中的黑墨在刺号上加以涂抹，烙印前最好对烙印部位预先用酒精消毒。3. 号牌法 用金属制的牌号固定于实验动物的耳上，大动物可系于颈上。 对猴、狗、猫等大动物有时可不做特别标记，只记录它们的外表和毛色即可。,（三）
3、 实验动物被毛的去除方法,剪毛：固定动物后，用粗剪刀剪去所需部位的被毛。 脱毛：脱毛系指用化学药品脱去动物的被毛，适用于无菌手术野的准备以及观察动物局部皮肤血液循环和病理变化。 拔毛：兔耳缘静脉注射或取血时以及给大、小白鼠作尾静脉注射时，需用拇指、食指将局部被毛拔去，以利操作。,（四） 实验动物给药途径和方法,1. 皮下注射 2. 皮内注射 3. 肌肉注射 4. 腹腔注射 5. 静脉注射 6. 经口给药 7. 其它途径：皮肤、脑内、直肠内、关节腔内,（五）实验动物的麻醉,1. 常用的麻醉剂 挥发性麻醉剂非挥发性麻醉剂：20%氨基甲酸乙酯（乌拉坦） 中药麻醉剂。 2. 动物的麻醉方法 全身麻醉
4、（1）吸入法（2）腹腔和静脉给药麻醉法 局部麻醉 麻醉注意事项 （1）静脉注射必须缓慢（2）麻醉时需注意保温,兔采血法1、耳静脉采血 2、心脏取血 3、颈动-静脉取血 4、股动-静脉取血,（六）实验动物采血方法,（七）急性动物实验常用的手术方法,急性动物实验中常以血压、心率、呼吸等为指标，以静脉注射、放血等为实验方法。,1. 肌肉、神经和血管的分离 （1） 肌肉组织: 顺肌纤维方向作钝性分离。肌肉组织内含有小血管，若需切断，应事先用止血钳作双重钳夹，结扎后才可剪断。 （2） 神经和血管: 玻璃分针顺着血管或神经走向分。分离手术完成后用浸有温热生理盐水纱布盖在切口上。,（七）急性动物实验常用手术
5、方法,2. 颈部手术与插管 将实验动物麻醉，仰卧固定，剪去颈部的毛；用手术刀沿颈部正中线在甲状软骨与胸骨之间作一切口（ 57 厘米）（1）气管插管术 将左右胸骨舌骨肌向两侧拉开，穿棉线备用。在甲状软骨下 0.51cm 将气管横向剪开；再向头端作一小纵切口，呈倒“ T ”形；将气管套管向心端插入气管腔内，结扎并将结扎线固定于“ Y ”形气管插管分叉处。,（七）急性动物实验常用手术方法,（2）颈总动脉插管术 测量动脉血压或放血。呈红色较大的血管，手触之有搏动感。沿血管走行方向分离出颈总动脉，长约1.52.0 cm ，在其下穿两根丝线备用。在颈总动脉的远心端结扎，近心端用动脉夹夹住动脉，用眼科剪将动
6、脉剪一与血管呈 45 角的向心切口，将动脉套管由切口向心脏方向插入动脉内，结扎、打结固定、打开动脉夹。,（七）急性动物实验常用手术方法,分离颈总动脉,（3）颈浅静脉插管术 用于注射、取血、输液及中心静脉压测量。 颈浅静脉位置浅，位于颈部皮下。颈部正中切口，在胸锁乳突肌外缘即可见呈暗紫色的粗大血管颈浅静脉。用止血钳沿血管走向将静脉周围的组织轻轻钝性分离，穿两根细丝线备用。将导管或静脉套管插入（与颈总动脉相似）。如测量中心静脉压，插入导管 5cm ，此时导管口在上腔静脉近右心房入口处。,（七）急性动物实验常用手术方法,（八）实验动物的处死方法,1. 蛙类 金属探针插入枕骨大孔，破坏脑脊椎。 2.
7、大鼠和小鼠 脊椎脱臼法；断头法；急性大失血法；化学致死法。 3. 狗、猫、兔、豚鼠空气栓塞法；急性失血法； 破坏延脑法；开放性气胸法； 化学药物致死法。,（一）常用的手术器械及使用方法 1. 手术刀 较大切口可采用拇指与中指、无名指夹住刀柄两侧，食指压于刀背上；小切口或作细微的切割，采用执钢笔式的执刀法。手术后将刀片拆下洗擦干净单独保存。,四、实验器械的使用方法,2. 剪刀粗剪刀：皮、毛、骨手术剪：肌肉、组织器官、线、纱布眼科剪：神经、血管3. 镊子 无齿镊（解剖镊）：神经、血管、肠壁或其它脏器。有齿镊（外科镊）：夹持较大或较厚的组织，如皮肤、皮下组织等眼科镊：夹持较小的组织，如神经、血管,四
8、、实验器械的使用方法,4. 止血钳（血管钳）：有直、弯、带齿、蚊式钳。用于分离组织、夹住出血的血管。浅部止血直钳，深部弯钳，精细手术或细小的出血点蚊式钳。5. 持针器:夹持缝针进行缝合。夹在针的中 1/3 和后 1/3 交界处为宜。6. 缝针: 直针和弯针（圆形或三角形）圆针：肌肉、腹膜、胃肠道弯三角针：皮肤、坚硬组织缝合。,四、实验器械的使用方法,7. 动脉夹: 夹闭动脉8. 其它: 手术灯、注射器、烧杯、动脉套管、静脉插管、丝线等。,四、实验器械的使用方法,（一）常用的手术器械及使用方法（二）手术器械的维护方法：必须按各种手术器械的用途使用，如手术剪仅用来剪组织或皮肤，切勿用来剪骨或其它物品。手术后必须将各种器械洗净，用小刷子将齿间血块清除，然后用干布将其擦干。,四、实验器械的使用方法,1. 题目 2. 实验目的 3. 实验原理 4. 实验动物及主要实验用品 5. 实验步骤（简要） 6. 实验结果 7. 实验结果分析 8. 结论,五、撰写实验报告,思考问题？,家兔耳缘静脉注射需要注意哪些方面？ 动脉和静脉插管再实验中的用途主要有哪些?,Thank you,
