1、实验三 白喉杆菌、厌氧菌、分枝杆菌 病毒及其它微生物,HA - hemagglutinin,（血凝素）,病毒的血凝试验,血凝素（hemagglutinin HA）：由病毒基因编码的糖蛋白刺突。与病毒吸附和传入宿主细胞有关。HA能与人或其它动物多种红细胞表面N乙酰神经氨酸酶受体结合引起红细胞凝集。 滴定病毒的血凝效价，采用一定的病毒量，通常采用4个血凝单位。,血凝试验（血凝效价的滴定),将有机玻璃板孔从19进行编号，从第1孔起至第9孔，按下表加。 将病毒液按下表进行稀释。 自第9孔开始反方向向前每孔加入0.5%鸡红血球0.5ml，摇匀后放置室温45分钟,血凝试验结果判定,结果判定：薄层（凝集）
2、圆点（不凝集） 凝集特别显著：“”凝集现象次之：“”凝集清楚可见：“”稍显凝集者：“”血凝单位：呈“”凝集时的最高稀释度。此时的稀释度即为1个血凝单位。,原理 病毒引起的血凝现象能被相应的抗血凝素抗体所抑制，称血凝抑制。利用血凝素特异性抗体与病毒表面相应的HA相互作用，使病毒血凝现象抑制的试验称血凝抑制试验。 4个血凝单位的病毒液,血凝抑制试验,血凝抑制试验结果判定,测定孔：圆点 （不凝集） 薄层（凝集） 血清对照孔： 圆点（不凝集） 病毒对照孔：薄层（凝集） RBC对照孔：圆点（不凝集） 血凝抑制试验效价：呈完全血凝抑制的最高血清稀释度。,示教：破伤风梭菌及产气荚膜梭菌的培养特性的培 养 特
3、 性,示教：结核分枝杆菌的培养特性,专性需氧，最适37 ，营养要求高，生长缓慢，18h分裂一代。罗氏(Lowenstein-Jensen)培养基含蛋黄、甘油、马铃薯、无机盐、孔雀绿，26周可见菌落生长 菌落特点：菜花、颗粒或结节状菌落，乳白色或黄色，不透明。,抗酸染色法(acid-fast stain) ：以5石炭酸复红染色，再用3盐酸酒精脱色，然后用美蓝复染，则分枝杆菌呈红色(+)，其他细菌和背景物质为蓝色(-)。 实验过程：取痰液 涂片（略厚）干燥固定 石炭酸复红染色810分钟后用3%的盐酸酒精脱色约12分钟，脱色时轻摇玻片，直到涂片颜色脱去为止 水洗后，用碱性美蓝复染1分钟水洗，印干 镜检,结核分枝杆菌抗酸染色法示教片,Fontana镀银染色：镜下可见棕褐色两端有钩的螺旋体，菌体整齐，粗细均匀，呈“C”或“S”型，螺旋不明显。,钩端螺旋体Fontana镀银染色法示教片,内基小体示教片,黄曲霉,示教：真菌的培养特性,多细胞真菌：观察气生菌丝，营养菌丝，表面隆起，浅沟及菌落基底颜色。,单细胞真菌：酵母型菌落新型隐球菌：菌落圆形，较大，湿润呈蜡状，乳白色类酵母型菌落白假丝酵母菌：菌落圆形，较大，白色菌落底层有假菌丝,
