1、第五章 病料的采集、保存与送检,第五章 病料的采集、保存与送检,病理组织学检验材料的采集、固定 细菌学检验材料的采集、保存 病毒学检验材料的采集、保存 毒物检验材料的采集、保存 各种病理检查病料的送检,一、概述,(一)“病料”的涵义 狭义:用于疾病诊断的材料 广义:动物科学、科研、实验等多方面的材料。(动物生理、组织胚胎、药物试验、疾病模型的建立与复制、动物营养研究等),(二)正确采集、保存与送检病料的重要性,疾病诊断结果与正确正确采集、保存与送检病料的关系科研结果与实验材料的正确采集、保存与送检的关系,(三)病料的采集、保存与送检三者之间的关系,正确采集病料是保证正确结果的关键正确保存送检病
2、料是获得正确结果的保证三者均影响结果的正确性,(四)动物尸检技术在科研教学中的重要作用,二、用于组织学检查病料的采集、保存与送检,(一)病料的采集(取材),取材应目的明确有病变的组织必取 有目标时重点取 目标不明确,全面取,取材时间应尽早:夏季不超过6小时,冬季不超过24小时,立即固定 取材部位典型(含病变、过渡、正常组织)。组织结构完整(肾:被膜、皮质、髓质;肠管:外膜、肌层、粘膜) 取材大小及数量:以1.5-2cm1.5-2cm0.3-0.5cm为好,特殊组织取材:柔软易变形组织:肠系膜、神经干 扩张变薄的囊腔器官:肠、膀胱、胆囊等 体积微小的器官:大、小鼠的垂体、视神经 含气易漂浮的组织
3、:肺脏 液体状病料:血液、脓汁、渗出液(浓缩、涂片) 防人为病变,取材用具要快,动作要轻,忌挤压,(二)病料的保存(固定),固定的作用 固定液的选择 固定的时间 固定容器及固定液的量 固定温度,常用固定液的配制举例10福尔马林溶液:主要用于脂肪、神经、及糖原的保存 酒精:80-90为好,具有硬化、固定、脱水作用 A.F液:无水酒精或95酒精90ml,40甲醛10ml。具有固定兼脱水作用,直接进入95酒精,Bouin液:苦味酸饱和水溶液75ml,40甲醛水溶液25ml,冰醋酸5ml Caroys液:无水酒精60ml,冰醋酸10ml,氯仿30ml。适于糖原及尼氏小体固定,显示DNA和RNA效果很好
4、。,(三)病料的送检,及时: 新鲜病料:4小时内能运到 已固定病料:密封,防震措施 附送检单及说明 专人送检,三、用于微生物检查的材料的采集、保存与送检(细菌学、病毒学),微生物检查材料的特点:无菌、无污染,(一)病料的采集(取材),实质脏器的取材:烧烙法灭菌 液体病料的取材(血液、胆汁、渗出物、脓汁等,烧烙包膜表面,灭菌注射器吸取,涂片! 全血:抗凝血(无菌采取静脉血) 抗凝剂: 4枸櫞酸钠 0.1ml抗凝1ml血 20枸櫞酸钠或是10EDTANa,2-3滴抗凝5ml血液 肝素:1-2mg抗凝1ml血液,多用于病毒检查,血清:自然凝固析出或是离心处理(快速) 肠内容物:烧烙表面,吸出内容物
5、皮肤、毛及皮屑:刀刮至真皮层,收集皮屑 脑、脊髓:常作病毒分离培养检查,(二)保存,细菌学检查材料的保存 液体材料:容器口密封 组织块:A:饱和盐水B:30甘油缓冲液 各种涂片、触片、抹片等,自然干燥较长时间保存,根据不同要求,不同温度冷藏。,病毒学检查材料的保存 实质脏器(组织块) 甘油缓冲液 鸡蛋生理盐水 液体材料同细菌的保存方法冷藏:病毒分离材料4只能保存数小时,故长期保存应在-70 保存,四、用于毒物分析材料的收集、保存与送检,中毒的诊断临床症状尸检初步诊断;须确诊时,需进行毒物化验,分析 毒物分析结果与材料采集关系密切 样品量少(微量):不易检出 易挥发:结果不准或是无毒 容器不净:
6、污染,误判,(一)样品采集,总原则:采含毒量多而不易检出的材料常采集:呕吐、排泄物、胃肠内容物、血液、粪尿、肾、肝、脑、剩余食料,饮水 样品种类及量(见附表)量要足够,多处取材,最好分开,也可将胃肠内容物和心、肝、脑等实质脏器混装,附表:常见毒物中毒的样品采取表,样品采集的量和包装法,(二)保存,保存容器要洁净,无化学物污染,忌用金属制品,以玻璃、陶瓷器皿为好 干物质可用干净的塑料袋、纸袋(牛皮纸) 材料中不可用防腐剂,非用不可时可用酒精,同时送对照 所存材料要标明名称,取材时间,死亡时间,送检要求等,(三)送检,封装(严密) 尽快:防腐败变质(组织),挥发破坏,最好在冷藏条件下 提供中毒情况 饲养管理及使疫情况:饲料、饮水、霉败否、群饲或单饲 周围环境:社会情况(投毒)、农药使用情况、化工厂、废水等 发病及死亡情况:时间、头数、症状、死亡剖检变化,思考题,1、动物材料送检的意义? 2、根据动物发病情况,如何取材送检?,思考题,1、动物材料送检的意义? 2、根据动物发病情况,如何取材送检?,思考题,1、动物材料送检的意义? 2、根据动物发病情况,如何取材送检?,