1、,口蹄疫的流行及防控,主要内容： 一、口蹄疫的基本情况 二、口蹄疫的流行状况 三、口蹄疫流行现状的原因 四、口蹄疫的防控对策 五、口蹄疫的疫苗及使用,一、口蹄疫的基本情况,（一）口蹄疫病毒 1.口蹄疫病毒的基本情况 口蹄疫病毒属于微RNA病毒科口蹄疫病毒属的成员。 口蹄疫病毒粒子直径为2325nm，无囊膜。电镜观察口蹄疫病毒的细胞培养液，有4种粒子： （1）完整病毒，直径为232nm，沉降系数为146S。 （2）不含RNA的空衣壳，直径为21nm，沉降系数为75S。 （3）衣壳蛋白亚单位，其直径为7nm，沉降系数为12S14S。 （4）病毒感染相关抗原(VIA抗原)，沉降系数为4.5S。,口蹄
2、疫病毒形态：无囊膜，正六边形粒子,现已知有7个血清型，即O、A、C、SAT、SAT、SAT 及Asia。每一型内有亚型，亚型内又有众多抗原差异显著的毒株。 根据7个血清型的同源性将其分为两群，即O、A、C和Asia型为一群，SATl 、SAT2、SAT3为一群，两群之间的血清型同源性仅为25%40%，群内同源性可达60%70 %。 各血清型之间没有交叉免疫力。同一型病毒株之间，抗原性上也有不同程度的差异。O、A、C型FMDV分布世界各地；SATl、SAT2、SAT3主要分布在非洲，Asia型主要分布在亚洲。,2.口蹄疫病毒的型,应用血清学方法先后鉴定出许多亚型，1977年世界口蹄疫参考实验室公
3、布的亚型共有65个(编号)，实际只鉴定出62个亚型，其中A型有32个亚型(缺A6，A9)；O型有11个亚型(缺O4)；C型有5个亚型；Asia1型有3个亚型；SAT1型有7个亚型(缺SAT1-1)；SAT2型有3个亚型；SAT3型有4个亚型。 但随着口蹄疫病毒血清亚型的增多，20世纪80年代后期已不再确定口蹄疫新分离病毒株的亚型归属。,3.口蹄疫病毒的基因型 20世纪90年代以来，用PCR技术结合核酸序列测定技术鉴定口蹄疫病毒分离株之间的亲缘关系。Knowles和Samuel(1995)认为口蹄疫病毒核苷酸序列的测定和系统发育分析是更准确、也是更适用的研究不同口蹄疫病毒分离株特性的方法。 世界
4、口蹄疫参考实验室收集整理世界各地测定的口蹄疫病毒7个血清型的近1500个病毒株的VP1基因序列，完成了系统发育分析，绘制了系统发育树。图为口蹄疫病毒7个血清型代表病毒株的系统发育树。,口蹄疫病毒7个血清型代表毒株的系统发育树,目前，划分同一血清型的口蹄疫病毒株普遍采用基因型，将同源性大于85的病毒株划分为同一基因型，大于90的病毒株划分为同一基因亚型，大于95的病毒株划为遗传关系高度密切的同一基因亚型。 对于新出现的口蹄疫病毒株，通过VP1基因系统进化比较分析，可以快速确定其所处地位，选择与之亲缘关系密切的疫苗株，生产疫苗，进行免疫预防。 应用部分或完整VP1基因核苷酸序列数据进行系统发育树分
5、析来研究口蹄疫的分子流行病学，这种方法已被OIE列为标准诊断方法。,Samuel和Knowles(2001)对OIE/FAO口蹄疫参考实验室的105个O型口蹄疫病毒进行VP1基因系统发育树分析，根据核苷酸差异大于85%分为不同基因型的标准，将试验的105个O型口蹄疫病毒株分为8个基因型，以拓扑型 (Topotype)命名，分别为 欧洲-南美型(Europe-South America，Euro-SA)， 中东-南亚型(Middle East-South Asia，ME-SA)， 东南亚型(South-East Asia，SEA)， 中国-东鞑靼型(Cathay and east Tartary
6、，简称Cathay)， 西非型(West Africa，WA)， 东非型 (East Africa，EA)， 印尼-1型(Indonesia-1，ISA-1) 印尼-2型(Indonesia-2，ISA-2)。,O型口蹄疫病毒分离株根据VP1基因比较分为8个基因拓扑型的系统发育树,亚洲东南亚地区A型流行毒,全世界A型流行毒的区域分布特征,南亚、中东、中亚 地区的A型流行毒,4.病毒变异 口蹄疫病毒非常容易发生变异。口蹄疫病毒的毒力、抗原性均易封锁变异。不断出现新的抗原性变异的毒株，使已有疫苗的免疫效果不好，而导致口蹄疫出现新的流行。,5.口蹄疫病毒的抵抗力 FMDV对外界环境的抵抗力较强，耐干
7、燥。含毒组织和污染的饲料、饲草、皮毛及土壤等可保持传染性达数周甚至数月之久。 病毒对酸和碱十分敏感。 病毒对热敏感，水疱液中的病毒在60经515分钟可灭活，80100很快死亡。鲜奶中的病毒在37生存12小时，18生存6天，酸奶中的病毒迅速死亡。,口蹄疫病毒在不同条件下的结构变化,A：完整的FMDV粒子 B：FMDV粒子结晶 C：pH6,10min或温度高，不完全裂解的病毒粒子 D：pH5,20min或温度高，时间长，完全裂解的病毒粒子成份; 衣壳裂解为12S。,（二）口蹄疫的流行特点 1.易感动物 口蹄疫主要感染偶蹄兽。牛、羊、猪、驼、野生偶蹄兽。幼龄动物较成年动物易感性高。 2.传染源 病畜
8、和带毒动物（包括潜伏期、恢复期和免疫带毒）。 3.传播途径 通过消化道、呼吸道以及损伤与未损伤的皮肤传播。,4.口蹄疫的流行病学特征 口蹄疫可感染多种动物（牛、羊、猪、驼、鹿等），呈现多种动物相互传染，共同发生。 口蹄疫的传染性极强，流行迅速。 口蹄疫多呈现大流行的方式。 口蹄疫的传播方式有扩散式和跳跃式。 本病的发生没有严格的季节性，但其流行却有明显的季节规律。一般冬、春季较易发生大流行，夏季减缓或平息。 口蹄疫的流行具有周期性，35年流行一次。,（三）口蹄疫的临床特征 体温升高 口腔黏膜、蹄部、乳房皮肤出现水疱、溃烂 幼畜突然死亡（犊牛、羔羊、仔猪）,口蹄疫：病牛唾液分泌增加，流涎,犊牛感
9、染口蹄疫死亡（心肌炎）,口蹄疫：病牛口腔、舌粘膜出现糜烂溃疡,口蹄疫：病牛舌上水疱破溃，形成烂斑,口蹄疫：病牛蹄叉的水疱破溃，形成糜烂,口蹄疫：病牛蹄踵的水疱破溃，形成糜烂,口蹄疫病牛乳头病变,口蹄疫：病牛乳头水疱破裂后，形成溃疡,（四）口蹄疫的诊断 临诊诊断 根据病的急性经过，流行性发生，主要侵害偶蹄兽，一般为良性转归以及特征性的临诊症状可作出初步诊断。确诊须进行实验室检查。 实验室诊断 病毒分离鉴定 取病畜水疱皮或水疱液接种乳鼠、BHK-21等细胞进行病毒分离鉴定。做补体结合试验、反向间接血凝试验或酶联免疫吸附试验(ELISA)进行病毒鉴定。,病毒抗原检测 中和试验 可用于型和亚型鉴定。
10、补体结合试验 可进行定型鉴定。 反向间接血凝试验 可鉴定病毒主型。 间接夹心酶联免疫吸附试验 RT-PCR 扩增口蹄疫病毒特异性核酸序列。具有快速、灵敏、特异性强的特点。 PCR方法结合VP1基因序列测定可进行流行毒株的基因亚型测定,血清学试验 间接血凝试验 采取患病动物或康复动物血清，应用间接血凝试验检测口蹄疫病毒的特异性抗体进行诊断。 免疫琼脂扩散试验 采取患病动物或康复动物血清，应用VIA抗原作琼脂免疫扩散试验进行诊断。 中和试验 酶联免疫吸附试验(ELISA) 液相阻断ELISA(LAB- ELISA)试验 非结构蛋白ELISA(3ABC-ELISA) 试验 能够鉴别免疫动物和自然感染
11、动物。,二、口蹄疫的流行状况,近十几年以来，全世界口蹄疫的流行态势发生了一些新的变化。 一方面未消灭口蹄疫的国家和地区，口蹄疫继续流行，另一方面已控制和消灭口蹄疫的国家和地区，也出现口蹄疫的发生和流行。 从FAO/OIE口蹄疫参考实验室报告的资料来看，口蹄疫在世界范围内的流行还是非常严重的，7个型的口蹄疫均有流行，其中以O、A、和Asia1型的流行较为严重。,被OIE认定的未接种口蹄疫疫苗而没有口蹄疫的国家,口蹄疫2009世界流行图,口蹄疫2012世界流行图,口蹄疫2013世界流行图,口蹄疫2005-2013世界流行图,2012-11-24， 辽宁省大连市O型口蹄疫疫情 2012-12-17，
12、江苏省常州市O型口蹄疫疫情 2013-01-07，四川省广元市O型口蹄疫疫情 2013-02-27，广东省茂名市，西藏拉萨市口蹄疫疫情 2013-03-18，青海省西宁市A型口蹄疫疫情 2013-04-16，新疆维吾尔自治区洛浦县A型口蹄疫疫情 2013-04-22，西藏日喀则市A型口蹄疫疫情 2013-05-02，西藏拉萨市A型口蹄疫疫情 2013-05-07，新疆阿克苏地区A型口蹄疫疫情 2013-05-10，西藏山南地区A型口蹄疫疫情 2013-05-15，新疆乌鲁木齐市乌鲁木齐县A型口蹄疫疫情 2013-05-20，江苏省常州市O型口蹄疫疫情 2013-05-24，西藏林芝地区林芝县A
13、型口蹄疫疫情 2013-05-30，西藏拉萨市当雄县A型口蹄疫疫情 2013-06-09，云南省迪庆州香格里拉县A型口蹄疫疫情 2013-06-13，西藏日喀则地区岗巴县O型口蹄疫疫情,2012.11-2013.6.13我国公布的口蹄疫疫情（16起疫情，10/16为A型）,1953-1954，O型口蹄疫（Cathay,中国型）。 1963-1964，O型口蹄疫（Cathay,中国型）。 1973-1975，O型口蹄疫（Cathay,中国型）。 1978-1985，O型口蹄疫（Cathay,中国型）。 1993-1997，O型口蹄疫（Cathay,中国型）。 1999-2001，O型口蹄疫（WE
14、-SA-PanAsian O型，口蹄疫泛亚型毒株,Cathay,中国型）。 2003-2004，O型口蹄疫（ PanAsian O型）。 2005-2006，O型口蹄疫（Asia1型, O型）。 2009-2010，O型口蹄疫（A型, Asia1型, O型）。 2012-2013，O型口蹄疫（A型, O型）。,我国建国以来口蹄疫的流行情况,O型口蹄疫Akesu/58 China/99guangzhou/10Asia1型口蹄疫云南58谱系新疆03谱系江苏05谱系A型口蹄疫,当前我国口蹄疫流行的型及亚型,三、口蹄疫流行现状的原因,（一）口蹄疫流行现状的原因 1.对口蹄疫流行病学研究重视不够。 2.
15、过度重视疫苗免疫，忽视综合性防疫措施的实施。 3.动物移动检疫形同虚设，没有很好地控制传染源。 4.发病后不报告、不采取隔离、封锁、扑杀的严格控制措施 5.发病动物随意买卖或直接进入屠宰场。 6.基层兽医违反有关规定，对口蹄疫病畜在没有严格隔离的条件下进行治疗，导致疫病扩散。,（二）口蹄疫的复杂性 1.感染多种动物，牛、羊、猪、驼、野生动物均感染。 2.口蹄疫病毒血清型多（主型、亚型），主型间没有交叉反应，亚型间有部分交叉反应。 3.口蹄疫病毒容易变异，不断出现新的亚型。 4.口蹄疫病毒致病性强，病畜排毒量大。 5.口蹄疫病毒易造成持续性感染，带毒动物数量多、时间长。 6.口蹄疫有多种传播方式
16、和感染途径。,四、口蹄疫的防控对策,无病国家一旦暴发本病采取屠宰病畜、消灭疫源的措施；已消灭本病国家采取禁止从有病国家输入活畜或动物产品，杜绝疫源传入。 我国采取以免疫为主的综合性防疫措施防控口蹄疫。平时进行疫苗的强制免疫，发生口蹄疫后，要求迅速报告疫情，划定疫点、疫区，严格封锁，病畜及同群畜急宰，对病畜舍及污染的场所和用具等彻底消毒，对受威胁区的易感畜进行紧急预防接种，在最后一头病畜痊愈或屠宰后90天内，未出现新病例，经最后终末消毒后解除封锁。,加强检疫 无病地区禁止从有病地区输入活畜及动物产品，加强动物及其产品检疫。免疫 用与流行毒同型的疫苗进行免疫。我国目前使用的口蹄疫疫苗均为灭活疫苗，
17、牛羊用O型-Asial-A型三联口蹄疫灭活疫苗， O型-Asial-型二联口蹄疫灭活疫苗，A型口蹄疫灭活疫苗。猪用O型二价口蹄疫灭活疫苗。,疫苗免疫需注意的事项： 1.疫苗的保存、运输和使用严格按说明书进行。 2.认真进行免疫接种，保证免疫质量和免疫密度。 3.做好免疫接种的详细记录。 4.免疫接种后，注意观察动物接种疫苗后的反应，如有不良反应（过敏反应）或发病等情况，应采取适当的措施，并向有关部门报告。 5.疫苗接种后(1520天)，定期进行免疫效果监测。 6.在特定时间（冬、春季）、地点（流行地区），视情况加大免疫剂量，并进行免疫检测。以保证免疫效果。,免疫剂量对免疫效果的影响,1.幼畜在
18、免疫接种时，体内存在有母源抗体。 2.疫苗选择不当，对于口蹄疫，要注意流行毒株与使用的疫苗株是否同型，甚至是同一亚型。 3.免疫接种途径错误。 4.疫苗质量差。 5.疫苗运输、保管不当，造成疫苗失效或减效。 6.使用超过有效期的疫苗。 7.免疫接种工作不认真，接种剂量不足甚至没有接种。 8.服用抗菌药物或免疫抑制性药物。 9.免疫接种时，动物处于发病、体弱、幼龄、怀孕等特殊状况。 10.接种时畜群内已潜伏有强毒病原微生物，或由接种人员及接种工具带入强毒病原。,免疫接种失败的原因,(1)迅速诊断、上报疫情、封锁疫区 发生口蹄疫时，应迅速诊断，报告疫情，根据发病情况划定疫点、疫区，封锁疫区。 (2
19、)疫区内应采取的措施a 病畜扑杀，病死畜尸体要无害化处理(深埋、焚烧或化制)，对污染环境、用具进行严格消毒。b 暂停集市和畜禽集散活动，禁止从疫区输出易感动物及其产品和污染的饲料。c 疫区的易感动物及时进行免疫接种，建立免疫带。d 在最后一头病畜消失后（痊愈、急宰、扑杀），经一定的封锁期（3个月），再无疫情发生，进行终末消毒，解除封锁。,发病时的措施,(3)疫区外应采取的措施 a 易感动物应及时进行免疫接种，建立免疫带。b 禁止易感动物出入疫区，不饮疫区流过来的水。c 禁止从疫区购买牲畜，草料和畜产品，对解除封锁后购买的畜禽要隔离观察。,五、口蹄疫的疫苗及使用,（一）口蹄疫疫苗的种类 口蹄疫有
20、弱毒疫苗、灭活疫苗以及基因工程疫苗。 弱毒疫苗 免疫效果好，免疫期长，主要用于牛羊，弱毒疫苗有毒力反强的危险，不安全。世界各国已基本不用。 灭活疫苗 安全，免疫效果不如弱毒疫苗，免疫期短，并有一定的副作用(免疫动物出现精神沉郁，食欲下降，局部肿胀疼痛，奶牛产奶量下降，孕畜流产甚至免疫动物死亡)。 基因工程疫苗，很少应用，现在只有合成肽疫苗。,我国在1999年以前 牛羊主要使用弱毒疫苗 猪使用灭活疫苗2000年以后停用弱毒疫苗，牛、羊、猪均使用灭活疫苗,（二）我国使用口蹄疫疫苗的型 1999年以前：牛羊主要使用O型弱毒疫苗，而猪使用O型灭活疫苗。 19992005，牛、羊、猪使用O型灭活疫苗 2
21、0052009，猪使用O型灭活疫苗，牛羊使用O型、Asia1型灭活疫苗。 2009现在，猪使用O型灭活疫苗，牛羊使用O型、Asia1型灭活疫苗，奶牛使用O型、Asia1型、A型灭活疫苗。,（三）我国口蹄疫疫苗的生产方式 2008年以前使用传统转瓶培养方式生产口蹄疫疫苗。 2008年以后，开始使用悬浮培养方式生产口蹄疫疫苗。,悬浮培养方式生产口蹄疫疫苗的优点 （1）细胞含量高，污染机会少 （2）生产量大，生产批次少，批间差异小。 （3）产品质量高，且稳定可控。 （4）生产的口蹄疫病毒效价高。146S抗原含量高于转瓶培养的10倍。 （5）血清用量小，生产的疫苗杂蛋白少。 （6）生产过程全部由机器自
22、动化控制，避免了人为因素的影响。,（四）口蹄疫疫苗生产抗原的浓缩和纯化 （1）浓缩，使有效抗原达到一定含量. （2）纯化，疫苗含杂蛋白少，免疫效果好、副作用小。,FMD疫苗（属于2011政府采购的7个品种）质量与国外疫苗质量的比较,* Merial的疫苗为单相乳剂，破乳方法不同于国内疫苗的破乳。,国内FMD疫苗检测结果,VP1/VP2/VP3,国产疫苗存在的主要问题是杂蛋白含量高、146S抗原含量不足！（C为层析纯化疫苗，146S为5微克）,18,一些疫苗的SDS-PAGE分析,1.免疫动物的因素 （1）免疫动物体质较差，不能产生良好免疫力 饲养管理不良，动物群体体质较差。 幼龄动物、怀孕动物
23、、泌乳动物、发病动物等体质差，接种疫苗后不能产生良好免疫力出现免疫力不坚强，免疫期短，免疫后抗体效价低，动物群体免疫合格率低。,（五）影响口蹄疫疫苗免疫的因素,（2）服用免疫抑制性药物 在疾病治疗时使用一些免疫抑制药物（肾上腺素、地塞米松、氯霉素等），这时进行疫苗的免疫接种，会影响疫苗免疫效果。,（3）动物处于口蹄疫病毒持续性感染状态 口蹄疫病毒感染康复后可带毒1.52年或更长时间，免疫群体中，个别免疫力较差的动物接触口蹄疫病毒也会导致持续性感染。长期持续的病毒感染状态导致动物对口蹄疫病毒产生免疫耐受，这些动物在进行口蹄疫免疫时，不会产生良好的免疫反应。,口蹄疫病毒持续感染情况 持续期 山羊
24、4个月以上绵羊 1年以上黄牛 3年以上水牛 5年以上群体 20年以上,（4）母源抗体或上次免疫后体内残存抗体的影响 幼龄动物体内的母源抗体，可影响疫苗的首次免疫，上次免疫后体内残存抗体会影响疫苗的再次免疫，尤其是对弱毒疫苗影响严重。,（5）免疫抑制病的影响 猪圆环病毒2型感染 猪呼吸与繁殖综合症 牛的病毒性腹泻-粘膜病,实验表明, 被猪圆环病毒2型（PCV-2）和猪呼吸与繁殖综合症病毒（PRRS）感染的猪对口蹄疫疫苗的免疫应答受到明显抑制。我国猪群的PCV-2和PRRS感染率很高，对口蹄疫疫苗免疫必然产生很大影响。,每组15头45d仔猪,免疫抑制性疾病对口蹄疫疫苗免疫效果的影响,2.制苗病毒抗
25、原的因素 （1）口蹄疫病毒的型 口蹄疫病毒的主型、亚型。 口蹄疫病毒主型间没有交叉免疫，亚型间有部分交叉免疫。 （2）病毒变异 口蹄疫病毒非常容易发生变异。不断出现新的抗原性变异的毒株，使已有疫苗的免疫效果不好，而导致口蹄疫出现新的流行。,（3）口蹄疫病毒感染性强，有少量病毒既可感染动物。很难彻底消除环境中的病毒。 有些地区发生口蹄疫后不上报，不采取有效措施，导致口蹄疫病毒环境污染严重。 疫苗免疫很难达到所有动物长期维持高免疫水平，致使口蹄疫病毒不断感染免疫力低下的动物，而在环境中长期存在。,（1）口蹄疫病毒容易裂解，培养、繁殖口蹄疫病毒难度很高，很难保证每批次口蹄疫疫苗都具有高效价的完整病毒
26、颗粒。 （2）疫苗病毒株亚型甚至主型与流行病毒株不符合，导致免疫后仅有部分免疫效果或根本没有免疫效果。,3.疫苗的因素,口蹄疫病毒在不同条件下的结构变化,A：完整的FMDV粒子 B：FMDV粒子结晶 C：pH6,10min或温度高，不完全裂解的病毒粒子 D：pH5,20min或温度高，时间长，完全裂解的病毒粒子成份; 衣壳裂解为12S。,抗原含量与抗体效价之间的关系,（3）疫苗运输、保管不当，造成疫苗失效或减效 疫苗为生物制品，有严格的保存条件和要求，而且不同疫苗的保存条件不同，保存温度过高、过低均可导致疫苗失效。,（1）口蹄疫疫苗选择 口蹄疫流行病毒与免疫的疫苗主型、亚型不符，导致免疫效果不
27、好，甚至没有免疫效果。 （2）免疫接种工作不认真 疫苗接种人员工作不认真负责，疫苗接种量不够（有意或无意）、动物免疫接种密度不高，甚至有些动物没有接种。导致免疫效果不能保证，免疫畜群不能甚至没有产生免疫力。,4.疫苗的使用因素,抗体水平与保护关系 Asia1型口蹄疫疫苗免疫牛后21天，用同源强毒10000ID50攻击。 ELISA抗体滴度1：128时，免疫动物能耐受攻击，属于全部保护范围； ELISA抗体滴度1:16时，免疫动物不能耐受攻击，属于不保护范围； 介于两者之间ELISA抗体滴度在1：22-1：90时，免疫动物不能完全耐受攻击，属于不完全保护范围。,免疫剂量对免疫效果的影响,（3）免
28、疫程序不合理 一个地区发生的动物传染病不同，流行规律也不尽相同，需要免疫的动物疫病种类、免疫次数、免疫时间也不同，在口蹄疫病毒环境污染严重地区，免疫次数过多、过少，均可能导致出现免疫效果不好或免疫失败的发生。,免疫程序,制定依据：根据动物生活周期、母源抗体、疫苗效力 （PD50或百分保护率）、免疫持续期、疫病流行的严重程度等制定。动态免疫程序：依据具体情况，制定灵活有效的动态免疫程序。国际使用的免疫程序原则：扑灭疫情的预防区用至少3PD50/头剂的疫苗免疫，初次接种2次，而后每年接种2次；疫病流行区采用每头剂5个以上PD50的疫苗，初次接种2次后，每4个月接种1次。,5.疫苗的正确使用 （1）根据口蹄疫流行情况选择疫苗（主型、亚型）。 （2）随机抽检疫苗中的有效抗原（146S）含量。 （3）执行动态免疫程序，根据免疫检测情况（一般情况70%免疫动物抗体高于1:64，危险的时间、地点90%免疫动物抗体高于1:128 ）确定免疫时间、次数。 （4）在危险的时间（秋冬）、地点（常发地区）用高效价疫苗或加大免疫剂量。 （5）做好免疫抑制病的防控。 （6）认真执行综合性防控措施（加强检疫、隔离消毒、发病后及时上报、封锁疫区、扑杀发病及同群动物、病死畜无害化处理）,
