1、2018/10/21,1,口蹄疫防控技术探讨,金宇保灵生物药品有限公司 兽用疫苗国家工程实验室 肖柳美13307711927,2018/10/21,2,谨代表金宇保灵生物药品有限公司向各位同仁、专家表示敬意!,2018/10/21,3,主要内容,金宇保灵公司简介 口蹄疫（FMD）概况简述 口蹄疫防控措施 口蹄疫疫苗种类及特点 口蹄疫灭活苗生产工艺简介 疫苗质量检测与评价 我公司产品优点与效果,2018/10/21,4,一、金宇保灵公司简介,一、金宇保灵公司简介,金宇保灵生物药品有限公司是内蒙古金宇集团股份有限责任公司（股票代码600201）下属全资子公司。农业部定点口蹄疫苗厂家之一。是集科研、
2、生产、销售为一体，逐步实现国际化的高新技术企业。 公司始建于1958年（原内蒙古生物药品厂），2007年重新注册更名为金宇保灵生物药品有限公司。我公司自1995年开始从事口蹄疫灭活疫苗生产与研发，已有近20年的生产历史。,一、金宇保灵公司简介,公司坐落于内蒙古自治区呼和浩特市，占地面积约30万平方米。 公司在国内同行中首家推行GMP，目前已全面通过国家GMP验收。现有现代化生产车间有三座；局部达到P3标准的检验室有四座。 国内首个，也是目前唯一的国家级兽用疫苗国家工程实验室已建起，本年内可投入使用。,一、金宇保灵公司简介,一、金宇保灵公司简介,公司现有员工共579人。其中：研究员9人（博士6名
3、）；高级兽医师及其他高级技术人员17人（硕士38名）；中级职称技术人员78人（本科222名）；初级职称技术人员136人（大专124名）。技术人员占总人数的67.36%。,一、金宇保灵公司简介,口蹄疫灭活疫苗系列产品有：猪口蹄疫灭活疫苗1、猪口蹄疫O型灭活疫苗（ OZK/93株OR/80株）2、猪口蹄疫O型（ O/GX/09-7O/XJ/10-11）灭活苗牛口蹄疫灭活疫苗3、口蹄疫O型、亚洲1型二价灭活苗（OJMS株 JSL株）4、口蹄疫O型、亚洲1型、A型三价灭活疫苗（O/MYA98/BY/2010株+Asia1/JSL/06株+Re-A/WH/09株）,一、金宇保灵公司简介,为了进一步提升企
4、业科研能力和新技术转化能力，公司先后与上海复旦大学、吉林大学、中国农业大学、扬州大学、内蒙古农业大学、军事兽医研究所、农业部热带亚热带重点实验室（云南）、国家疾控中心、中监所、哈兽研、兰研所等众多科研机构和大学院校在新型疫苗开发、新工艺和技术研究领域开展了广泛合作，为新产品、新技术的研发提供了有力保障。,一、金宇保灵公司简介,口蹄疫领域主要成果有： 2002-2004年，公司自主研制生产了牛口蹄疫O型纯化浓缩疫苗，其效价达到国际标准。 2004年，国内率先研制和生产口蹄疫O型、亚洲1型二价灭活疫苗，将免疫剂量降低至2ML/头份； 2003-2004年，自主研发制备了ELISA试剂盒，并建立了与
5、国际（OIE）接轨的配套检测技术；,一、金宇保灵公司简介,2004-2008年，国内率先建立口蹄疫146S定量检测技术，并成功应用于生产和检验； 2008-2009年，国内率先成功攻克了细胞悬浮培养工艺计数，并应用于口蹄疫灭活疫苗生产，创造了我国口蹄疫灭活疫苗史上一次新的革命； 2010-2011年，与内蒙古农业大学联合建立成品疫苗破乳及检测技术，有望列入国家检测标准；,一、金宇保灵公司简介,2004年至今，一直研究和探索口蹄疫抗原浓缩与纯化工艺。采用物理、化学浓缩纯化相结合的方法，自行研制出一套有效、实用，企业独有的组合型浓缩纯化系统，成为继口蹄疫悬浮工艺产业化之后又一个新的亮点，创造了我国
6、口蹄疫灭活疫苗发展史上又一次新的革命。目前已取得显著成效，并应用于生产。,一、金宇保灵公司简介,早在2004年，我公司将一批常规生产牛口蹄疫O型纯化浓缩灭活送至OIE下属英国Pirbright口蹄疫世界参考实验室检测 。结果其效价达到国际标准。,2018/10/21,15,一、金宇保灵公司简介,新产品获准文号：,2018/10/21,16,一、金宇保灵公司简介,新技术取得专利：,一、金宇保灵公司简介,从今年开始公司以建设“品质金宇”为基础，提出 “建立国际型企业”的新的奋斗目标，并继续引领着我国口蹄疫灭活疫苗产业正走向国际化之路。 近几年出国考察的国家有：欧洲多个国家（2004-2005）：先
7、进工艺设备；美国（2005）：悬浮设备；巴西、阿根廷、法国、泰国（2011-2012）：生产工艺；德国、法国（2013）：培养基、纯化设备等。,一、金宇保灵公司简介,一、金宇保灵公司简介,一、金宇保灵公司简介,公司实力小结：NO.1 国内第一推行GMP的口蹄疫疫苗企业（2002年）。 国内第一建立146S（2004年）、内毒素（2001年）、疫苗破乳及蛋白电泳（2011年）、凯氏定氮蛋白测定（2012年）等先进而实用的检测技术。 国内第一实现口蹄疫悬浮培养（2008年）。 率先开展口蹄疫纯化、浓缩研究（2000-2004至今）。,一、金宇保灵公司简介,国内第一家研发生产牛口蹄疫二价苗（与云南重
8、点实验室合作）、牛口蹄疫三价苗（与兰研所合作）的企业。 国内第一将口蹄疫免疫剂量从单价苗3ml/头份二价苗2ml/头份三价苗1ml/头份。 国内第一家，目前唯一的兽用疫苗国家工程实验室。 国内第一个口蹄疫产品质量达到国际标准的企业。金宇是国内行业的引领者、标准制定者。,2018/10/21,22,二、口蹄疫（FMD）概况简述,2018/10/21,23,二、口蹄疫（FMD）概况简述,口蹄疫（Foot and Mouth Disease,FMD）是由口 蹄疫病毒（FMDV）引起的一种急性、热性、高度接触 性和可快速-远距离-传播的-烈性传染病。世界动物卫生组织（OIE）将其列为A类动物传染病 之
9、首（规定为国际间法定报告传染病），我国农业部也 将其列为17个一类传染病中的第一位，是国际公认的对 全球畜牧业危害巨大的“政治经济病”。,全球七个流行区域（病毒池）分布图,Iran O, A & Asia 1,Chinese Taipei O,Angola SAT2,Botswana SAT2,Kenya O & SAT 1,Hong Kong O,Pakistan O, A & Asia 1,Thailand O & A,WRLFMD,30 countries 1100 samples 700 positive,Laos O,South Africa NVD,Mozambique SAT2,
10、FMD Outbreaks 20111100 Samples from 30 Countries,Afghanistan O, A & Asia 1,South Korea O,Kazakhstan O,Russia O,Cambodia O,Zambia O,Bahrain Asia1,Bulgaria O,Libya O,Malaysia O,DPR Korea O,Iraq O & A,Israel O,Kuwait O,Sri Lanka O,Institute for Animal Health-WRLFMD,2018/10/21,26,二、口蹄疫（FMD）概况简述,病原：口蹄疫病毒
11、（FMDV），有7个血清型。,猪主要感染O型，还有A型。,2018/10/21,27,二、口蹄疫（FMD）简述及流行形势,O型口蹄疫,2018/10/21,28,二、口蹄疫（FMD）简述及流行形势,O型FMDV拓扑型（Topotypes）:8个1、古典中国型（Cathay）；2、中东南亚型（MESA）又称Pan-Asia；3、东南亚型（SEA），MYA98属此型；4、欧洲南美型（EuroSA）；5、印尼-1型（ISA-1）；6、印尼-2型（ISA-2）；7、东非型（EA）；8、西非型（WA）。,2018/10/21,29,二、口蹄疫（FMD）简述及流行形势,A型口蹄疫,2018/10/21,3
12、0,二、口蹄疫（FMD）简述及流行形势,A型FMDV拓扑型（Topotypes）:3个1、亚洲型（Asia）：A22/IRQ/24/64；2、欧洲南美型（Euro-SA）：A24； 3、非洲型（Africa）:A/GAM/51/98。我国曾出现的A/AF72、A/XJ/KT/58、A/WH09以及新分离的茂名毒A/GD/MM/2013均属亚洲拓扑型。但A/AF72、A/XJ/KT/58与流行毒株同源性79.8%；A/WH09与流行毒株同源性91.4%。,2018/10/21,31,二、口蹄疫（FMD）简述及流行形势,A,口蹄疫血清型,亚洲1,O,C,SAT1,SAT2,SAT3,古典 中国 型
13、,中东 南亚 型,东南 亚 型,欧洲 南美 型,西非 型,印尼 2 型,印尼 1 型,东非 型,OZK93 /OR80,man isa/ JMS,GX 09-7,MYA98/ XJ10-11 /GD,非洲 型,亚洲 型,欧洲 南美 型,2018/10/21,32,二、口蹄疫（FMD）概况简述,易感动物：猪、牛、羊、骆驼、水牛等偶蹄类动物（ 包括家畜、野生动物等），易感动物多达70多种。牛：最易感指示器；猪：排毒量大放大器；羊：症状轻微，但可长期带毒存储器。,2018/10/21,33,二、口蹄疫（FMD）概况简述,危害与损失：,2018/10/21,34,二、口蹄疫（FMD）概况简述,2018
14、/10/21,35,三、口蹄疫防控措施,2018/10/21,36,三、口蹄疫防控措施,（一）近年来我国口蹄疫防控状态 1999年以前：古典中国型：OR/80、OZK/93； 1999-2008年：古典中国型：OR/80、OZK/93 ；中东-南亚型（或称泛亚）：JMS/2000； 2008-2012年：古典中国型：OR/80、OZK/93 ；中东-南亚型（或称泛亚） ：JMS/2000 ；古典中国型变异株-新猪毒：GX/09-7；东南亚型（MYA/98为代表）：XJ/10-11。,2018/10/21,37,三、口蹄疫防控措施,2012年至今：古典中国型：OR/80、OZK/93 ；中东-南
15、亚型（或称泛亚） ：JMS/2000 ；古典中国型变异株-新猪毒：GX/09-7；东南亚型（MYA/98为代表）：XJ/10-11；A型毒株：A/GD/MM/2013。总之，防控形势越来越复杂、严峻！,2018/10/21,38,三、口蹄疫防控措施,（二）防控不力的根源1、口蹄疫本身特性：型多异变、传播迅猛；2、周围疫情复杂；3、农畜产品流通频繁； 4、养殖规模、管理水平、防控意识参差不齐。5、国家防控措施（预警、通告）不得力；6、疫苗品质差，参差不齐。,2018/10/21,39,三、口蹄疫防控措施,（二）国际上口蹄疫防控基本措施1、疫苗免疫接种：高密度、合理程序、高效疫苗；2、严格的消毒措
16、施：动物、器具、车辆、人员等； 3、流行病学调查，疫病及免疫状体的监测；4、对发病动物及可能感染动物扑杀及无害化处理；5、有效控制病畜、农畜产品及其他污染物移动；6、疫情预报、预测及风险控制。,2018/10/21,40,三、口蹄疫防控措施,疫苗免疫是防控口蹄疫最有力、直接、有效的措施， 其重要性是无可替代的。关键：优质高效疫苗！1、毒株匹配，针对性强。2、生产工艺先进，有效抗原含量高、杂蛋白少。3、检测方法科学、精确、可信。,2018/10/21,41,四、口蹄疫疫苗种类及特点,2018/10/21,42,四、口蹄疫疫苗种类及特点,1、灭活疫苗：目前广泛使用；2、弱毒活疫苗：已停止使用；3、
17、新型疫苗：免疫效果不佳，只有在中国极少使用。 如：合成肽疫苗、基因工程亚单位疫苗、DNA疫苗、基因缺失疫苗、活载体 疫苗、病毒样颗粒（空衣壳）疫苗等等。但均处于实验室研究阶段。,2018/10/21,43,五、口蹄疫灭活苗生产工艺简介,五、口蹄疫灭活苗生产工艺简介,工艺流程图,种细胞选育,细胞培养,接种种毒,病毒液的收获,初步纯化,浓缩纯化,灭活,乳化配苗,种毒的选育,2018/10/21,45,五、口蹄疫灭活苗生产工艺简介,口蹄疫灭活疫苗生产工艺一般分为： 1、上游生产工艺（细胞培养及抗原生产）转瓶培养（传统工艺）；悬浮培养（先进工艺）。2、下游生产工艺（抗原纯化与浓缩）初步过滤澄清工艺；多
18、级处理，高倍纯化与浓缩工艺。,2018/10/21,46,五、口蹄疫灭活苗生产工艺简介,1、上游生产工艺（细胞培养及抗原生产）：（1）转瓶工艺,五、口蹄疫灭活苗生产工艺简介,转瓶工艺生产图片-细胞生产,五、口蹄疫灭活苗生产工艺简介,转瓶工艺生产图片-细胞培养温室,五、口蹄疫灭活苗生产工艺简介,转瓶工艺生产图片-病毒接种,五、口蹄疫灭活苗生产工艺简介,转瓶工艺生产图片-病毒培养温室,五、口蹄疫灭活苗生产工艺简介,转瓶工艺生产图片-库存病毒,五、口蹄疫灭活苗生产工艺简介,2018/10/21,53,五、口蹄疫灭活苗生产工艺简介,转瓶工艺操作缺陷：工艺落后、人工操作、半开放、污染风险极大，导致内 毒
19、素超标！产量低，批间差大！,2018/10/21,54,五、口蹄疫灭活苗生产工艺简介,（2）悬浮培养金宇保灵公司于2009年国内率先建立和应用。,五、口蹄疫灭活苗生产工艺简介,悬浮5L反应器培养温度、pH值、溶氧、搅拌速度、营养液自动化控制,五、口蹄疫灭活苗生产工艺简介,悬浮100L反应器培养温度、pH值、溶氧、搅拌速度、营养液自动化控制,五、口蹄疫灭活苗生产工艺简介,悬浮1000L反应器培养温度pH值溶氧搅拌速度营养液,2018/10/21,58,五、口蹄疫灭活苗生产工艺简介,悬浮培养工艺优点：密闭、管道化、连续流、自动化程度高、抗原 产量大、污染几率极小！,2018/10/21,59,五、
20、口蹄疫灭活苗生产工艺简介,2、下游生产工艺（抗原纯化与浓缩）：（1）常规方法,2018/10/21,60,五、口蹄疫灭活苗生产工艺简介,简陋、粗放、落后，效果差！,2018/10/21,61,五、口蹄疫灭活苗生产工艺简介,（2）先进工艺采用组合型工艺（包括企业自行设计研发，国际先进 的组合型CTF系统），分三大步进行处理。蛋白去除率 达98%以上。与国际接轨、国内独有！,2018/10/21,62,五、口蹄疫灭活苗生产工艺简介,2018/10/21,63,五、口蹄疫灭活苗生产工艺简介,生产工艺的先进与否，是产品质量高效、安全、均一、稳定的核心和基础！ 上游工艺：悬浮（）、转瓶（）；下游工艺：高
21、效纯化（）、澄清（）。,2018/10/21,64,六、疫苗质量检测与评价,2018/10/21,65,六、疫苗质量检测与评价,（1）146S测定：2004-2006年，国内率先建立，目前 已广泛应用于生产和检验。,2018/10/21,66,六、疫苗质量检测与评价,（2）总蛋白含量测定：,2018/10/21,67,六、疫苗质量检测与评价,总蛋白含量测定数据：,2018/10/21,68,六、疫苗质量检测与评价,（3）聚丙烯凝胶电泳（SDS-PAGE）分析：在29KD处蛋白条带代表抗原含量；其他部位出现蛋白条带为杂蛋白。,2018/10/21,69,五、口蹄疫检验技术简介,杂蛋白,有效抗原蛋
22、白,杂蛋白,2018/10/21,70,五、口蹄疫检验技术简介,有效抗原蛋白,杂蛋白,2018/10/21,71,五、口蹄疫检验技术简介,杂蛋白条带,杂蛋白条带,有效抗原条带,2018/10/21,72,五、口蹄疫检验技术简介,有效抗原条带,杂蛋白条带,杂蛋白条带,2018/10/21,73,五、口蹄疫检验技术简介,有效抗原条带,杂蛋白条带,杂蛋白条带,2018/10/21,74,五、口蹄疫检验技术简介,技术核心： 悬浮培养（金矿）浓缩纯化（先进的炼金技术）检验诊断（科学检测）,2018/10/21,75,七、我公司产品优点与效果,2018/10/21,76,七、我公司产品优点与效果,我公司口
23、蹄疫产品集毒株优势、工艺技术优势（悬浮 培养工艺、高倍纯化浓缩技术）、检测技术优势（146S测定）为一身，是目前国内最安全、高效、 稳定的口蹄疫产品。,2018/10/21,77,七、我公司产品优点与效果,1、“一针三防”，抗原谱宽广，可对O型、Asia1型、A型产生良好的免疫保护。,2018/10/21,78,七、我公司产品优点与效果,2、高抗原含量、高效价：以国际通用的悬浮培养技术和公司独有的高纯化浓 缩技术(CTF)为基础，疫苗中抗原含量可达到810ug 以上，符合OIE高效紧急免疫疫苗标准，效价高、免疫 效果确实。欧洲高效疫苗的抗原含量4.1-10ug/头份；不是越多 越好，大于10u
24、g没有意义。,2018/10/21,79,七、我公司产品优点与效果,3、低过敏原、高安全性：经悬浮培养、高倍纯化双重先进工艺精制而成的本 疫苗中非抗原（杂蛋白）含量极少，内毒素几乎为零， 具有极高的安全性。基本杜绝或消除了疫苗副反应或注 射反应。,2018/10/21,80,七、我公司产品优点与效果,4、可激发机体产生快速免疫应答：由于抗原含量足、纯度高，能够在免疫后短时间（4- 7日）内有效刺激机体免疫系统诱导产生先天免疫保护 并激发机体快速产生特异性体液免疫应答。本疫苗的该项特点和优势对猪群的紧急免疫、阻断 临床症状并有效控制疫情意义重大。,2018/10/21,81,七、我公司产品优点与
25、效果,5、抗体水平高，免疫持续期长：疫苗的抗原含量高，杂蛋白含量低，既减少了对动 物机体特异性免疫应答的干扰，又刺激机体产生了高水 平的体液免疫，免疫持续期可真正达到56个月。,2018/10/21,82,七、我公司产品优点与效果,6、去除了非结构蛋白（Nsp），可作为标记疫苗（DIVA）使用。,2018/10/21,83,七、我公司产品优点与效果,本产品与常规疫苗对比：,2018/10/21,金宇保灵生物药品有限公司,84,七、我公司产品优点与效果,2018/10/21,金宇保灵生物药品有限公司,85,七、我公司产品优点与效果,2018/10/21,金宇保灵生物药品有限公司,86,2018/
26、10/21,金宇保灵生物药品有限公司,87,七、我公司产品优点与效果,一、农业部推荐的免疫程序：1、仔猪、羔羊：2835日龄时进行初免。2、犊牛：90日龄左右进行初免。所有新生家畜初免后，间隔1个月后进行一次强化免疫，以后每隔46个月免疫一次。,2018/10/21,金宇保灵生物药品有限公司,88,公司推荐的免疫程序,2018/10/21,金宇保灵生物药品有限公司,89,抗体监测与标准：1、按农业部推荐的LPBELISA方法测定抗体滴度。2、建议规模化奶牛场/猪场采用的抗体合格标准：免疫（初免动物第二次免疫）后60天采血，抗体滴度（1：64）达标率75%以上为合格标准。,2018/10/21,
27、90,七、我公司产品优点与效果,疫苗的在市场上推广和应用情况：自2011年中旬至今，本疫苗已在广东、广西、福 建、江西、河南、湖北、山东等很多省区广泛使用。并 逐渐与广东温氏、瑞昌、深圳农牧、广西农垦、河南牧 原、新大、双汇、雏鹰、中粮、雨润、北京三元、山东 金锣、柯新源、扬翔、桂宁等全国800多家大、中型养殖企业（不包括小型企 业）建立良好的合作关系。,2018/10/21,91,七、我公司产品优点与效果,总之，金宇疫苗在毒株匹配、悬浮培养工艺、 纯化浓缩技术、疫苗评价与检测技术、应用效 果、客户满意度等诸多方面在国内均处于领先，是 真正达到国际水平的优质疫苗。,2018/10/21,92,
28、五、金宇口蹄疫新产品及特点,新产品推荐的免疫程序：A、经免猪群（后备种猪等）：一般每46个月免疫一次即可，根据抗体监测及受 威胁程度适当调整免疫时间。2ml/次。,2018/10/21,93,五、金宇口蹄疫新产品及特点,新产品推荐的免疫程序： B、初免仔猪：2835或4550日龄首免，间隔34周二免（生猪 出栏前可不再免疫），以后每46个月加强免疫一次（ 后备种猪）。2ml/次。,2018/10/21,94,五、打一次和打二次的区别,2018/10/21,金宇保灵生物药品有限公司,95,以农业部FMD防治规范合格标准（ 1：64 ）统计,0、A型临床症状区别,2018/10/21,96,2018/10/21,97,金宇简介结束,祝大家：工作顺利、身体健康！,2018/10/21,98,广西联系人:肖柳美 13307711927,
