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自身免疫病的检验ppt课件.ppt

上传人:微传9988 文档编号:3362582 上传时间:2018-10-18 格式:PPT 页数:25 大小:2.78MB
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资源描述

1、自身免疫病的检验,一、自身免疫病的概述 二、自身抗体的检测及临床意义铜梁区虎峰镇中心卫生院 高春,自身耐受与自身免疫,Self-tolerance:正常情况下,机体免疫系统对自身抗原物质不产生免疫应答或只产生极微弱的免疫应答 Autoimmunity:机体对自身组织成分产生自身抗体或自身免疫效应T细胞Autoimmune disease,AID 由自身免疫应答引起的疾病称为自身免疫性疾病。,自身免疫病的基本特征,多数病因不清 患者以女性居多 有遗传倾向 血液中可检出高滴度的自身抗体和(或)与自身组织起反应的致敏淋巴细胞 疾病的重叠现象 病程较长,多迁延为慢性 患病组织器官的病理特征为免疫炎症

2、免疫抑制剂治疗可取得一定疗效 用相同抗原在某些试验动物中可复制出相似的疾病模型,自身免疫病的发病机制,1.隐蔽抗原的释放 2.自身组织的改变 3.共同抗原诱导 4.遗传因素 5.免疫调节失常,部分自身免疫病与HLA的相关性 自身免疫病 抗原 相对危险值类风湿关节炎 DR4 4.2强直性脊柱炎 B27 63.1系统性红斑狼疮 DR3 5.8桥本甲状腺炎 DR5 3.2毒性甲状腺肿 DR3 3.0多发性硬化症 DR2 3.8,自身免疫病的分类,器官特异性自身免疫病指自身免疫应答反应特异地作用于某器官引起相应的损害,可检出特异性的自身抗体 非器官特异性自身免疫病指自身免疫应答反应非特异地出现在全身多

3、系统、多器官和组织中,造成全身性病理改变,并可检出多种非特异性的自身抗体,重症肌无力(myasthenia gravis,MG) 患者体内存在抗乙酰胆碱受体的自身抗体,引起以骨骼肌运动无力为特征的自身免疫病。 毒性弥漫性甲状腺肿(Graves disease) 患者血清中存在抗促甲状腺激素受体(TSHR)的IgG型自身抗体。 以上两种疾病的免疫损伤机制均属II型超敏反应,系统性红斑狼疮(SLE) 是一种累及多器官、多系统的小血管及结缔组织疾病,好发女性,疾病呈渐进性,缓解与复发交替,体内存在多种自身抗体。 类风湿关节炎(RA) 本病特征以手脚小关节发病,向心对称性发展,血清和关节滑膜液中出现抗

4、变性IgG抗体,即类风湿因子(rheumatoid factor,RF) 以上两种疾病发病机制属III型超敏反应。,自身抗体的检测及临床意义,抗核抗体:Anti-nuclear antibody,ANA是以真核细胞的核成分为靶抗原的器官非特异性自身抗体的总称 ANA的性质主要是IgG,少数为IgM和IgA, 无器官和种属特异性 风湿性疾病:红斑狼疮、硬皮病、皮肌炎与多发性肌炎、类风湿关节炎、干燥综合症、混合结缔组织病等,ANA类型,1.抗核蛋白抗体 2.抗DNA抗体抗双链DNA(dsDNA)抗体抗单链DNA(ssDNA)抗体 3.抗ENA抗体,一、免疫荧光抗核体Immunofluorescen

5、ce anti-nuclear antibody ,IFANA 以Hep-2(人喉癌上皮细胞株)细胞为抗原基质+待测血清+荧光抗人Ig 荧光显微镜下观察荧光核型,常见核型: 周边型:是抗dsDNA或抗脱氧核糖核蛋白(dsDNA+组蛋白,DNP)的形态学反应。高滴度周边型核荧光多见于SLE 均质型:抗DNP或抗组蛋白抗体,也可是多种自身抗体高度密集的形态表现。多见于活动期SLE、药物性狼疮等。,颗粒型:抗ENA抗体。 核仁型:抗核小体抗体,多见于硬皮病、皮肌炎及类分关等 着丝点型:染色体区线状排列荧光(不超过46点),仅见于硬皮病(尤其是CREST综合症阳性率可达80%),二、抗DNA抗体 1.

6、双链DNA(dsDNA)抗体对SLE有很高特异性 2.单链DNA(ssDNA)抗体缺乏特异性,在各种感染、自身免疫病中均存在 检测方法:免疫荧光法、放免分析法(Farr法)、滴金免疫测定法、ELISA,2.抗核糖核蛋白(RNP)抗体高滴度的抗RNP抗体,尤其是抗U1 70000RNP抗体阳性对诊断MCTD有重要意义 3.抗SSA(Ro)和SSB(La)抗体对干燥综合症(sjoergren syndrome,SS)诊断有意义,尤其是SSB抗体具有特异性,4.抗SCL-70抗体约40%的系统性硬皮病和70%的弥漫性硬皮病中SCL-70抗体阳性 5.抗Jo-1抗体该抗体具有高度的肌炎特异性,多见于P

7、M(45%)和DM(5%) 6.抗rRNP抗体(抗核糖体抗体)在10%的SLE中出现,具有此抗体时中枢NS病变率高,免疫印迹技术(Immunoblotting,IBT)检测ENA抗体的原理和流程 ENA经SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳,各种抗原性多肽按分子量大小分离,电转移至硝酸纤维膜固定后,患者血清中的自身抗体即可通过酶连免疫反应与相应的蛋白多肽结合,在硝酸纤维膜上呈现特异性显色条带,参照各种已知阳性血清在膜上留下的显色区带的位置特征及显色区带对应的蛋白多肽抗原的分子特征,即可检测和识别多种自身抗体。,类风湿因子(RF),是抗变性IgG的自身抗体,主要为IgM,也可见IgG,IgA。 检测方法:

8、胶乳颗粒凝集试验(只能检出IgM类RF),ELISA法(可检出各类RF) RF阳性支持早期RA的倾向性诊断,抗环状胍氨酸多肽抗体(CCP),抗环状胍氨酸多肽抗体(CCP)是环状聚丝蛋白的多肽片段,是以IgG型为主的抗体。 抗环瓜氨酸抗体在类风湿性关节炎的敏感度有75-87.6%,而其特异度更可达到89-99%,较类风湿因子的特异度67-81.7% 高得多,且在70%的发病一年内类风湿性关节炎病人血清中可检测到抗环瓜氨酸抗体的存在,同时抗环瓜氨酸抗体阳性也可以用来预测严重破坏的类风湿性关节炎,因此抗环瓜氨酸抗体对於类风湿性关节炎的早期确定诊断及预後评估是极有帮助的. anti-CCP是目前全面推广应用的对RA早期诊断的一个自身抗体。未来可能取代现今通用的类风湿因子。 RA相关性抗体有助于预测影像学进展情况,抗体阳性者的进展率显著快于阴性者;关节外表现仅与RF相关,而与抗CCP抗体无关。 在RA的诊断中,虽然抗CCP抗体的敏感性高于RF,但RF在预测影像学进展和关节外表现中的价值同样不容忽略。 建议同时检查。,其他自身抗体,抗甲状腺球蛋白及微粒体抗体乔本氏甲状腺炎 抗乙酰胆碱受体抗体重症肌无力 抗平滑肌抗体肝、胆自身免疫病 抗胃壁细胞抗体恶性贫血,

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