1、,组织学与胚胎学,主讲:蒲小燕 单位:青海大学医学院,组织学(histology):研究机体微细结构及其相关功能的科学,胚胎学(embryology):研究人体发生、生长及其发育机制的一门科学,组织学绪论,Histology Introduction,三、组织学技术,一、 组织学的概念 二、显微镜的应用,四 、组织学的学习方法,一、组织学的概念,机体的微细结构,是用显微镜,及其相关功能的 科学 。,(细胞、组织、器官、系统),研究,红细胞白细胞肌细胞精子 神经细胞,组织,器官,系统,细胞,细胞间质(细胞外基质),+,上皮组织 结缔组织 肌组织 神经组织,(cell),(tissue),(org
2、an),(system),成人有11015个细胞,约210种.,细胞膜细胞质细胞核,细胞提出,组 织 建 立,形成,21种,透射电镜 -观察细胞内部结构扫描电镜 -观察组织或细胞表面的立体结构,电子显微镜,光学显微镜,解剖光学显微镜(放大镜),组织光学显微镜,1、显微镜的分类,二、显微镜的应用,0.2um物体放大1000倍,镜下结构简称 LM 结构发明于16世纪,0.2nm物体放大1000倍,镜下结构简称 EM 结构发明于1932年,2、显微镜的特点,三、组织学技术,石蜡切片法(用于教学) 冷冻切片法(用于临床检验),(肝、肾、淋巴结等),非切片法,(牙齿、血液、疏松结缔组织等),切片法,涂片
3、,铺片(撕片),磨 片,取材,(一)、石蜡切片法,1、快速杀死动物取材。 2、组织愈新鲜愈好。 3、材料大小一般不超过 0.5cm3。,固定,1、动物的组织在离体后便很快地进行解体 , 这些变化可能是由于细菌或是由于其 本身所含酶的作用。 2、在动物死后应立即将其固定起来,停止其分解作用 , 尽可能保存其结构及成分,并能抵抗各个步骤处理时所产生的损坏作用。 3、常用的固定液有 10% 福尔马林 , Bouin 液 , 苦味酸、乙醇。 4、固定时间为24小时-很长。,冲洗,1、用水将固定液置换。 2、时间为24小时。,脱水,1、组织必须先脱去水分 , 才能包埋于蜡中。 2、脱水的步骤是陆续经 7
4、0% 、 80% 、 90% 、 95% 、 100 % 各级酒精 , 以去净组织块内的水分 , 并完全由酒精所代替 。 3、时间为3-6小时,透明,1、因石蜡不溶于 酒精而溶于二甲苯 , 因而再用二甲苯替代酒精 , 同时因组织浸于油质二甲苯 中也就变得透明了。 2、时间为24小时。,浸蜡,1、将透明好的组织快放入溶化 的石蜡中,置于保温箱。 2、时间为35小时。,包埋,最后把组织放在保持于 52 58C 的已溶解的石蜡中,置于常温下。,切片,待冷却后就变成坚硬的组织蜡块 , 便可以进行切片了。,贴片,染色,(二)染色方法,苏木精(Hematoxylin)伊红(Eosin),碱性染料,将嗜碱性
5、物质(本身酸性) 染成蓝色,酸性染料,将嗜酸性物质(本身碱性)染成红色,细胞核中的DNA、RNA,细胞质中的RNA,细胞质、膜性结构(线粒体、溶酶体、滑面内质网),(嗜碱性),(嗜酸性),Giemsa染色 、银染色,特殊染色:,HE染色:,嗜中性,巨噬细胞 消化分解,1、形态结构和功能的关系,3、立体和断面的关系,5、前后联系,对比总结,功能,(有溶酶体),四、组织学的学习方法,2、理论和实践的关系,4、静态与动态,组织学研究技术、细胞,自学!,多糖,PA,氧化,醛,Schiff 试剂,紫红色沉淀,五、 Histochemistry and Cytochemistry 组织化学与细胞化学,试剂
6、 + 组织中待检物质 有色沉淀(多糖、酶、脂类、核酸)( periodic acid Schiff reaction):是确定组织或细胞中有无多糖的方法。原理:,PAS反应,PAS染色,单柱上皮不同方位的切片图,结构与功能,舒张状态,收缩状态,静态与动态,综合与比较,六、细胞,一 细胞膜 cell membrane二 细胞质 cytoplasm三 细胞核 nucleus,细胞膜,(一)、 cytoplasm基质核糖体 ribosome细胞器 内质网 ER高尔基复合体 Golgi溶酶体 Lys线粒体 Mit过氧化物酶体 peroxisome中心体 centrosome细胞骨架 cytoskele
7、ton包含物:糖原、脂滴、分泌颗粒,细胞器 organelle,核糖体 ribosome attached ribosome 附着核糖体:合成分泌蛋白free ribosome 游离核糖体:合成结构蛋白核糖体丰富的细胞LM下胞质嗜碱性,内质网 ER 粗面内质网(RER):合成分泌型蛋白质 嗜碱性滑面内质网(SER):嗜酸性 合成类固醇激素肾上腺皮质细胞 参与脂类代谢(小肠吸收细胞,肝细胞) 解毒作用-(肝细胞) 离子贮存、调节(横纹肌Ca2+),高尔基复合体 Golgi complex功能: 蛋白质加工站( 酶原颗粒 、粘原颗粒 、初级溶酶体 ) 蛋白质分泌旺盛细胞Golgi发达,溶酶体 ly
8、sosome 嗜酸性初级lys次级lys 吞噬体 功能: 含酸性水解酶,细胞内消化器-清除外来异物与内源性残余物。,线粒体 Mit :能量供应站,细胞骨架 cytoskeleton: 细胞特定形状,运动有关 微管: 微丝: 肌细胞( 粗丝+细丝 ) 中间丝: 神经丝-神经元角质蛋白丝-复层扁平上皮神经角质丝-星形胶质细胞结蛋白丝波形蛋白丝,(二) 细胞核 nucleus1 核膜 nuclear envelop :核孔 nuclear pore 功能活跃强嗜碱性 +2 核仁 功能静止()形成核糖体前身的部位3 核基质: 核液 + 核骨架 4 染色质: 常染色质功能活跃浅异染色质功能静止深,成纤维细胞,细胞的微细结构,LM: 1 细胞的形态2 细胞质(酸碱性、特殊物质)3 细胞核(位置、大小、数量、形态、深浅)EM:1 细胞外形2 细胞器Function:,思考题,组织学的主要研究内容是什么? 组织和器官分别是如何构成的?人体有哪几种基本组织? 何谓嗜碱性、嗜酸性、中性、PAS反应? 组织学有哪些常用方法和技术?,See you,