1、基本概念 第一节 物理消毒灭菌法 第二节 化学消毒灭菌法,第四章 消毒与灭菌,消毒（disinfection）:杀死目标范围内病原微生物的方法。用于消毒的化学药物称为消毒剂。以杀灭细菌的繁殖体为标志。 灭菌（sterilization）:杀灭目标范围内所有微生物的方法。以杀灭细菌的芽胞为标志。消毒与灭菌是两个不同的要领。灭菌可包括消毒，而消毒却不能代替灭菌。消毒多用于卫生防疫方面，灭菌则主要用于医疗护理。 防腐（antisepsis）:防止或抑制微生物生长繁殖的方法。 无菌（asepsis）:目标范围内没有活的微生物存在。 无菌操作：防止微生物进入机体或物体的操作技术。,消毒与灭菌的概念,一、
2、热力消毒灭菌法附：干燥与低温抑菌法 二、辐射消毒杀菌法 三、超声波消毒杀菌法 四、滤过除菌法,第一节 物理消毒灭菌法,1、干燥：干燥可使细菌繁殖体脱水、盐类浓缩，阻碍细菌代谢，最后导致细菌死亡。高浓度糖或盐处理食物，可使细菌脱水，抑制细菌生长繁殖-生理干燥 2、低温：（1）大多数细菌对低温耐受力较强，只有少数病原菌（如脑膜炎球菌、流感杆菌）耐受性低。（2）低温环境下，细菌代谢缓慢，可抑制其生长繁殖。但仍保持生命，一旦温度等条件适宜，即可恢复繁殖。可保存在04,干燥、低温抑菌法,（一）干热灭菌法：指相对湿度在20以下的高热。 （二）湿热消毒灭菌法：灭菌效果好。原因为：1、湿热比干热穿透力强，可较
3、快提高物体内部温度2、湿热中病原体易吸收水分，促进Pro的凝固变性3、热蒸汽接触物品变为液态可放出大量的潜热。,一、热力消毒灭菌法,两种方法的比较,干热灭菌与湿热灭菌的比较,（一）干热灭菌法,1、焚烧法：用于被污染的废弃物、尸体。 2、烧灼法：用于紧急情况时耐热物品的消毒及接种环、试管口等。 3、干烤法：干烤箱（160170，12h），用于玻璃器皿、粉剂等。 4、红外线：用于医疗器械，玻璃器皿等。,红外线,红外线辐射是一种0.771000微米波长的电磁波,有较好的热效应,尤以110微米波长的热效应最强。 红外线由红外线灯泡产生,不需要经空气传导，所以加热速度快，但热效应只能在照射到的表面产生，
4、因此不能使一个物体的前后左右均匀加热。 红外线的杀菌作用与干热相似，利用红外线烤箱灭菌的所需温度和时间亦同于干烤。 人受红外线照射较长会感觉眼睛疲劳及头疼；长期照射会造成眼内损伤。因此，工作人至少应戴能防红外线伤害的防护镜。,1、高压蒸气灭菌法：最常用、最有效的灭菌方法。适用于耐高温和耐潮湿的所有物品，如手术器械、敷料、一般培养基、生理盐水、蒸馏水等。 2、煮沸法：用于食具、刀剪、玻璃注射器等消毒。 3、流动蒸气消毒法（常压蒸气消毒法）：多用于不耐高温的、营养丰富的培养基。 4、巴氏消毒法：用于牛奶、酒类、饮料等,（二）湿热消毒灭菌法,1、高压蒸气灭菌法,用高压蒸汽锅进行。 在103.4kPa
5、 蒸气压下，温度可达121.3，经1520min ，可杀灭全部微生物。 适用范围：除了那些不耐高温和潮湿的物品外所有的物品，如手术器械、敷料、一般培养基、生理盐水、蒸馏水等。 注意事项：物品摆放勿过满；锅内冷空气排尽后，再加压；压力降至“0”时，方能开盖。,2、煮沸法,条件：100 ，5min可杀死细菌繁殖体；100 ，12h可杀死细菌芽孢；如加入2%Na2CO3，可提高沸点到105 ，还可防止金属生锈。 适用范围：用于食具、刀剪、玻璃注射器等。,3、流动蒸气消毒法,利用蒸笼或阿诺蒸锅进行。 条件： （1）100 水蒸气，1530min可杀死细菌繁殖体。（2）用间歇灭菌法可使芽孢发育为繁殖体后
6、被杀灭。 适用范围：多用于不耐高温的、营养丰富的培养基。,间歇灭菌法,将物品经流动蒸汽加热后，置37温箱过夜，使细菌芽孢发育为繁殖体后，次日再经流动蒸汽加热，反复三次。,4、巴氏消毒法,由法国科学家巴斯德创立。 条件：加热61.662.8，30min或71.7，1530s（瞬时消毒）。 特点：用较低温度杀死液体中的病原菌或特定微生物，而又不破坏被消毒物品的营养成分和气味。 适用范围：用于牛奶、酒类、饮料等。,1、日光与紫外线:波长265-266nm的紫外线杀菌力最强。穿透力弱，常用于空气、物品表面的消毒对眼睛角膜和皮肤均有损伤作用。应遮盖患者的这些部位 2、电离辐射：高速电子、X射线、射线等可
7、产生游离基，破坏DNA。不使物品升温， 称“冷灭菌”。且穿透力强，用于不耐热物品的消毒，如药品、塑料（一次性注射器、输液器等）不能用于人体的消毒。 3、微波：波长10-110-9m或更短的电磁波。常用于药品和食品灭菌。微波长期照射可引起眼睛的晶状混浊、睾丸损伤和神经功能紊乱等全身性反应,二、辐射杀菌法,不被人耳感受的20千Hz/秒的声波，称为超声波。 可使细菌细胞裂解而死亡，但往往有残存的活细胞。对G-菌效果最好，葡萄球菌最差。 主要用于粉碎细胞，提取其中的化学成分。,三、超声波杀菌法,将液体或空气通过含有微细小孔的滤器，只允许小于孔径的物体如液体和空气通过，大于孔径的的物体不能通过。 主要用
8、于一些不耐热的血清、毒素、抗生素、药液、空气等除菌。一般不能除去病毒、支原体和细菌的L型。,四、 滤过除菌法,滤器的种类,滤膜滤器：由硝基纤维素制成薄膜，装于滤器上，其孔径大小不一，常用于除菌的为0.22um。硝基纤维素的优点是本身不带电荷，故当液体滤过后，其中有效成分丧失较少。 蔡氏滤器（Seitz）：是用金属制成，中间夹石棉滤板，有石棉K、EK、EK-S三种，常用EK号除菌。 玻璃滤器：是用玻璃细砂加热压成小碟，嵌于玻璃漏斗中一般为G1、G2、G3、G4、G5、G6六种，G5、G6可阻止细菌通过。 实验室等处应用的超净工作台，就是利用过滤除菌的原理去除进入工作台空气中的细菌。,第二节 化学
9、消毒灭菌法,一、消毒剂的应用范围（重点） 二、消毒剂的作用机制（了解） 三、消毒剂的种类和选用：酚类、醇类、重金属盐类、氧化剂、表面活性剂、烷化剂。 四、影响消毒灭菌效果的因素（重点）,一、消毒剂的应用范围,由于消毒剂对人体细胞也有毒性作用，故不能内服。 主要用于人体体表、病人排泄物与分泌物及周围环境和医疗器械的消毒。,1、使菌体蛋白质变性凝固：如重金属盐类、醇类、醛类、酸、碱等。 2、干扰或破坏细菌的酶系统和代谢：如某些氧化剂（H2O2、高锰酸钾、过氧乙酸）、重金属盐类（氯化汞、硫柳汞、硝酸银等）可与细菌酶蛋白中的巯基（SH）结合，使酶失活，致细菌代谢障碍。 3、改变细菌细胞壁或细胞膜的通透
10、性：使胞质内代谢产物逸出，导致细菌死亡。如酚类、表面活性剂等。,二、消毒剂的作用机制,三、消毒剂的种类和选用,1、消毒剂的性质、浓度与作用时间 2、微生物的种类与数量 3、温度及酸碱度 4、有机物的影响,四、影响消毒灭菌效果的因素,1、消毒剂的性质、浓度与作用时间,（1）消毒剂的性质不同，消毒效果不同。,各种消毒剂的理化性质不同，对微生物的作用大小也差异。例如表面活性剂对革兰氏阳性菌的灭菌效果比对革兰氏阴性菌好，龙胆紫对葡萄球菌的效果特别强。,但乙醇只有7080%有消毒作用，95%的主要用于固定组织标本 有些消毒剂高浓度会损伤人体，如高锰酸钾超过0.5%会烧伤皮肤、黏膜。,（2）在一定范围内，
11、消毒剂浓度越大，作用时间越长，消毒效果越好。,2、微生物的种类与数量,不同微生物种类对消毒剂的敏感程度也不同。,微生物的数量越多，消毒剂的浓度应越高，消毒时间也应越长。,对细菌而言,G-菌G+菌,有荚膜菌无荚膜菌,细菌的芽胞细菌的繁殖体,老龄菌幼龄菌,对其他而言：病毒因种而异，真菌多不敏感,3、温度及酸碱度,在消毒过程中，随温度升高而化学反应速度加快。如2%戊二醛对炭疽芽孢杀灭作用，20需15min，56仅需1min 。 PH值也可影响杀菌作用：可通过改变消毒剂的溶解度和分子结构起作用。也可直接对微生物的生长产生影响。如季胺盐类化合物的戊二醛药物在碱性环境中杀灭微生物效果较好；酚类和次氯酸盐药剂则在酸性条件下杀灭微生物的作用较强。,4、有机物的影响,环境中有机物的存在，影响消毒剂的消毒效果。可在微生物的表面形成保护层；可影响消毒剂的溶解度； 可与消毒剂作用，使其对微生物的作用浓度降低； 可可中和一部分消毒剂。 有机物主要影响重金属类、表面活化剂等，而对戊二醛、漂白粉、酚类化合物等影响较小。 消毒皮肤和器械时，需洗净后再消毒，对痰、粪便等的消毒应选用受有机物影响较小的消毒剂，如生石灰、漂白粉等。,
