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第3节 HPLC基本理论.ppt

上传人:dreamzhangning 文档编号:3315384 上传时间:2018-10-12 格式:PPT 页数:9 大小:358.50KB
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第三节 基本原理,一、柱内展宽 Giddings 液相色谱速率方程式 一、柱内展宽,Csm为静态流动相传质阻力项系数,其余与Van Deemter方程含义相同。,1. 涡流扩散项A与固定相的粒度和柱填充的均匀程度有关。,2 纵向扩散项B/u,LC中,温度低,流动相粘度大扩散系数Dm液较Dm气小105倍;而u=(310)u最佳,B/u可忽略不计。,3、传质阻抗项 Cu,Csm为静态流动相传质阻抗系数,Cm为流动相传质阻抗系数;Cs为固定相传质阻抗系数 静态流动相-停留在固定相较深孔穴中的静止流动相,GC中:Csu是Cu的主要因素; LC中:只有具有厚涂层固定液的固定相或具有深孔的离子交换树脂时,Cs才起作用,对于化合键合相LC,“固定液”只是载体表面的一层单分子层,在此Csu可忽略。 键合相色谱的液相色谱速率方程一般表现形式H=A+Cmu+Csmu 非键合相色谱柱H=A+Cmu+Csmu+Csu,dp,Dm,H。 采用低粘度流动相,柱温,可Dm。 所以 (1)固定相与装柱:采用小粒度、均匀的球形固定相;首选化学键合相;装柱用匀浆法。 (2)流动相:低粘度、低流量(1ml/min)。,二、柱外效应,由于色谱柱以外的某些因素,造成额外的谱带展宽,使柱的实际分离效率未能达到其固有的水平。 造成柱外效应的因素: 进样器、接头、连接管路和检测池,谢谢,

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