1、输血实验室的安全防护,北京大学人民医院 输血科 侯瑞琴 2012-4-27,内容,实验室生物安全通用要求HIV职业暴露和实验室安全防护,哪些因素威胁实验室安全？,微生物 化学试剂 噪音、光、电离辐射、放射性污染 火灾、漏电、短路,法律法规,实验室生物安全通用要求（GB19489-2004） 医院感染管理办法、医院感染管理规范 消毒管理办法 医疗废物管理办法、医疗废物管理条例 中华人民共和国传染病防治法 医务人员艾滋病病毒职业暴露防护工作指导原则,实验室生物安全通用要求,本校准为最低要求，此类实验室还应同时符合国家其他相关规定的要求,生物安全,一、实验室基本设计,在设计实验室和安排某些类型的实验
2、工作时，对于那些可能造成安全问题的情况要加以特别关注 气溶胶的形成 处理大容量和/或高浓度微生物 仪器设备过度拥挤和过多 啮齿动物和节肢动物的侵扰 未经允许人员进入实验室 工作流程：一些特殊标本和试剂的使用,根据生物因子对个体和群体的风险程度将其分为4级、级。防护屏障分级一级、二级实验室生物安全防护水平（biosafety level，BSL）分级 根据对所操作生物因子危害程度和采取的防护措施，分为4级，1级防护水平最低，4级防护水平最高，以BSL-1、BSL-2、BSL-3、BSL-4表示实验室的相应生物安全防护水平 输血科实验室目前没有明确规定所属级别，一般认为属于BSL-2实验室,在处理
3、危险度2级或更高危险度级别的微生物时，实验室门上应标有国际通用的生物危害警告标志。,BSL-2 实验室,生物安全,二、实验室设施和设备要求,布局,医院感染管理规范第六十条 布局合理，应有清洁区、半清洁区和污染区 输血科布局,类环境,BSL,实验室墙壁、天花板和地面应平整、易清洁、不渗水、耐化学品和消毒剂的腐蚀。地面应防滑，不得铺设地毯 实验台面应防水，耐腐蚀、耐热 橱柜和实验台应牢固，彼此之间保持一定距离，便于清洁 实验室的门应有可视窗、带锁并可自动关闭，并达到适当的防火等级 安全系统应当包括消防、应急供电、应急淋浴以及洗眼设施。 如使用窗户自然通风，应有防虫纱窗；或安装独立的送排风系统，确保
4、实验室内气流由清洁区流向污染区,BSL-2实验室设计特征,应有足够的存储空间摆放物品以方便使用 工作区域外应设置物品存储间，应有存放个人物品、休息及饮食条件每个实验室应设洗手池，宜设置在靠近出口处保证工作照明，避免不必要的反光和强光 要有可靠的电力供应和应急照明。必要时，重要设备如培养箱、生物安全柜、冰箱等应设备用电源有生物气溶胶感染或扩散风险的操作的实验室工作区应配备生物安全柜。,基本生物安全设备,生物安全柜，在以下情况使用： 处理感染性物质 空气传播感染的危险增大时 进行极有可能产生气溶胶的操作时（包括离心、研磨、混匀、剧烈摇动、超声破碎、打开内部压力和周围环境压力不同的盛放有感染性物质的
5、容器、动物鼻腔接种以及从动物或卵胚采集感染性组织）,生物安全柜,生物安全,三、灭菌和消毒,灭菌-高压灭菌法,对于大多数目的，下列组合可以确保正确装载的高压灭菌器的灭菌效果 134、3min 126、10min 121、15min 115、25min,灭菌-紫外线,杀菌机制 作用于微生物的DNA，使菌体DNA失去转换能力而死亡。 破坏菌体蛋白质中的氨基酸，使菌体蛋白变性。 降低菌体内氧化酶的活性。 使空气中的氧电离产生具有极强杀菌作用的臭氧。由于紫外线辐照能量低，穿透力弱，紫外线灯管消毒法主要用于空气消毒和物品表面消毒紫外线对皮肤和眼睛有伤害，使用时应注意安全防护。,灭菌-焚烧,在处理那些经过或
6、事先未经清除污染的动物尸体以及解剖组织或其他实验室废弃物时，焚烧是一种有效的方法。 需要有效控制温度，并配备二级焚烧室时才能实现彻底焚烧。理想的是一级焚烧室的温度至少应达到800，二级焚烧室的温度至少应达到1000。 应注意焚烧对环境的影响。,消毒-化学杀菌剂,常用化学杀菌剂 含氯消毒剂：次氯酸钠(84消毒液)、次氯酸钙、二氯异氰尿酸钠等 醛类化合物：甲醛、戊二醛等 酚类化合物：三氯生、氯二甲酚 醇类化合物：乙醇、异丙醇 碘和碘伏 过氧化氢、过氧乙酸,化学杀菌剂医院消毒技术规范,含氯消毒剂推荐使用浓度,地面应湿式清扫，保持清洁；当有血迹、粪便、体液等污染时，应即时以含氯消毒剂拖洗(目前常用84
7、消毒液) 拖洗工具使用后应先消毒、洗净、再晾干,地面的清洁与消毒 医院感染管理规范第四十三条,化学杀菌剂使用原则 根据物品的性能和各种病原微生物的特性，选择合适的消毒剂。 严格掌握消毒剂的有效浓度、消毒时间及使用方法。 消毒剂应定期更换，易挥发的要加盖，并定期检测，调整浓度。 待消毒的物品必须先洗净、擦干。 消毒液中不能置放纱布、棉花等物，因这类物品可 吸附消毒剂降低消毒效力。 消毒后的物品在使用前用无菌生理盐水冲净，以避免消毒剂刺激人体组织。,生物安全,四、个人防护,Harmful-Contains 0.1% sodium azide Components contain natual ru
8、bber latex 叠氮化钠，分子式为NaN3,主要用于制造炸药及用作分析试剂等。如吸入、口服或经皮肤吸收，可引起中毒死亡。本品在有机合成中可有叠氮酸气体逸出，吸入中毒后出现眩晕、虚弱无力、视觉模糊、呼吸困难、昏厥感、血压降低、心动过缓等。,手 套,在进行可能直接或意外接触到血液、体液以及其他具有潜在感染性的材料或感染性动物的操作时，应戴上合适的手套。应保证: 所戴手套无漏损 戴好手套后可完全遮住手及腕部,如必要,可覆盖实验室长罩服或外衣的袖子 在撕破、损坏或怀疑内部受污染时更换手套 手套为实验室工作专用，在工作完成后应消毒、摘掉并安全处置,隔离衣 在实验室工作时，任何时候都必须穿着连体衣、
9、隔离服或工作服,面部及身体防护 为了防止眼睛或面部受到泼溅物、碰撞物或人工紫外线辐射的伤害，必须戴安全眼镜、面罩（面具）或其他防护设备,洗手/清除手部污染,手套用完后，应先消毒再摘除，随后必须洗手;在处理完感染性实验材料和动物后，以及在离开实验室工作区域前，都必须洗手 大多数情况下，普通的肥皂和水彻底冲洗对于清除手部污染就足够了 高度危险的情况下，建议使用杀菌肥皂 推荐使用脚控或肘控的水龙 如果没有条件彻底洗手或洗手不方便，用酒精或手消毒剂,生物安全,五、个人责任和安全工作条例,工作场所内（标本存放和处理处）不应该允许有食物和饮料，只能在指定地区存放（如指定存放、准备和消费食物的饭厅）实验室工
10、作区内应禁止使用化妆品（手霜除外）和处理隐形眼镜 长发应稳固地束在后面，或使用一次性发套，使头发远离物质和运转的设备（蓄须男性应遵守相同的预防措施） 如果有被设备卷入或被可感染性物质或化学品污染的任何危险，在实验室工作区内不应该佩带珠宝和宽松的衣物（如领带）,实验室工作人员和来访者接触了血液、体液或其他污染材料后，摘除手套后、使用卫生间前后、离开实验室前、进食或吸烟前、接触每一患者前后应立即洗手包括针头、玻璃等利器应在使用后立即放在耐扎容器中，尖利物容器应在内容物达到三分之二前置换所有离心机应该有封闭的盖子，旋转时不能掀开,生物安全,六、培训和健康监测,培训,安全培训计划至少要有： 消防和预备
11、状态 化学和放射安全 生物危险和传染预防 急救培训,健康监测,实验室主任应确保实验室全体工作人员接受适当的健康监测，监测的目的是监控职业获得性疾病 根据需要提供主动或被动免疫 促进实验室感染的早期检测 应禁止高度易感人群（如孕妇或免疫缺陷人员）在高危险实验室中工作 提供有效的个体防护装备和方法,生物安全,七、样本的运送,所有样本应以防止污染工作人员、患者或环境的方式运送到实验室样本应置于被批准的、安全的、防漏的容器中运送,感染性物质的运输,感染性及潜在感染性物质的运输要严格遵守国家和国际规定 减少包装受损和泄漏的可能性 减少可能造成传染的暴露 提高运输效率 应制定必要的溢出清除程序,感染性物质
12、运输基本的三层包装系统 内层容器，第二层包装以及外层包装,生物安全,八、实验室废弃物的处置,实验室废弃物的分类,医疗废物，是指医疗卫生机构在医疗、预防、保健以及其他相关活动中产生的具有直接或者间接感染性、毒性以及其他危害性的废物。-医疗废物管理条例 所有危险废弃物（包括不再需要的样本和培养物）应严格符合国家、地区法规和地方法律，收集、分离、包装、标签（例如，生物危险废弃物）、记录及处理。,在医疗废物丢弃前应考虑是否已采取规定程序对这些物品进行了有效的清除污染或消毒？ 如果没有，他们是否以规定的方式包裹，以便就地焚烧或运送到其他有焚烧设施的地方进行处理？ 丢弃已清除污染的物品时，是否会对直接参与
13、丢弃的人员，或在设施外可能接触到丢弃物的人员造成任何潜在的生物学或其他方面的危害？,高压灭菌后焚烧是最有效的废弃物处理方式医疗废弃物应使用专用容器专人运输，应张贴明显标志,医疗废物管理条例第十四条 禁止任何单位和个人转让、买卖医疗废物。 禁止在运送过程中丢弃医疗废物；禁止在非贮存地点倾倒、堆放医疗废物或者将医疗废物混入其他废物和生活垃圾。,HIV职业暴露和实验室安全防护,什么是HIV职业暴露？,HIV职业暴露是指工作人员，如实验室技术员、医生、护士、护理员、警察、监狱管理人员等，在从事艾滋病防治工作及有关工作中，意外地被HIV感染者或艾滋病人的血液、体液污染了破损的皮肤或非胃肠道粘膜，或被含有HIV的血液、体液污染了的针头及其他锐器刺破皮肤，而导致有被HIV感染可能性的情况。,职业暴露感染HIV的条件,皮肤或粘膜有伤口 有体液交换发生 要达到一定的病毒量,职业暴露后应遵循的处理原则,及时处理原则 及时报告原则 保密原则 知情同意原则,暴露发生后处理程序,怎样避免HIV职业暴露 -坚持普遍性防护原则,WHO推荐的普遍性防护原则认为，在为病人提供医疗服务时，无论是病人还是医务人员的血液和体液，也不论他们是阳性还是阴性，都应当作为具有潜在传染源加以防护。,普遍性防护原则的主要内容,谢谢大家！,
