1、高考资源网第五章、微生物与发酵工程1、微生物的类群1 细菌（1）结构：单细胞原核生物，其基本结构包括细胞壁、细胞膜、细胞质和拟核。细胞质：含核糖体，贮藏颗粒（如淀粉粒、硫粒） ，质粒（上有基因与细菌的杭药性、固氮、抗生素生成有关） 。拟核：环状 DNA 反复折叠缠绕呈棒状、哑铃状或球状，控制着细菌的主要遗传性状。（2）特殊结构：荚膜、鞭毛、芽孢（3）繁殖：二分裂（发生 DNA 分子复制）（4）菌落：可形成多种菌落（固体培养基中，肉眼可见的，具一定形态结构的子细胞群体） ，具有大小、形状、光泽度、颜色、硬度、透明度等特征是鉴定菌种的依据。2 放线菌：单细胞原核生物，多数抗生素都是由放线菌产生的。
2、3 病毒：结构：主要由核酸和衣壳构成。有些病毒外面有囊膜（由蛋白质、多糖、脂类构成）囊膜上有刺突如流感病毒。衣壳决定病毒抗原特异性。一种病毒只有一种核酸。在宿主活细胞中进行增殖（以噬菌体为例）：吸附注入核酸合成蛋白质、复制核酸装配释放2、微生物的营养、代谢和生长1 微生物的营养：碳源、氮源、生长因子、水和无机盐 C、H、O、N 占细胞干重 90%以上。（1）碳源：无机碳源(CO 2、NaHCO 3、CaCO 3等含碳无机物)有机碳源：即含碳有机物糖、脂、蛋白质、有机酸等和天然含碳物质(石油)功能：用于构成微生物的细胞物质和一些代谢产物；既是碳源能源又是一种双功能的营养物（洋葱假单胞菌能利用 9
3、0 多种含碳化合物）（2）氮源：种类：无机氮：NH 3、铵盐、硝酸盐、N 2；有机氮：复杂蛋白质(如牛肉膏、蛋白陈)、核酸、尿素、一般氨基酸将无机氮合成菌体蛋白或含氮的代谢产物(如氨基酸等)；合成微生物的蛋白质、核酸及含氮的代谢产物(如氨基酸等)（3）生长因子：概念：微生物生长不可缺少的微量有机物。种类：维生素、氨基酸、碱基、酵母膏、蛋白胨、组织提取液功能：酶和核酸的组成成分；参与代谢过程中的酶促反应。（4）培养基的配制原则：目的明确营养协调：谷氨酸生产中，当 C/N=4：1 时菌体大量繁殖，当 C/N=3：1 时谷氨酸合成增多PH 要适宜：放线菌 7.58.5 细菌 6.57.5 霉菌4.0
4、5.8 真菌 5.06.0（酵母菌 3.86.0）（5）培养基的种类：根据物理性质的不同分为：固体培养基：用于微生物的分离、计数；半固体培养基：用于观察微生物的运动、鉴定菌种；液体培养基：用于工业生产。根据化学成分分为：合成培养基：用已知成分的化学物质配成；天然培养基：用成分不明确的天然物质配成，用于工业生产根据用途分为：选择培养基：加入某种化学物质，抑制不需要的微生物生长，促进所需要微生物生长；鉴别培养基：加入指示剂或化学药品配制而成，用于鉴别微生物。实例：加入青霉素的培养基：分离酵母菌、霉菌等真菌（抑制细菌、放线菌）加入高浓度食盐的培养基：分离金黄色葡萄球菌（抑制多种细菌）不加氮源的无氮培
5、养基：分离固氮菌不加含碳有机物的无碳培养基：分离自养型微生物加入氨基嘌呤、次黄嘌呤和胸腺嘧啶核苷的培养基：分离杂交瘤细胞伊红和美蓝培养基：鉴别大肠杆菌，菌落呈深紫色，带金属光泽2 微生物的代谢：（1）微生物代谢：微生物代谢是指微生物细胞内所发生的全部化学反应。（2）微生物代谢的特点：代谢异常旺盛，对物质的转化利用快。其原因：微生物的表面积与体积比很大，有利于与外界环境进行物质交换。（3）微生物的代谢产物：微生物的代谢产物分为初级产物(合成不停；缺少不行；种类基本相同)和次级产物（种类不同；有无都行） 。初级代谢产物是生长繁殖必须的一直产生分布在细胞内如：氨基酸、核苷酸、多糖、脂类、维生素次级代
6、谢产物不是生长繁殖必须的是生长到一定阶段产生具有特异性分布在细胞内或外如：抗生素、毒素、激素、色素等（4）微生物代谢的调节：酶合成的调节a组成酶在细胞内一直存在，它的合成只受基因调控；诱导酶只有环境中存在诱导物才能合成它的合成受基因与诱导物共同控制；b酶合成调节的对象是诱导酶；调节的结果是使细胞内酶的种类增多；c酶合成调节的机制(本质)原核生物基因表达的调控，如大肠杆菌乳糖操纵子学说；d酶合成调节的意义：既保证代谢需要，又避免细胞内物质和能量浪费，增强适应性。酶活性的调节a酶活性调节的对象是酶(组成酶和诱导酶)的催化能力，调节的结果是酶量发生变化；b酶活性调节的机制通过酶与代谢过程产生物质的可
7、逆性结合进行调节；c酶活性调节的特点：快速、精确；d酶活性调节的意义：避免代谢产物积累过多。两种调节方式的区别与联系：区别：A 从调节对象看：酶合成的调节是通过酶量的变化控制代谢速率，而酶活性的调节是对已存在的酶活性进行控制，它不涉及酶量变化。B从调节效果来看：酶活性调节快速而精细；C从调节机制看，酶合成调节是基因水平调节，它调节控制酶合成；酶活性调节是代谢调节，它调节酶活性。联系：细胞内两种方式同时存在，密切配合，高效、准确控制代谢的正常进行。（5）微生物代谢的人工控制：人工控制微生物代谢的目的最大限度积累对人类有用的代谢产物。以黄色短杆菌生产赖氨酸、谷氨酸棒状杆菌生产谷氨酸为例，说明人工控
8、制微生物代谢的方法人工控制黄色短杆菌的代谢过程生产赖氨酸。由苏氨酸、赖氨酸共同积累过量会抑制天冬氨酸激酶的活性，而赖氨酸单独过量不会出现抑制的。最后落脚点是：通过诱变育种选育不能合成高丝氨酸脱氢酶的菌种作为工业微生物，达到大量生产赖氨酸的目的。人工控制谷氨酸棒状杆菌生产谷氨酸。由谷氨酸积累过量会抑制谷氨酸脱氢酶活性的特点，改变细胞膜透性，由此可大量生产谷氨酸。（6）发酵：通过微生物的培养，大量生产各种代谢产物的过程。分类：根据培养基状态分：固体发酵、液体发酵；据产物分：抗生素发酵、维生素发酵、氨基酸发酵；根据对氧的需求分：厌氧发酵：如酒精发酵、乳酸发酵；需氧发酵：如抗生素发酵、氨基酸发酵3 微
9、生物的生长：常以微生物的群体为单位来研究。微生物群体生长的规律：以细菌为例说明。测定群体生长的方法：一种是测定细菌的细胞数目，另一种是测重量。微生物群体生长规律的曲线生长曲线。（1）绘制方法：将少量的某种细菌接种到恒定容积的液体培养基中。适宜条件培养，定期取样测定培养基里的细菌群体的生长情况（以时间作横坐标，以细菌数目的对数作纵坐标得到生长曲线）（2）细菌的生长曲线：它描述了细菌群体从开始生长到死亡的动态变化过程。（3）主要时期调整期：a.细菌对新环境的短暂调整或适应过程；b.菌体特点：不分裂繁殖、代谢活跃、体积增长较快、大量合成分裂所需酶类、ATP 及其它细胞成分。c.调整期的长短与菌种、培
10、养条件等因素有关。对数期：a.该期细菌进入快速分裂阶段；b.数目增长的特点：等比数列形式增加；c.菌体特点：代谢旺盛、个体形态和生理特性比较稳定；d.应用：常作为生产用菌种和科研材料。稳定期：a 整个培养基中新增细胞数和死亡细胞数达到动态平衡。营养物质的消耗 细胞分裂速率下降 b 原因:有害代谢产物的积累,pH 变化,死亡细胞数目增加,活菌数目达到最高峰。c 菌体特点，大量积累代谢产物,特别是次级代谢产物， 形成芽孢。d 应用：获取次级代谢产物的最佳时期；适当补充营养物质，有助于延长稳定期，提高产量。衰亡期：a.细菌的死亡速率超过繁殖速率，活菌数目急剧下降b.菌体特点：细胞出现多种形态，甚至畸
11、形；有些细胞开始解体；释放代谢产物（4）实践意义：连续培养法概念：在一个流动装置中，以一定速度不断添加新培养基，同时又以同样速度不断排出老培养基。目的：保证微生物对营养物质的需要，排出部分有害代谢产物，使微生物保持较长时间的高速生长。应用：酒精、丙酮、丁醇等的生产。意义：缩短培养周期，提高设备利用率，且便于自动化管理。（5）影响微生物生长的环境因素：很多，主要是温度、pH、氧。温度：微生物生长最旺盛时的温度叫最适宜生长温度；绝大多数微生物最适宜生长温度为 2537 ；最适生长温度范围内，微生物生长速率随温度上升而加快；超过最适生长温度后，微生物生长速率急剧下降。原因：细胞内蛋白质和核酸等发生不
12、可逆破坏。pH：每种微生物最适 pH 不同；超过最适 pH，影响酶活性、细胞膜稳定性等，从而影响微生物对营养物质的吸收。氧：依据对氧的需求，微生物分为：1）好氧型微生物，例：多数细菌，大多数真菌；2）厌氧型微生物 例：某些链球菌，某些产甲烷杆菌。 3）兼性厌氧型微生物 例： 酵母菌。3、发酵工程简介1 应用发酵工程的生产实例谷氨酸发酵（1）常用菌种：谷氨酸棒状杆菌、黄色短杆菌（异养需氧） 。（2）培养基：液体培养基、天然培养基。原料：豆饼水解液、玉米浆、尿素、磷酸二氢钾、氧化钾、硫酸镁、生物素（生长因子）（3）发酵过程：罐连续培养。控制条件：温度、PH 值、溶氧、搅拌速度。谷氨酸用 Na2CO
13、3中和后，过滤、浓缩、离心分离制成味精。2 发酵工程内容： 菌种的选育、培养基的配制、灭菌、扩大培养和接种、发酵过程、产品的分离提纯。（1）菌种的选育:以谷氨酸发酵（基因突变） 、人的胰岛素（基因工程） 、单克隆抗体（细胞工程）即诱变育种、基因工程、细胞工程的方法获得菌种。（2）扩大培养是将培养到对数期的菌体分开，分头进行培养，以促使菌体数量快速增加，能在短时间里得到大量的菌体。 （扩大培养是为了让菌体在短时期内快速增殖，而发酵过程中的培养是为了获得代谢产物，目的不同采用的培养条件就有可能不同。例如：在酒精发酵过程中，扩大培养是为了促使酵母菌快速增殖，因此是在有氧条件下进行。而在发酵产生酒精的
14、过程中则必须在无氧条件下进行以获得大量的酒精。 ）（3）发酵过程：随时取样检测培养液中的细菌数目、产物浓度及时添加必需的培养基组分，严格控制温度、PH、溶氧、通气量与转速等条件。谷氨酸发酵中，PH 呈酸性时会产生乙酰谷氨酰胺；当溶氧不足时，产生乳酸或琥珀酸。（4）分离提纯：菌体：过滤、沉淀；代谢产物：蒸馏、萃取、离子交换。3发酵工程的应用：1医药工业：(1)直接生产多种药品，如抗生素、维生素、动物激素、药用氨基酸(2)与基因工程和细胞工程结合来生产药品，如：人生长激素、重组乙肝疫苗、某些种类的单克隆抗体、白细胞介素-2、抗血友病因子等。生长激素释放抑制因子人脑激素，用于治疗肢端肥大症。2.食品
15、工业： (1)使传统的发酵产品质量和产量得到提高如：啤酒、果酒、食醋。(2)生产各种食品添加剂，如：酸味剂(L-苹果酸、柠檬酸、乳酸)、鲜味剂(肌苷酸、谷氨酸)、色素(红曲素、-胡萝卜素)、甜味剂(高果糖浆、甜菜糖)。(3)解决粮食问题的重要途径，如生产单细胞蛋白微生物菌体。来源:K选修全一册典型最新例题例一：（09.宁夏、辽宁高考） 【生物选修 1 生物技术实践】（1 ）在大肠杆菌培养过程中，除考虑营养条件外，还要考虑_、_ 和渗透压等条件。由于该细菌具有体积小、结构简单、变异类型容易选择、_、_ 等优点，因此常作为遗传学研究的实验材料。（2）在微生物培养操作过程中，为防止杂菌污染，需对培养
16、基和培养皿进行_（消毒、灭菌） ；操作者的双手需要进行清洗和_；静止空气中的细菌可用紫外线杀灭，其原因是紫外线能使蛋白质变性，还能_ 。（3）若用稀释涂布平板法计数大肠杆菌活菌的个数，要想使所得估计值更接近实际值，除应严格操作、多次重复外，还应保证待测样品稀释的_。（4）通常，对获得的纯菌种还可以依据菌落的形状、大小等菌落特征对细菌进行初步的_。（5）培养大肠杆菌时，在接种前需要检测培养基是否被污染。对于固体培养基应采用的检测方法是_。（6）若用大肠杆菌进行实验，使用过的培养基及其培养物必须经过_ 处理后才能丢弃，以防止培养物的扩散。例二：（09.辽宁） 【生物选修 3 现代生物科技专题】 右
17、图为哺乳动物的胚胎干细胞及其分化的示意图。请回答：（1 ）胚胎干细胞是从动物胚胎发育至_期的内细胞团或胎儿的_中分离得到的一类细胞。（2）图中分化程度最低的干细胞是_。在体外培养条件下，培养液中加入_因子，可诱导该种干细胞向不同类型的组织细胞分化。（3)在机体内，皮肤干细胞分化成皮肤细胞是机体细胞中基因_的结果。（4 ）某患者不能产生正常的白细胞，通过骨髓移植可以达到治疗的目的，骨髓的治疗的实质是将上图的_细胞移植到患者体内。（5 ）若要克隆某种哺乳动物，从理论上分析，上述红细胞、白细胞神经细胞中不能选用作为供体的细胞是成熟的_，其原因是_。（6 ）若某药物可抑制肝肿瘤细胞 NDA 的复制，使
18、用该药物可使肝肿瘤细胞停留在细胞周期的_期。（7）在制备单克隆抗体过程中的细胞融合阶段，用_细胞与骨髓细胞融合，经多交筛选最终得到能分泌_的杂交瘤细胞。例三 （09、山西）大面积烧伤病人由于严重脱水，使血钾升高，细胞外液渗透压升高，此时血液中（ ）A抗利尿激素浓度增加，醛固酮浓度减少 B抗利尿激素浓度减少，醛固酮浓度增加C抗利尿激素浓度增加，醛固酮浓度增加 D抗利尿激素浓度减少，醛固酮浓度减少【解析】严重脱水，细胞外液渗透压升高，刺激下丘脑渗透压感受器，下丘脑神经细胞分泌，并由垂体释放抗利尿激素浓度增加，促进肾小管和集合管对水的重吸收，减少尿量。血钾升高刺激肾上腺，使醛固酮分泌增加，促进肾小管
19、和集合管对钠的重吸收和对钾的分泌。例四.（07、浙江） 糖尿病患者容易出现( )A 细胞内液增多 B 组织液增多 C.体液增多 D.尿量增多 例五.（09、湖北）当人体处于饥饿状态时（ ）A 肾上腺素分泌减少,胰高血糖素分泌增加 B 肾上腺素分泌增加,胰高血糖素分泌增加C 肾上腺素分泌减少,胰高血糖素分泌减少 D 肾上腺素分泌增加,胰高血糖素分泌减少例六.（09、江苏）下列关于抗原的正确叙述是（ ）A抗原只有突破前两道防线，才会引起特异性免疫 B抗原能与抗体或效应 B 细胞结合，发生免疫反应C 机体自身的组织细胞不可能成为抗原 D 抗原能与相应的抗体或效应 T 细胞结合，发生特异性免疫反应【解
20、析】有的抗原需经过吞噬细胞的处理，有的抗原直接刺激 B 细胞而引起特异免疫反应。机体有时在免疫时会把自身正常的组织细胞误认为抗原引起免疫疾病 例七 （2004 年高考天津卷第 5 题）关于下丘脑功能的叙述，正确的是（ ）可参与血糖平衡的调节 有调节躯体运动的高级中枢可合成和分泌促甲状腺激素释放激素 垂体通过下丘脑控制性腺的生长发育 A. B. C. D. 【解析】下丘脑可参与血糖平衡的调节，当血糖浓度升高时，可以刺激下丘脑的某一区域，例八 （2005全国卷2）右图表示在适宜的温度、水分和 CO2 条件下，两种植物光合作用强度的变化情况。下列说法错误的是（ ）A、当光照强度增加到一定程度时，光合
21、作用强度不再增加，即达到饱和B、C3 植物比 C4 植物光合作用强度更容易达到饱和C、C4 植物比 C3 植物光能利用率高D、水稻是阴生植物，玉米是阳生植物例九、 （09、重庆）生长于弱光照条件下的植物，当提高 CO2浓度时，其光合作用速度并未随之增加，主要原因在于( )A蒸腾作用过慢 B光反应速率不高 C暗反应速率过快 D呼吸作用过快【解析】在光合作用的过程中，CO 2的固定还原是需要消耗能量的，这些能量来源于光反应阶段。在光反应阶段的速率不高的情况下，尽管提高了 CO2的浓度，但由于 ATP 与 NADPH 的供应不充分，光合作用速率并不能随之提高。例十 （09、天津）C 4植物叶片内进行
22、光合作用的细胞是( )A栅栏组织 B海绵组织 C保卫细胞 D维管束鞘细胞和叶肉细胞【解析】C 4植物的维管束鞘细胞和叶肉细胞内均含有叶绿体，都能进行光反应，只是叶肉细胞内进行 CO2固定后，进入维管束鞘细胞再进行卡尔文循环（暗反应） 。例十一、 （09、四川）光合作用包括光反应和暗反应两个阶段，下列参与暗反应必需的物质是（ ）A. H20、C0 2、ADP。 B CO2、NADPH、ATP 。 C H20、C0 2、ATP 。 D NADPH、H 20、ADP【解析】 命题目标 光合作用的具体过程。光合作用的过程的光反应和暗反应两个阶段比较：光反应 暗反应场所 叶绿体的类囊体薄膜 叶绿体基质条
23、件 光，酶 酶物质变化H2O H + O2 CO2 + C5 C3C3 +H (CH2O)n能量变化光能转变为电能，再转变成 ATP 活跃的化学能光反应生成的 ATP 提供能量，最终变成糖类等有机物中稳定的化学能注： 表中H指的是 NADPH例十二 （09、天津模拟）自生和共生固氮微生物可以将( )A 大气中的 N2转化为 NH3 B 大气中的 N2转化为 NO3-C 土壤中的 NH3转化为 NO3 D 土壤中的 NO3-转化为 N2【解析】固氮微生物有两类，一类是共生固氮微生物，如根瘤菌；一类是自生固氮微生物，如圆褐固氮菌。它们都是将大气中的氮(N 2)还原成氨(NH 3)。例十三、 （09
24、、海南）要提高农作物的光合作用效率，人们开展研究的最大领域应定位于( )A光能转换成化学能的过程 BCO 2转变成 C3的过程C光能转换成电能和 C3转变成葡萄糖的过程 D能量转换和物质变化的过程例十四、 （09、广东）下列不属于动物细胞工程应用的是( )A 大规模生产干扰索用于抵抗病毒引起的感染 B 为大面积烧伤的病人提供移植的皮肤细胞C 大规模生产食品添加剂、香料等 D 利用胚胎移植技术，加快优良种畜的繁殖例十五、 （08、山东）在污水处理时，人们设计出一种膜结构，将有毒重金属离子阻挡在膜的一侧，以降低有毒重金属对水的污染，这是模拟了生物膜的( )A自由扩散功能 B流动性 C主动运输 D选
25、择透过性【解析】生物膜是具有选择透过性的膜，这种膜能使水分子自由通过，膜要选择的离子和小分子物质可以通过，其他离子、小分子物质和大分子物质则不能通过。处理污水时，科学家设计的一种膜，就是模拟了生物膜的选择透过性。例十六、 （07、全国卷 2）关于动物细胞培养的下列叙述中正确的是( )A 动物细胞培养不能获得有重要价值的蛋白质生物制品B 动物细胞培养前要用胰蛋白酶处理使细胞分散 C细胞遗传物质的改变发生于原代培养过程中 D培养至 50 代后能继续传代的细胞叫细胞株例十七、 （08、浙江）关于杂交瘤细胞的不正确叙述是( )A 有双亲细胞的遗传物质 B 细胞融合过程不需诱导C 可分泌特异性抗体 D 体外培养条件下可大量繁殖例十八、 （08、山东）下面对真核生物基因的结构的认识中，不正确的是( )A 编码区能够转录为相应的信使 RNA，经加工参与蛋白质的合成B在非编码区有 RNA 聚合酶结合位点C真核细胞与原核细胞的基因结构完全一样 D内含子不能够编码蛋白质序列例十九.（08、宁夏）基因是由( )A编码区和非编码区两部分组成 B外显子和内含子两部分组成C 与 RNA 聚合酶结合位点、外显子、内含子组成 D 与 RNA 聚合酶结合位点、外显子组成w.w.w.k.s.5.u.c.o.m
