1、 绿叶中色素的提取和分离实验改进、探索武威二中 何秀芳1、实验在教材中所处的地位与作用本实验是高中生物必修一分子与细胞中光合作用一节的内容,是高中生物教学中的一个重要实验,做好绿叶中色素的提取和分离实验,有助于学生理解光合色素的种类和作用、加强学生对光合作用的理解和掌握,培养学生提取、分离、观察叶绿体中色素的技能。 2、实验目的:1、提取和分离绿叶中的色素。2、探究绿叶中色素的种类。三、实验原理:1、提取色素:绿叶中的色素能够溶解在有机溶剂无水乙醇中,则可用无水乙醇提取色素。2、分离色素:绿叶中的色素不只一种,它们都能溶解在层析液中,而且在层析液中的溶解度不同:溶解度高随层析液在滤纸上扩散得快
2、;溶解度低随层析液在滤纸上扩散得慢。则根据不同的扩散速度,把色素分离开。四、原实验步骤五、实验创新与改进之处1、提取绿叶中的色素不足之处:提取色素使用研磨法,加 10ml 无水乙醇,得到提取液色素含量不高,并且点样时容易印染(如图 1) ,导致色素分离不明显;且实验中研磨之后还要过滤,步骤繁琐,所需器材较多。改进:提取色素时加 5ml 无水乙醇即可,得到的提取液可不用过滤直接点样,这样步骤简单,节省时间并且不影响实验效果,只不过这一操作放到第二步较好。2、制备滤纸条改进之处:滤纸条剪去两角之后,剩下的长度在 0.5CM 左右为宜,底边左右两侧剪去两角时最好夹角一致这样色素在滤纸上扩散的才会更均
3、匀。 (如图2)图 1 图 23、画滤液细线不足之处:滤液细线要求“细、直、齐” ,用毛细吸管加大了难度,毛细吸管很细易断,而且画滤液细线时,线画得较粗且不直,很难符合要求。改进:直接用盖玻片蘸取提取液在铅笔线处拓印,这样干了再在原处拓印23 次,降低难度,且色素含量较高。4、层析液 成分:(1)石油醚、丙酮、苯 (2)石油醚、二甲苯、苯、 (如图3) (挥发性强,有刺激性气味,而且有毒)(3)汽油(如图 4)图 3 图 45、分离色素装置:(1)用烧杯及培养皿的装置封闭不严,有毒物质易散发出来,对学生的身心健康不利。(2)用试管密封层析装置,又不便于装取入滤纸条和加层析液,加层析液的量也很难
4、控制。(3)用小试剂瓶作为分离色素装置。将滤纸条装入试剂瓶后,在密闭条件下进行层析观察和层析液的回收。 (如下图)六、实验材料用具新鲜的绿叶(如菠菜的绿叶)干燥的定性滤纸,尺子,铅笔,天平,研钵,剪刀,药勺,量筒,盖玻片,小试剂瓶,镊子。无水乙醇,层析液(20 份石油醚、2 份丙酮和 1 份苯混合而成,也可把丙酮换成二甲苯) ,二氧化硅,碳酸钙。七、实验步骤 1.制备滤纸条:取一干燥的定性滤纸,将滤纸剪成长 6cm、宽 1cm 的滤纸条,在滤纸条一端剪去两角。剪后中间剩下 0.5cm 左右为宜。2.提取色素: 菠菜叶用滤纸吸干表面水分,去掉大叶脉,称取 5 克,剪碎,放 入研钵中,加少许 Si
5、O2 和 CaCO3 装入试管中,再加入 5ml 无水乙醇,充分研磨成糊状。3.画滤液细线:用盖玻片一侧蘸取研磨液在铅笔线处拓印,等干了再在原处拓印 23 次,每次所拓印必须重叠。4.分离色素: 将适量层析液装入小试剂瓶中,液面低于 1cm,用镊子将滤纸条(有滤液细线的一端朝下)轻轻插入层析液中,盖上瓶盖。5.观察与记录:观察试剂瓶内滤纸条上出现了几条色素带,以及每条色素带的颜 色、宽窄并记录结果。八、实验效果实验改进后步骤少,操作容易,节省材料和药品,提取液色素含量高,实验易于成功(如下图) ;用自制层析装置进行层析,操作简单,装置密闭性好,有毒层析液释放少,减少学生与有毒物质的接触,对学生的身心健康很有好处,还可及时回收层析液。九、自我评价此实验通过改进:1、实现了化难为易,色素的提取和画滤液细线更容易进行;2、材料和药品消耗减少,器具准备减少,符合节约的原则;3、通过减少有毒物质的释放,加强药品的回收,改善了实验环境,符合绿色环保的要求。因此我觉得改进后的实验有推广的价值。