1、综合药学实验报告研究药物： 盐酸普萘洛尔研究成员： 陈重均、朱俊峰、陈厚柳、王焕威 研究单位： 浙江大学药学院本科教学实验中心 试验起止日期：2011.3.3 2011.6.10目录一、盐酸普萘洛尔药学研究资料综述（药学资料 7）二、盐酸普萘洛尔生产工艺的研究资料及文献资料（药学资料 8）三、盐酸普萘洛尔注射液处方及工艺的研究资料及文献资料（药学资料 8）四、盐酸普萘洛尔质量研究工作的试验资料及文献资料（药学资料10）五、盐酸普萘洛尔注射液质量研究工作的试验资料及文献资料（药学资料 10）六、盐酸普萘洛尔检验报告书（药学资料 12）七、盐酸普萘洛尔注射液检验报告书（药学资料 12）八、盐酸普萘
2、洛尔主要药效学试验资料及文献资料（药理毒理研究资料 17） 申请分类：新药申报临床试验注册分类： 第二部分 药学研究资料 编号：7药 品 名 称：盐酸普萘洛尔资料项目名称：药学研究资料综述研究机构名称（加盖公章）：浙江大学药学院本科教学实验中心研究机构地址：浙江省杭州市西湖区余杭塘路 388 号研究机构邮编：310058研究机构电话：0571-88208406研究机构主要研究者姓名（签字）：姚彤炜试验者姓名： 王焕威、陈重均、朱俊峰、陈厚柳试验起止日期：2011.3.32011.6.10原始资料保存地点：浙江大学药学院实验中心申请人机构联系人姓名：陈厚柳申请人机构联系人电话：137322165
3、42申请人机构联系人 E-mail:zju_申请人机构名称（公章）： 浙江大学药学院药学研究资料综述1. 品种概况药品名称：盐酸普萘洛尔注射液 注册分类：化学药品6类 产品功效：普萘洛尔为 肾上腺素受体阻断药，阻断心肌的 受体，减慢心率，抑制心脏收缩力与房室传导，循环血流量减少，心肌氧耗量降低。临床上用于治疗多种原因所致的心律失常，如房性及室性早搏、窦性及室上性心动过速，心房颤动等，但室性心动过速宜慎用。1.1 产品研发状况简介：1.2 社会经济效益分析：2. 主要研究成果总结2.1 质量标准研究及起草说明2.1.1 盐酸普萘洛尔质量研究与标准制订2.1.2 盐酸普萘洛尔注射液的质量研究与标准
4、制订2.2 剂型选择依据2.3 制备工艺及研究内容2.3.1 制备工艺2.3.2 制备工艺选择3. 参考文献申请分类：新药申报临床试验注册分类： 第二部分 药学研究资料 编号：8药 品 名 称：盐酸普萘洛尔资料项目名称：生产工艺的研究资料及文献资料研究机构名称（加盖公章）：浙江大学药学院本科教学实验中心研究机构地址：浙江省杭州市西湖区余杭塘路 388 号研究机构邮编：310058研究机构电话：0571-88208406研究机构主要研究者姓名（签字）：姚彤炜试验者姓名： 王焕威、陈重均、朱俊峰、陈厚柳试验起止日期：2011.3.32011.6.10原始资料保存地点：浙江大学药学院实验中心申请人机
5、构联系人姓名：陈重均申请人机构联系人电话：13732216542申请人机构联系人 E-mail:zju_申请人机构名称（公章）： 浙江大学药学院生产工艺的研究资料及文献资料一、品种基本情况 通用名称： 盐酸普萘洛尔 英文名称：propranolol hydrochloride 汉语拼音：yansuan punailuoer 化学名称：1-异丙氨基-3-(1-萘氧基)-丙醇盐酸盐 化学结构式：分子式：C16H21NO2HCl 分子量：295.81 基本的理化性质：白色或类白色结晶性粉末，无臭，味微甜后苦，可溶于水或乙醇，微溶于氯仿。 二、合成工艺路线及选择依据 根据文献报道，目前普萘洛尔的合成路
6、线有 8 条，但主要有只有以下 4 条，后几种路线的原料均为较难获得的的化合物，因而不做考虑: 1、合成路线一OHOClHONHOO O H2N CH3CH31 2 355 HCl4合成路线二O O3NH3OOHNH2 CH3OHCOOHN CH3HC H2,Pd/C 奈奈奈奈789合成路线三CHCH3CH3H2N Mg Br2 CHCH3CH3NHBrMgO O34 10奈奈奈奈合成路线四CHCH3CH3H2N4CH3COOH CHCH3CH3NHH3COC11 12O O3 奈奈奈奈路线的确定：选择路线时我们优先选择药化实验室中已有的或容易合成的试剂为原料，一些操作后处理和反应时间等相关因
7、素也采取简便易行的。从反应式里我们可以看到3这个化合物(环氧丙基醚)都是必不可少的。因而反应路线一、三、四在原理上基本是相同的。而从3合成普奈洛尔,采用路线一据文献报道即可达到 80%以上产率。相较后两种少一步操作，因而采用路线一位反应路线。三.反应路线3.1 工艺反应路线OHOClHONHOO O H2N CH3CH31 2 355 HCl4四、工艺操作过程 4.1 合成路线一的反应 4.1.1 工艺配比 名称 规格 投料量a萘酚 g 25.017g氢氧化钠 g 20g乙醇 ml 适量环氧氯丙烷 ml 68ml三乙胺 ml 1ml异丙胺 ml 42ml4.2.2 操作过程 全流程实验方法：(
8、1)取 l 一萘酚 25019g、环氧氯丙烷 68ml(质量比 1：5)作为起始原料，加催化剂三乙胺20 滴投入到装有回流冷凝管 250mL 圆底烧瓶中，加热，水浴控温 85，保持温度反应6h，薄层跟踪至 1-萘酚反应完毕。降温到 40，加入 100 克 20NaOH 溶液，振荡混匀，保持体系温度为 50，反应 20min 左右。充分静置分层，放掉碱层，有机层加入 50mL 去离子水充分搅拌，慢慢加入稀盐酸(浓盐酸：水=1：5)约 05mL 充分中和到 pH 为 7。静置分层，收集有机层，用 50mL 的去离子水再洗涤一次，静置分层，收集有机层。用旋转蒸发仪将有机层减压蒸馏，彻底回收未反应的氧
9、氯丙烷(体系温度不要超过 80)。得到第一步反应产物，称得重量 32.81mg，然后计算产物收率为 94.4%。(2)将上步反应所得的 3281g 中间体全部用于下一步反应，再加入异丙胺 42ml。控制温度 404550，体系密封，按梯度温度分别反应 422h，薄层层析跟踪至反应完毕。慢慢升温，用旋转蒸发仪减压蒸馏回收未反应的异丙胺，彻底回收异丙胺。加入 10ml 甲苯充分搅拌至凝固，冷却过夜，加入酒精洗涤抽滤得白色固体，干燥后称重得 20.84g，则该步实际收率为 43.0%。(3)将所得的白色色固体 5.005g 用于第三步反应、酒精投入到装有回流冷凝管的 150mL 的圆底烧瓶中，加入颗
10、粒状活性炭，体系密封，加热回流，趁热过滤，滤液慢慢滴加浓盐酸至 pH 为 2，冷却结晶，过滤，晶体用适量的酒精洗涤，得到白色的晶体，干燥得成品，称量重量 6.000g g，计算产物收率 99.7%，已满足纯度要求因而不再做重结晶。五实验结果与讨论 5.1 收率 m 总=57.219g，m 表面皿=36.378g，m 产物=20.841g 产率 = 实际获得质量/理论产量=20.841g/51.437g=40.6%5.2 结构确认所需的资料、HPLC 纯度等 5.2.1 TLC 检查(现象及结果) 第一步合成点板结果 展开剂:石油醚: 乙酸乙酯=8:1显色剂: FeCl3加入 NaOH 重新环合
11、后展开剂:石油醚: 乙酸乙酯=8:1第一步乙酸乙酯萃取结果第二步合成点板的结果5.2.2 熔点测定熔点测定为 162.3163.4，熔程较短说明样品纯度高。5.2.3 HPLC 的纯度测定我们对样品进行了面积归一化法的计算，得出了样品的纯度为 99.7%99%，但整个峰的峰型拖尾较严重，我们试着调整溶液的极性来改善这一现象(详见药分部分)。5.3 讨论 5.3.1 文献中，第一步合成中间产物 3(萘氧基)1,2环氧丙烷的较佳合成工艺条件: 萘酚(34g,0.24mol)、环氧氯丙烷(75ml,0.96mol)的投料比 1:4(摩尔比)，催化剂三乙胺与 萘酚的投料比 0.5mL:14.4g(0.
12、0035mol:0.1mol)，NaOH(20g,0.5mol)，反应温度 8085，反应时间 6h。产品纯度 91，产率 96.8。 为了保证我们产物产率，我们适当的增加了环氧氯丙烷的比例改为(1:5)反应，从点板我们可以看出环氧氯丙烷确实在高温下易发生开环反应，在点板中出现了异于原料产物的点。从以往的实验中我们了解到低温是可以减少这种开环的发生的但是会大大降低反应速率，而开环的产物也可以通过加入 NaOH 重新环合，因而我们没有采纳低温的方法。5.3.2 实验中我们曾经将在盐酸普萘洛尔落入水中，由于样品的水溶性，使得相应水溶性杂质也混入，随后我们采用酸溶碱沉法可用于提取碱性有机物，普萘洛尔
13、的二乙基胺基侧链有碱性与盐酸成盐可在水中进行溶解，加入强碱 NaOH 后重新反应为普萘洛尔并析出。此时用乙酸乙酯萃取，收集有机相，并重复一次，抽滤掉溶剂后再次成盐。从这一次教训中，我们学到了很多实验上的失误是可以补救的，处理得当可以节约较多工时以及成本。 5.3.3 合成的普萘洛尔有微红色，洗涤成盐后呈白色粉末状，实验过程中可用活性炭进行脱色，由于本身考虑合成的量较大，在抽滤洗涤环节我们较注重样品的纯度，洗脱次数以及要求较高。这可能是我们实验最终产率较低的重要原因之一。5.3.4 熔点测定文献上的范围为 162164，显然我们所测的落在该范围内，且熔程只有1.1由此我们实验中没有再对样品进行重
14、结晶而直接用 HPLC 进行测定而测定的结果也符合了我们的预期。 5.3.5 实验操作的 (2)中温度阶梯反应后，回收异丙胺后用二甲苯凝固，考虑实验室中无二甲苯相当难获得，而其与甲苯的性质对于该反应影响不大，参考了学长学姐意见后选用甲苯为凝固剂。5.3.6 盐酸盐易吸潮，需真空干燥，密闭保存，可考虑置入密闭盒中并放入干燥剂。 六.参考文献张英 盐酸普萘洛尔的合成工艺研究 浙江工业大学硕士学位论文 2008 年 朱宝泉等 新编药物合成手册 化学工业出版社 2003 年版 李安良 药物化学 高等教育出版社(第二版) 申请分类：新药申报临床试验注册分类： 第二部分 药学研究资料 编号：8药 品 名
15、称：盐酸普萘洛尔注射液资料项目名称：处方及工艺的研究资料及文献资料研究机构名称（加盖公章）：浙江大学药学院本科教学实验中心研究机构地址：浙江省杭州市西湖区余杭塘路 388 号研究机构邮编：310058研究机构电话：0571-88208406研究机构主要研究者姓名（签字）：姚彤炜试验者姓名： 王焕威、陈重均、朱俊峰、陈厚柳试验起止日期：2011.3.32011.6.10原始资料保存地点：浙江大学药学院实验中心申请人机构联系人姓名：陈厚柳申请人机构联系人电话：13732216542申请人机构联系人 E-mail:zju_申请人机构名称（公章）： 浙江大学药学院目 录1 处方组成与制备工艺1.1 处
16、方组成1.2 制备工艺2 工艺流程3 处方依据4 原辅料在处方中的作用5 原辅料来源及质量标准盐酸普萘洛尔注射液生产工艺的研究资料及质量标准1 处方组成与制备工艺1.1 处方组成原 辅 料 用 量盐酸普萘洛尔 1g枸橼酸 适量（调节 PH 至 3.5 左右）注射用水 加至 1000ml共制成 5ml 盐酸普萘洛尔注射液 200 支1.2 制备工艺称取盐酸普萘洛尔1.0029g于烧杯，加注射用水一定量搅拌至溶解，再加注射用水至接近总量（900ml左右） ，用10%的枸橼酸调节PH至3.5左右，添加注射用水至总量，加入活性炭，然后粗虑。过滤（022um滤膜过滤） ，灌封。用100摄氏度灭菌30分钟
17、即得。然后对灌封好的安瓿瓶进行检漏，然后取一定量去进行质量检查至符合药典要求。2.工艺流程配 液主 药调PH3.5加 注 射 用 活 性 炭 吸附 滤 过灌 封 灭 菌检 漏注 射 剂微 孔 滤 膜滤 过质 量 检 查3.处方依据对于小体积溶液型注射液辅料方面主药需要增溶剂、助溶剂、PH 调节剂、防腐剂、抗氧剂、等渗调节剂等。主药盐酸普萘洛尔能溶解于水中，且制备的盐酸普萘洛尔的注射液浓度较小，故不需要加增加溶解度的增溶剂和助溶剂。盐酸普萘洛尔在酸性条件下稳定性较好，故不需要增加抗氧剂，同时由于制备的注射液不用于人体故不需要进行等渗调节。与偶遇盐酸普萘洛尔在中性和碱性条件下易分解，不稳定故增加
18、PH 调节剂枸橼酸来调节PH 至 3.5 左右（药典要求 3-4） 。4 原辅料在处方中的作用 盐酸普萘洛尔 主药 枸橼酸 PH调节剂 注射用水 溶剂 5原辅料来源及质量标准 原料由本组成员自行合成，辅料（枸橼酸）由药剂实验室提供，质量均符合药典规定。主要参考文献 1 国家药典委员会. 中华人民共和国药典 2005 年版二部申请分类：新药申报临床试验注册分类： 第二部分 药学研究资料 编号：10药 品 名 称：盐酸普萘洛尔资料项目名称：质 量 研 究 工 作 的 试 验 资 料研究机构名称（加盖公章）：浙江大学药学院本科教学实验中心研究机构地址：浙江省杭州市西湖区余杭塘路 388 号研究机构邮
19、编：310058研究机构电话：0571-88208406研究机构主要研究者姓名（签字）：姚彤炜试验者姓名： 王焕威、陈重均、朱俊峰、陈厚柳试验起止日期：2011.3.32011.6.10原始资料保存地点：浙江大学药学院实验中心申请人机构联系人姓名：王焕威申请人机构联系人电话：13732216542申请人机构联系人 E-mail:zju_申请人机构名称（公章）： 浙江大学药学院质 量 研 究 工 作 的 试 验 资 料1 样 品 来 源盐 酸 普 萘 洛 尔 的 原 料 药 在 浙 江 大 学 药 学 院 药 物 化 学 实 验 中 心 合 成 ，批 号 为 20110315。2 含 量 限 度
20、本 品 含 C16H21NO2HCl 应 不 少 于 标 示 量 的 99.0%。3 性 状本 品 为 白 色 的 结 晶 状 粉 末 ； 无 臭 。 在 水 或 乙 醇 中 溶 解 ， 在 三 氯 甲 烷中 微 溶 。4 鉴 别 紫 外 吸 收 光 谱 法 ： 取 本 品 ， 用 甲 醇 溶 解 制 成 每 1ml 中 含 20 g 的溶 液 ， 照 紫 外 -可 见 分 光 光 度 法 测 定 ， 按 药 典 规 定 在 290nm 的 波 长 处 有最 大 吸 收 ， 测 得 本 品 在 292nm 有 最 大 吸 收 。 见 图 10-1。5 检 查本 品 的 有 关 物 质 与 分
21、解 产 物 检 查 选 用 高 效 液 相 色 谱 法 测 定 。5.1 仪器和色谱条件仪 器 ： Agilent Technologies 高 效 液 相 色 谱 仪 ； UV 检 测 器 。色 谱 条 件 ： 色 谱 柱 ： 十 八 烷 基 硅 烷 键 合 硅 胶 Agilent (1504.6mm,5m)； 流 动 相 ： 甲 醇 -0.02mol/L 磷 酸 二 氢 钾 缓 冲 液（ 50： 50） ； 流 速 ： 1ml/min ； 柱 温 ： 20.8 ； 检 测 波 长 ： 292nm； 进样 量 ： 20l。5.2 流动相的选择参 考 部 分 文 献 后 ， 流 动 相 可 以
22、 选 择 ： 乙 腈 -水 -硫 酸 （ 55:45:0.1） ；甲 醇 -0.02mol/L 磷 酸 二 氢 钾 缓 冲 液 （ 50： 50） 。 经 流 动 相 比 例 调 整 试 验和 多 种 因 素 综 合 考 虑 ， 最 终 决 定 采 用 甲 醇 -0.02mol/L 磷 酸 二 氢 钾 缓 冲液 （ 50： 50） 为 本 品 的 有 关 物 质 检 查 和 含 量 测 定 的 流 动 相 较 为 适 宜 。5.3 方法的专属性：取 空 白 溶 剂 （ 即 流 动 相 ） 、 合 成 中 间 体 甲 萘 酚 和 普 萘 洛 尔 溶 液 各20 l， 分 别 注 入 高 效 液
23、相 色 谱 仪 ， 记 录 色 谱 图 。 另 取 盐 酸 普 萘 洛 尔 样品 适 量 ， 配 成 2mg/ml、 3mg/ml 溶 液 ， 按 上 述 色 谱 条 件 进 行 HPLC 测 定 。另 取 盐 酸 普 萘 洛 尔 样 品 适 量 采 用 碱 破 坏 性 实 验 ， 然 后 进 行 HPLC 测 定 。以 上 各 溶 液 所 得 色 谱 图 见 图 10-2（ A-F） 。5.4 有关物质的检查5.4.1 方法：取 盐 酸 普 萘 洛 尔 对 照 品 (对 照 品 为 样 品 经 试 验 室 重 结 晶 所 得 )和 样品 适 量 ， 精 密 称 定 ， 用 流 动 相 配 成
24、 1mg/ml 的 溶 液 。 20L 注 入 高 效 液 相色 谱 仪 ,记 录 色 谱 图 至 主 成 分 峰 保 留 时 间 的 7 倍 , 样 品 测 定 液 如 显 示 杂质 峰 ， 量 取 各 杂 质 峰 峰 面 积 ， 单 个 杂 质 峰 面 积 不 得 超 过 对 照 液 主 峰 面 积的 0.5 倍 (1.0%),各 杂 质 峰 面 积 之 和 应 不 得 大 于 对 照 液 色 谱 图 中 主 成 分峰 面 积 2 倍 (1.5%)。5.4.2 样品测定：取 盐 酸 普 萘 洛 尔 对 照 品 与 样 品 上 述 方 法 进 行 高 效 液 相 色 谱 测 定 ， 记录 图
25、 谱 ， 测 定 结 果 见 图 10-3（ A-B） 和 表 10-1。表 10-1 有关物质的 HPLC 法检查结果样品批号 总杂质（%） 最大杂质（%）20110315 0.10 0.035.5 结论在 上 述 色 谱 条 件 下 本 品 中 有 关 物 质 可 达 到 良 好 的 分 离 ， 且 专 属 性 符合 要 求 ， 本 法 可 用 于 盐 酸 普 萘 洛 尔 原 料 药 中 有 关 物 质 检 查 。6 含 量 测 定6.1 方 法 的 筛 选根 据 相 关 文 献 查 询 ， 原 料 药 含 量 测 定 方 法 研 究 结 果 采 用 HPLC 法 测定 。6.2 色 谱
26、条 件色 谱 柱 ： 十 八 烷 基 硅 烷 键 合 硅 胶 Agilent (1504.6mm,5m)； 流动 相 ： 甲 醇 -0.02mol/L 磷 酸 二 氢 钾 缓 冲 液 （ 50： 50） ； 流 速 ： 1ml/min ； 柱 温 ： 20.8 ； 检 测 波 长 ： 292nm； 进 样 量 ： 20l； 理 论 塔 板 数 按 盐酸 普 萘 洛 尔 峰 计 算 不 低 于 500， 盐 酸 普 萘 洛 尔 峰 与 相 邻 杂 质 峰 的 分 离 度符 合 要 求 。6.3 重 复 性 实 验取 盐 酸 普 萘 洛 尔 对 照 品 约 10mg 置 10ml 容 量 瓶 中
27、， 加 入 流 动 相 溶 解并 稀 释 至 刻 度 ， 滤 过 后 连 续 进 样 6 次 ， 测 定 峰 面 积 ， 计 算 RSD 为1.89%。表 10-2 盐酸普萘洛尔重复性实验次数 1 2 3 4 5 6 RSD(%)峰面积24492.9 24938.7 24039.9 24325.1 25167.6 24166.8 1.89%6.4 线 性 关 系 考 察取 盐 酸 普 萘 洛 尔 对 照 品 适 量 ， 精 密 称 定 ， 用 流 动 相 稀 释 成10mg/ml 的 对 照 溶 液 。 用 移 液 管 取 对 照 溶 液0.80、 0.90、 1.00、 1.10、 1.20
28、ml， 分 别 置 于 10ml 容 量 瓶 中 ， 加 流 动相 至 刻 度 ， 摇 匀 。 取 20 l 进 行 测 定 ， 记 录 色 谱 图 。 结 果 表 明 ， 盐 酸 普萘 洛 尔 在 0.81.2mg/ml 浓 度 范 围 内 面 积 与 浓 度 呈 现 良 好 的 线 性 关 系 ， 回归 方 程 为 y = 22640x + 821.86， r = 0.9996。表 10-3 盐酸普萘洛尔线性关系考察C(mg/mL) 0.8 0.9 1 1.1 1.2A 标 / A 内 18945.5 21115.2 23576.1 25696.1 27974.90.8 0.85 0.9
29、0.95 1 1.05 1.1 1.15 1.2150001700019000210002300025000270002900031000浓度（mg/mL ）盐酸普萘洛尔标准品峰面积图 10-4 盐酸盐酸普萘洛尔线性关系曲线6.5 稳 定 性 实 验取 含 量 测 定 项 下 同 一 份 溶 液 ， 分 别 在 0， 2， 4， 6， 8h 测 定 ， 记 录峰 面 积 ， RSD 为 1.56%。表 10-4 盐酸普萘洛尔稳定性试验时间（ h）0 2 4 6 8 RSD(%)峰面积 23669.4 24020.7 24202.4 23676.8 23240.5 1.56%6.6 含 量 测
30、定取 盐 酸 普 萘 洛 尔 对 照 品 和 样 品 适 量 ， 精 密 称 定 ， 用 流 动 相 配 成1mg/ml 的 溶 液 。 按 外 标 法 计 算 即 得 ， 结 果 见 表 1。表 10-5 样品含量测定结果（% ）批号 含量/（%） RSD/（%）20110315 105.2 1.13参 考 文 献1 曾 苏 ， 药 物 分 析 学 （ 第 五 版 ） ， 高 等 教 育 出 版 社 ， p362-365；2 中 国 药 典 委 员 会 ， 中 国 药 典 （ 2010 版 ） ， 化 学 工 业 出 版 社 ；3 李 发 美 ， 分 析 化 学 实 验 指 导 ， 人 民
31、卫 生 出 版 社 ；4 马 春 燕 ， 高 效 液 相 法 测 定 盐 酸 普 萘 洛 尔 含 量 ， 中 国 药 师 2005 年 第8 卷 第 8 期 ；5 李 发 美 ， 分 析 化 学 （ 第 六 版 ） ， 人 民 卫 生 出 版 社 。附：色谱图图 10-1 盐酸普萘洛尔紫外光谱扫描曲线min0 5 10 15 20 25mAU -.500.511.522.533.5VWD1 A,波=29 nm (WHW2013704.D) 1.4321.802 3.079 5.26 min0.557. 1012.51517.520mAU 02040608010120140 VWD1 A,波=2
32、9 nm(WH2013402.D)1.4328095 . 2.41 4.6 5.29312.79A Bmin0246810121416mAU 01020304050VWD1 A,波=29 nm(WH201370.D)1.3549 .204.83510.96 min0246810121416mAU 01020304050607080VWD1 A,波=29 nm(WH2013407.D)1.43680 2. 3.075 3.9504264.9810.63C Dmin0246810121416mAU 010203040506070VWD1 A,波=29 nm(WH2013409.D)1.40 2.6
33、539 .06 3.25 4.4.53610.59 min024681012141618mAU 02040608010VWD1 A,波=29 nm(WH20134026.D)1.432780 .924 .037 .628 4.14.36010.594 12.6E FA 空白溶剂 B 合成中间体甲萘酚 C 合成中间体普萘洛尔D 2mg/ml 样品 E 3mg/ml 样品 F 碱破坏图 10-2 盐酸普萘洛尔的有关物质检查的专属性考察min0123456mAU 01020304050607080VWD1 A,波=29 nm (WH201324019.D)1.435 .70 1.9 2.7 3.07
34、 3.98 4.14.73min012345678mAU 010203040506070VWD1 A,波=29 nm (WH20132401.D)1.438 .6 1.90 2.5 3.985 4.214.50A BA 对照品 B 样品图 10-3 盐酸普萘洛尔的有关物质检查的样品测定申请分类：新药申报临床试验注册分类： 第二部分 药学研究资料 编号：10药 品 名 称：盐酸普萘洛尔注射液资料项目名称：质 量 研 究 工 作 的 试 验 资 料研究机构名称（加盖公章）：浙江大学药学院本科教学实验中心研究机构地址：浙江省杭州市西湖区余杭塘路 388 号研究机构邮编：310058研究机构电话：05
35、71-88208406研究机构主要研究者姓名（签字）：姚彤炜试验者姓名： 王焕威、陈重均、朱俊峰、陈厚柳试验起止日期：2011.3.32011.6.10原始资料保存地点：浙江大学药学院实验中心申请人机构联系人姓名：王焕威申请人机构联系人电话：13732216542申请人机构联系人 E-mail:zju_申请人机构名称（公章）： 浙江大学药学院质 量 研 究 工 作 的 试 验 资 料1 样 品 来 源制 备 盐 酸 普 萘 洛 尔 注 射 液 的 原 料 药 由 浙 江 大 学 药 学 院 药 物 化 学 实 验中 心 合 成 ， 注 射 液 在 浙 江 大 学 药 学 院 药 物 制 剂 实
36、 验 中 心 制 备 ， 批 号 为20110419。2 含 量 限 度本 品 含 C16H21NO2HCl 应 为 标 示 量 的 90.0%-110.0%。3 性 状本 品 为 无 色 的 澄 明 液 体 。4 鉴 别 紫 外 吸 收 光 谱 法 ： 取 含 量 测 定 本 品 ， 照 紫 外 -可 见 分 光 光 度 法 测 定 ，按 药 典 规 定 在 290nm 的 波 长 处 有 最 大 吸 收 ， 测 得 本 品 在 290nm 有 最 大吸 收 。 见 图 10-5。5 检 查5.1 pH 值，应为 3.04.0。结果见表 10-6。表 10-6 盐酸普萘洛尔注射液 pH 值测
37、定次数 1 2 3pH 3.62 3.67 3.695.2 可见异物在 灯 检 下 ， 有 小 白 点 、 毛 屑 等 异 物 。5.3 不溶微粒符 合 要 求6 含 量 测 定6.1 方 法 的 筛 选根 据 相 关 文 献 查 询 ， 盐 酸 普 萘 洛 尔 的 含 量 测 定 方 法 研 究 结 果 采 用紫 外 分 光 光 度 法 测 定 。6.2 仪 器北 京 普 析 通 用 1901 紫 外 分 光 光 度 计6.3 测 定 波 长 的 选 择精 密 量 取 本 品 适 量 ， 加 甲 醇 定 量 稀 释 制 成 每 1ml 中 约 含 20 g 的溶 液 ， 摇 匀 ， 照 紫
38、外 -可 见 分 光 光 度 法 ， 以 水 为 空 白 ， 在 400200nm 波长 范 围 内 扫 描 得 到 盐 酸 普 萘 洛 尔 注 射 液 的 紫 外 吸 收 光 谱 图 ， 见 图 10-5。 盐 酸 普 萘 洛 尔 注 射 液 在 290nm 波 长 处 有 最 大 吸 收 ， 而 辅 料 在 此 波 长 处无 干 扰 ， 见 图 10-6， 故 选 取 用 290nm 波 长 为 测 定 波 长 。6.4 回 收 率 实 验精 密 量 取 1.0mg 样 品 ， 置 于 10mL 容 量 瓶 中 ， 加 入 约 1.0mg 普 萘 洛尔 原 料 药 混 合 ， 加 水 适
39、量 溶 解 并 稀 释 至 刻 度 ， 摇 匀 ， 精 密 量 取 1.0mL置 于 10mL 容 量 瓶 中 ， 加 水 至 刻 度 ， 摇 匀 ， 照 紫 外 分 光 光 度 法 测 量 于290nm 处 得 吸 光 度 ， 按 照 吸 光 系 数 为 207 计 算 ， 测 得 平 均 回 收 率 为100.35%， RSD 为 1.35%。 见 表 10-7。表 10-7 盐酸普萘洛尔注射液的回收率实验（ n=9）次数加入量（mg）测得量（ mg）回收率 平均回收率 RSD1 0.808 0.809 100.15%2 0.808 0.801 99.19%3 0.808 0.799 98
40、.89%4 1.010 0.999 98.87%5 1.010 1.014 100.40%6 1.010 1.032 102.21%7 1.214 1.240 102.08%8 1.214 1.236 101.76%9 1.214 1.209 99.57%100.35% 1.35%6.5 吸 光 系 数 法 含 量 测 定 结 果取 样 品 10 支 ， 将 其 内 容 物 混 匀 ， 精 密 量 取 2.0mL（ 约 相 当 于 盐 酸普 萘 洛 尔 2.0mg） 置 于 10mL 量 瓶 中 ， 加 水 至 刻 度 。 从 中 精 密 量 取1.0mL 置 于 10mL 量 瓶 中 ， 加
41、 水 至 刻 度 ， 摇 匀 ， 以 水 为 空 白 ， 测 定 吸 光 度 ，测 得 结 果 如 下 表 10-8。表 10-8 盐酸普萘洛尔注射液的含量测定结果次数 吸光度（A） 相当于标示量的百分含量 平均值1 0.3706 89.5%2 0.3710 89.6% 89.6%3 0.3708 89.6%7 规 格5mL： 5mg参 考 文 献1 曾 苏 ， 药 物 分 析 学 （ 第 五 版 ） ， 高 等 教 育 出 版 社 ， p362-365；2 中 国 药 典 委 员 会 ， 中 国 药 典 （ 2010 版 ） ， 化 学 工 业 出 版 社 ；3 李 发 美 ， 分 析 化
42、学 实 验 指 导 ， 人 民 卫 生 出 版 社 ；4 马 春 燕 ， 高 效 液 相 法 测 定 盐 酸 普 萘 洛 尔 含 量 ， 中 国 药 师 2005 年 第8 卷 第 8 期 ；5 李 发 美 ， 分 析 化 学 （ 第 六 版 ） ， 人 民 卫 生 出 版 社 。附：光谱图图 10-5 盐酸普萘洛尔注射液紫外光谱扫描曲线图 10-6 辅料枸橼酸的紫外光谱扫描曲线申请分类：新药申报临床试验注册分类： 第二部分 药学研究资料 编号：12药 品 名 称：盐酸普萘洛尔资料项目名称：检 验 报 告 书研究机构名称（加盖公章）：浙江大学药学院本科教学实验中心研究机构地址：浙江省杭州市西湖区余杭塘路 388 号研究机构邮编：310058研究机构电话：0571-88208406研究机构主要研究者姓名（签字）：姚彤炜试验者姓名： 王焕威、陈重均、朱俊峰、陈厚柳试验起止日期：2011.3.32011.6.10原始资料保存地点：浙江大学药学院实验中心申请人机构联系人姓名：王焕威申请人机构联系人电话：13732216542申请人机构联系人 E-mail:zju_申请人机构名称（公章）： 浙江大学药学院
