1、文件编号：CHS/SJ/D/SOP016-60北京 有限公司 版本/修改状态：B/00文件名称：同型半胱氨酸测定试剂盒（酶法）设计方案受控状态： 受 控编制人： 日期： 审核人： 日期：批准人： 日期： 生效日期：分发部门：生产研发部、质量管理部1 产品概述、处方及规格1.1 产品概述本试剂通过测定人体液中同型半胱氨酸（Hcy）的浓度，主要是用于诊断心肌功能疾病。产品测定原理：同型半胱氨酸被转化为游离型后，通过与共价底物反应，循环放大，同时产生腺苷。腺苷立即水解成氨和次黄嘌呤，氨在谷氨酸脱氢酶的作用下，使 -烟酰胺腺嘌呤二核苷酸还原性（NADH）转化为 NAD+，样本中的同型半胱氨酸的浓度与
2、NADH 的变化成正比。1.2 产品处方1.2.1 试剂为液体双试剂。校准品可使用朗道、罗氏等复合定标液。1.2.2 产品所用主要原材料为S-腺苷甲硫氨酸（ SAM）、 -烟酰胺腺嘌呤二核苷酸还原性（NADH ）、三（2羧乙基）磷氯化氢（TCEP）、- 酮戊二酸、 Hcy甲基转移酶（HMTase）、谷氨酸脱氢酶（GLDH ）S-腺苷同型半胱氨酸（SAH）水解酶及腺苷脱氨酶（ADA ）等。根据文献资料选用适当的缓冲液和稳定剂。1.3 产品规格产品包装规格制定要考虑不同适用机型和不同客户需求，根据以往经验，拟制定规格：R1-8 ml、R 2-2 ml；R 1-16 ml、R 2-4ml；R 1-2
3、0 ml、R 2-5ml；R 1-32 ml、R 2-8ml；R 1-40 ml、R 2-10 ml；R 1-240 ml、R 2-210 ml；R 1-440 ml、R 2-410 ml；R 1-240 ml、R 2-20 ml；R 1-440 ml、R2-220 ml；R 1-840 ml、R 2-810 ml；R 1-80 ml、R 2-20 ml；R 1-280 ml、R 2-220 ml；R1-480 ml、R 2-420 ml；R 1-880 ml、R 2-820 ml ；R 1-60 ml、R 2-15 ml；R 1-260 ml、R2-215 ml；R 1-360 ml、R 2
4、-315ml；R 1-850 ml、R 2-250ml；R 1-670 ml、R 2-335ml；R1-540 ml、R 2-50ml；R 1-450 ml、R 2-50ml； R1-360 ml、R 2-45ml；R 1-820 ml、R 2-85 ml。2 产品质量标准根据临床化学体外诊断试剂（盒）通用技术要求 ，应对试剂外观、净含量、试剂空白、灵敏度、准确度、批内精密性、批间精密性、线性范围和稳定性等做出要求和规定。应参考已上市产品并满足临床使用要求。2.1 外观R1、R 2均为无色至浅黄色透明液体。2.2 净含量不少于标示值。2.3 试剂空白2.3.1 试剂空白吸光度变化率以蒸馏水为检
5、测样本时，每分钟吸光度变化值(A/min) 的绝对值应不大于0.100A。2.3.2 试剂空白吸光度以蒸馏水为检测样本时，吸光度应不小于0.800A 。2.4 准确度以质控血清（如Roche公司生产的质控血清）为检测样本时，测定值在质控血清规定的可接受范围内。或用比对试验，相关系数r0.975,每个浓度点的相对偏差R20%。2.5 线性范围Hcy试剂在线性范围0-50umol/L内，a)回归系数 r应不小于0.990;b)线性偏差应不大于15%。2.6 分析灵敏度Hcy含量为10umol/L时，测定吸光度变化率( 减掉试剂空白吸光度变化率) A 0.002Abs/min 。2.7 重复性2.7
6、.1测量精密度同一个试剂盒分别测定高低两个样本值所得的结果，变异系数CV8.0%。2.7.2批间差连续三批生产的不同批号的试剂测定同一样本，相对偏差R20%。2.8 稳定性Hcy试剂贮存于28、避光环境中，有效期为12个月。3 研制要求3.1 对试剂所用原料进行选择，试剂配方进行优化，确定所用原料的浓度，在保证产品质量的前提下尽量降低成本。3.2 对反应体系进行研究，选择最佳加样方案，兼顾反应的灵敏度和线性范围，并适合在全自动生化分析仪上应用。3.3 对生产工艺进行研究，以使研制的产品能够顺利进入生产程序。3.4 对试剂的分析性能进行评估，对产品质量标准中的各项进行实验评价并确定最终要求，据此
7、拟定注册产品标准。3.5 实验确定该项目的正常参考值。3.6 稳定性研究：试制至少三批样品，在实际储存条件下保存至成品有效期后，检测各项性能指标是否仍能达到产品质量标准的要求。3.7 进行临床研究，确定临床适用性和符合性。4 生产工艺流程（见附页）5 生产过程及工艺条件5.1.1 称量5.1.1.1 根据产品处方计算待配溶液所需各试剂成分量，用适当的称、量工具按顺序依次准确称量或量取各试剂成分。5.1.1.2 称量过程要求控制称量试剂成分的正确性和精确性，需根据所要称、量试剂的量选用适当的称、量工具。称量过程应有复核人复核。5.1.2 配制在配液桶中加入预定体积 90%左右的纯化水，然后依次加
8、入准确称量的各试剂成分，注意在加入下一成分前，之前加入的试剂成分要已搅拌溶解。所有试剂成分加完并溶解后，用纯化水定容至预定体积。5.1.3 过滤5.1.3.1 试剂配制完成后，用10um 孔径的滤膜过滤。根据液量多少，可采用蠕动泵过滤，液量过少时采用针头过滤器过滤。5.1.3.2 为减少酶或其他较大分子生物成分损失，可在加入这些成分之前进行过滤。5.1.3.3 过滤过程要避免溶液受污染，与溶液接触的器具应尽量专用，不能专用应保证洗涤彻底，以免造成试剂间的交叉污染。5.1.4 配液检验配制完成的液体静置 2 小时以上，即可通知质检部取样进行性能检测，检测合格的试剂方可进入分装程序。如配液量很少，
9、配制后即分装，此步检验可省却。5.2 分装可用蠕动泵调整液量后分装，也可采用称重法、量取体积法分装。5.2.1 装量控制分装程序要求对装量进行控制，不得低于标示装量。分装过程中对装量进行抽检，为避免损失溶液和增加污染机会，建议采用称重法进行装量检验。5.2.2 分装后检验分装完成后，通知质检部取样检验。检验合格的试剂方可进入下一生产程序。如分装和包装程序连续进行，在溶液配制后已进行检验的前提下，此步检验可省却。5.3 组装5.3.1 组装程序5.3.1.1 领取半成品、包装盒、瓶签、盒签、说明书。5.3.1.2 标签打印在通用瓶签和盒签上打印相应内容：瓶签在绿色区域内打印产品名称和半成品规格；
10、盒签在绿色区域内打印产品名称和试剂盒包装规格，并将注册号和产品注册标准部分打印完整。5.3.1.3 贴签瓶签贴到半成品瓶身指定位置，端正、居中；盒签贴于包装盒正面，端正，居中。5.3.1.4 叠说明书将说明书横向对折两次后再纵向对折一次，折好后的说明书边缘应整齐。5.3.1.5 装盒将包装盒折好，依次放入半成品组分和说明书，各组分位置应整齐有序。5.3.2 成品检验试剂组装好后，通知质检部抽样检验。质检部检验合格后按批生产量发合格证给生产部，生产部将合格证贴于包装盒指定位置，即可进行成品入库。6 主要设备一览表7 适用的法律、法规体外诊断试剂注册管理办法（试行）体外诊断试剂注册申报资料形式要求
11、体外诊断试剂质量管理体系考核范围有效覆盖判定原则及认定程序体外诊断试剂研制情况现场核查要求体外诊断试剂说明书编写指导原则医疗器械说明书、标签和包装标识管理规定体外诊断试剂临床研究技术指导原则临床化学体外诊断试剂（盒）通用技术要求序号 设备名称 设备型号 生产厂家 生产能力1 电子分析天平 AL104 梅特勒-托利多称量范围：0.01g-110g；精度等级 0.01g2 AR114 电子天平 DT-1000 奥豪斯中国地区称量范围：0g-100g；精度等级 0.0001g3 蠕动泵 BT300-1F 保定兰格恒流泵有限公司最大分配次数 999 次；分配液量 0.1ml-99.9L4 标签打印机 Cl 408e/412e SATO America Inc 300m 走行5半自动生化分析仪Microlab300 荷兰威图科学公司 /
