1、本电子版内容如与中国环境出版社出版的标准文本有出入，以中国环境出版社出版的文本为准。中 华 人 民 共 和 国 国 家 标 准GB 18466-2005医疗机构水污染物排放标准Discharge standard of water pollutants for medical organization200507 27 发布 20060101 实施国 家 环 境 保 护 总 局国 家 质 量 监 督 检 验 检 疫 总 局发布目 录前 言 .II 1 范围 .1 2 规范性引用文件 .1 3 术语和定义 .1 4 技术内容 .1 4.1 污水排放要求 1 4.2 废气排放要求 4 4.3 污泥
2、控制与处置 45 处理工艺与消毒要求 .4 6 取样与监测 .5 6.1 污水取样与监测 56.2 大气取样与监测 76.3 污泥取样与监测 77 标准的实施与监督 .7 附录 A .8附录 B .15附录 C .19附录 D .21附录 E23附录 F25I前 言为贯彻中华人民共和国环境保护法、中华人民共和国水污染防治法、中华人民共和国海洋环境保护法、中华人民共和国大气污染防治法、中华人民共和国传染病防治法，加强对医疗机构污水、污水处理站废气、污泥排放的控制和管理，预防和控制传染病的发生和流行，保障人体健康，维护良好的生态环境，制定本标准。本标准规定了医疗机构污水及污水处理站产生的废气和污泥
3、的污染物控制项目及其排放限值、处理工艺与消毒要求、取样与监测和标准的实施与监督等。本标准自实施之日起，代替 GB8978-1996污水综合排放标准 中有关医疗机构水污染物排放标准部分，并取代 GB18466-2001医疗机构污水排放要求。新、扩、改医疗机构自本标准实施之日起按本标准实施管理，现有医疗机构在 2007 年 12 月 31 日前达到本标准要求。本标准的附录 A、附录 B、附录 C 、附录 D、附录 E 和附录 F 为规范性附录。本标准为首次发布。本标准由国家环境保护总局科技标准司提出并归口。本标准委托北京市环境保护科学研究院和中国疾病预防控制中心起草。本标准由国家环境保护总局 20
4、05 年 07 月 27 日批准。本标准由国家环境保护总局负责解释。II1 范围医疗机构水污染物排放标准本标准规定了医疗机构污水、污水处理站产生的废气、污泥的污染物控制项目及其排放和控制限值、处理工艺和消毒要求、取样与监测和标准的实施与监督。本标准适用于医疗机构污水、污水处理站产生污泥及废气排放的控制，医疗机构建设项目的环境影响评价、环境保护设施设计、竣工验收及验收后的排放管理。当医疗机构的办公区、非医疗生活区等污水与病区污水合流收集时，其综合污水排放均执行本标准。建有分流污水收集系统的医疗机构，其非病区生活区污水排放执行 GB8978 的相关规定。2 规范性引用文件下列标准和本标准表 5、表
5、 6 所列分析方法标准及规范所含条文在本标准中被引用即构成为本标准的条文，与本标准同效。当上述标准和规范被修订时，应使用其最新版本。GB8978 污水综合排放标准GB3838 地表水环境质量标准GB3097 海水水质标准GB16297 大气污染物综合排放标准HJ/T55 大气污染物无组织排放监测技术导则HJ/T91 地表水和污水检测技术规范3 术语和定义本标准采用下列定义。3.1 医疗机构 medical organization指从事疾病诊断、治疗活动的医院、卫生院、疗养院、门诊部、诊所、卫生急救站等。3.2 医疗机构污水 medical organization wastewater指医疗
6、机构门诊、病房、手术室、各类检验室、病理解剖室、放射室、洗衣房、太平间等处排出的诊疗、生活及粪便污水。当医疗机构其他污水与上述污水混合排出时一律视为医疗机构污水。3.3 污泥 sludge指医疗机构污水处理过程中产生的栅渣、沉淀污泥和化粪池污泥。3.4 废气 waste gas指医疗机构污水处理过程中产生的有害气体。4 技术内容4.1 污水排放要求4.1.1 传染病和结核病医疗机构污水排放执行表 1 的规定。4.1.2 县级及县级以上或 20 张床位及以上的综合医疗机构和其他医疗机构污水排放执行表 21的规定。直接或间接排入地表水体和海域的污水执行排放标准，排入终端已建有正常运行城镇二级污水处
7、理厂的下水道的污水，执行预处理标准。4.1.3 县级以下或 20 张床位以下的综合医疗机构和其他所有医疗机构污水经消毒处理后方可排放。4.1.4 禁止向 GB3838I、II 类水域和 III 类水域的饮用水保护区和游泳区，GB3097 一、二类海域直接排放医疗机构污水。4.1.5 带传染病房的综合医疗机构，应将传染病房污水与非传染病房污水分开。传染病房的污水、粪便经过消毒后方可与其他污水合并处理。4.1.6 采用含氯消毒剂进行消毒的医疗机构污水，若直接排入地表水体和海域，应进行脱氯处理，使总余氯小于 0.5mg/L。表 1 传染病、结核病医疗机构水污染物排放限值（日均值）序号12345 PH
8、67891011121314151617181920控制项目粪大肠菌群数（MPN/L）肠道致病菌肠道病毒结核杆菌化学需氧量（COD）浓度 （mg/L）最高允许排放负荷（g/床位）生化需氧量（BOD）浓度 （mg/L）最高允许排放负荷（g/床位）悬浮物（SS）浓度 （mg/L）最高允许排放负荷（g/床位）氨氮（mg/L）15动植物油（mg/L）5石油类（mg/L）5阴离子表面活性剂（mg/L）色度（稀释倍数）30挥发酚（mg/L）0.5总氰化物（mg/L）总汞（mg/L）0.05总镉（mg/L）0.1总铬（mg/L）1.5六价铬（mg/L）0.5总砷（mg/L）0.5标准值不得检出不得检出不得检
9、出6-96060 202020200.5210052122232425总铅（mg/L）1.0总银（mg/L）0.5总(Bq/L) 1总(Bq/L) 10总余氯 1）2（mg/L）（直接排入水体的要求） 0.5注：1）采用含氯消毒剂消毒的工艺控制要求为： 消毒接触池的接触时间1.5h，接触池出口总余氯 6.5-10 mg/L。2）采用其他消毒剂对总余氯不作要求。表 2 综合医疗机构和其他医疗机构水污染物排放限值（日均值）序号1234 pH567891011控制项目粪大肠菌群数（MPN/L）肠道致病菌肠道病毒化学需氧量（COD）浓度 （mg/L ）最高允许排放负荷（g/床位）生化需氧量（BOD）浓
10、度 （mg/L ）最高允许排放负荷（g/床位）悬浮物（SS）浓度 （mg/L ）最高允许排放负荷（g/床位）氨氮（mg/L）动植物油（mg/L）石油类（mg/L）阴离子表面活性剂（mg/L）排放标准不得检出不得检出6-9606020202020预处理标准5006-92502501001006060-20205155-5 1012 色度（稀释倍数） - 3013 挥发酚（mg/L） 1.0 0.514 总氰化物（mg/L） 0.5 0.515161718总汞（mg/L）总镉（mg/L）总铬（mg/L）六价铬（mg/L）0.050.11.50.50.050.11.50.53192021222324
11、总砷（mg/L）总铅（mg/L）总银（mg/L）总(Bq/L) 1总(Bq/L) 10总余氯 1）2）（mg/L）0.51.00.5110- 0.50.51.00.5注：1）采用含氯消毒剂消毒的工艺控制要求为：一级标准：消毒接触池接触时间1h，接触池出口总余氯 3-10 mg/L。二级标准：消毒接触池接触时间1h，接触池出口总余氯 2-8 mg/L。2）采用其他消毒剂对总余氯不作要求。4.2 废气排放要求4.2.1 污水处理站排出的废气应进行除臭除味处理，保证污水处理站周边空气中污染物达到表 3 要求。4.2.2 传染病和结核病医疗机构应对污水处理站排出的废气进行消毒处理。表 3 污水处理站周
12、边大气污染物最高允许浓度序号12345控制项目氨（mg/m 3）1.0硫化氢（mg/m 3）0.03臭气浓度（无量纲）10氯气（mg/m 3）0.1甲烷（指处理站内最高体积百分数 %）标准值1%4.3 污泥控制与处置4.3.1 栅渣、化粪池和污水处理站污泥属危险废物，应按危险废物进行处理和处置。4.3.2 污泥清淘前应进行监测，达到表 4 要求。表 4 医疗机构污泥控制标准医疗机构类别粪大肠菌群数(MPN/g) 肠道致病菌 肠道病毒 结核杆菌蛔虫卵死亡率（%）传染病医疗机构结核病医疗机构综 合 医 疗 机 构 和其它医疗机构5 处理工艺与消毒要求100100100不得检出-不得检出-不得检出-
13、9595955.1 医疗机构病区和非病区的污水，传染病区和非传染病区的污水应分流，不得将固体传染性废物、各种化学废液弃置和倾倒排入下水道。45.2 传染病医疗机构和综合医疗机构的传染病房应设专用化粪池，收集经消毒处理后的粪便排泄物等传染性废物。5.3 化粪池应按最高日排水量设计，停留时间为 24-36h。清掏周期为 180-360d。5.4 医疗机构的各种特殊排水应单独收集并进行处理后，再排入医院污水处理系统。5.4.1 低放射性废水应经衰变池处理。5.4.2 洗相室废液应回收银，并对废液进行处理。5.4.3 口腔科含汞废水应进行除汞处理。5.4.4 检验室废水应根据使用化学品的性质单独收集，
14、单独处理。5.4.5 含油废水应设置隔油池处理。5.5 传染病医疗机构和结核病医疗机构污水处理宜采用二级处理+消毒工艺或深度处理+ 消毒工艺。5.6 综合医疗机构污水排放执行排放标准时，宜采用二级处理+消毒工艺或深度处理+ 消毒工艺；执行预处理标准时宜采用一级处理或一级强化处理+消毒工艺。5.7 消毒剂应根据技术经济分析选用，通常使用的有：二氧化氯、次氯酸钠、液氯、紫外线和臭氧等。采用含氯消毒剂时按表 1、表 2 要求设计。5.7.1 采用紫外线消毒，污水悬浮物浓度应小于 10 mg/L ，照射剂量 30-40mJ/cm2,照射接触时间应大于 10s 或由试验确定。5.7.2 采用臭氧消毒，污
15、水悬浮物浓度应小于 20 mg/L ，臭氧用量应大于 10mg/L,接触时间应大于 12min 或由试验确定。6 取样与监测6.1 污水取样与监测6.1.1 应按规定设置科室处理设施排出口和单位污水外排口，并设置排放口标志。6.1.2 表 1 第 16-22 项，表 2 第 15-21 项在科室处理设施排出口取样，总 、总在衰变池出口取样监测。其它污染物的采样点一律设在排污单位的外排口。6.1.2 医疗机构污水外排口处应设污水计量装置，并宜设污水比例采样器和在线监测设备。6.1.3 监测频率6.1.3.1 粪大肠菌群数每月监测不得少于 1 次。采用含氯消毒剂消毒时，接触池出口总余氯每日监测不得
16、少于 2 次（采用间歇式消毒处理的，每次排放前监测）。6.1.3.2 肠道致病菌主要监测沙门氏菌、志贺氏菌。沙门氏菌的监测，每季度不少于 1 次；志贺氏菌的监测，每年不少于 2 次。其他致病菌和肠道病毒按 6.1.3.3 规定进行监测。结核病医疗机构根据需要监测结核杆菌。6.1.3.3 收治了传染病病人的医院应加强对肠道致病菌和肠道病毒的监测。同时收治的感染上同一种肠道致病菌或肠道病毒的甲类传染病病人数超过 5 人、或乙类传染病病人数超过 10人、或丙类传染病病人数超过 20 人时，应及时监测该种传染病病原体。6.1.3.4 理化指标监测频率：pH 每日监测不少于 2 次，COD 和 SS 每
17、周监测 1 次，其他污染物每季度监测不少于 1 次。56.1.3.5 采样频率：每 4 小时采样 1 次，一日至少采样 3 次，测定结果以日均值计。6.1.4 监督性监测按 HJ/T91 执行。6.1.5 监测分析方法按表 5 和附录。6.1.6 污染物单位排放负荷计算见附录 F。表 5 水污染物监测分析方法序号123456789控制项目粪大肠菌群数沙门氏菌志贺氏菌结核杆菌总余氯化学需氧量(COD)生化需氧量(BOD)悬浮物(SS)氨氮测 定 方 法多管发酵法N,N-二乙基 -1,4-苯二胺分光光度法N,N-二乙基 -1,4-苯二胺滴定法重铬酸盐法稀释与接种法重量法蒸馏和滴定法测定下限（mg/
18、L） 方法来源附录 A附录 B附录 C附录 EGB11898GB11897GB11914 30GB7488 2GB119010.2 GB7478GB74791011 动植物油石油类比色法红外光度法红外光度法0.05 GB/T164880.1GB/T164880.112 阴离子表面活性剂 亚甲蓝分光光度法 GB74940.0513 色 度 稀释倍数法 GB1190314 pH 值15 总 汞玻璃电极法冷吸收分光光度法双硫腙分光光度法0.00010.002GB6920GB7468GB746916 挥发酚 蒸馏后 4-氨基安替比林分光光度法硝酸银滴定法0.002 GB74900.25 GB74861
19、718总氰化物总 镉异烟酸- 吡唑啉酮比色法吡啶-巴比妥酸比色法原子吸收分光光度法（螯合萃取法）双硫腙分光光度法0.0040.0020.0010.001GB7486GB7486GB7475GB747119202122232425总 铬六价铬总 砷总 铅总 银总总高锰酸钾氧化二苯碳酰二肼分光光度法二苯碳酰二肼分光光度法二乙基二硫代氨基甲酸银分光光度法原子吸收分光光度法（螯合萃取法）双硫腙分光光度法火焰原子吸收分光光度法镉试剂 2B 分光光度法厚源法蒸发法0.004 GB74660.0040.007 GB74850.01 GB74750.01 GB74700.03 GB119079 0.01 GB
20、11908EJ/T10750.05Bq/LEJ/T90066.2 大气取样与监测6.2.1 污水处理站大气监测点的布置方法与采样方法按 GB16297 中附录 C 和 HJ/T55 的有关规定执行。6.2.2 采样频率，每 2h 采样一次，共采集 4 次，取其最大测定值。每季度监测一次。6.2.3 监测分析方法按表 6。表 6 大气污染物监测分析方法序号12345控制项目氨硫化氢臭气浓度（无量纲）氯气甲烷测定方法次氯酸钠- 水杨酸分光光度法气相色谱法三点比较式臭袋法甲基橙分光光度法气相色谱法方法来源GB/T14679GB/T14678GB/T14675HJ/T30CJ/30376.3 污泥取样
21、与监测6.3.1 取样方法，采用多点取样，样品应有代表性，样品重量不小于 1kg。清掏前监测。6.3.2 监测分析方法见附录 A、附录 B、附录 C 、附录 D 和附录 E。7 标准的实施与监督7.1 本标准由县级以上人民政府环境保护行政主管部门负责监督实施。7.2 省、自治区、直辖市人民政府对执行本标准不能达到本地区环境功能要求时，可以根据总量控制要求和环境影响评价结果制定严于本标准的地方污染物排放标准。7A1 仪器和设备附录 A（规范性附录）医疗机构污水和污泥中粪大肠菌群的检验方法A1.1 高压蒸汽灭菌器。A1.2 干燥灭菌箱。A1.3 培养箱：37。A1.4 恒温水浴箱。A1.5 电炉。
22、A1.6 天平。A1.7 灭菌平皿。A1.8 灭菌刻度吸管。A1.9 酒精灯A2 培养基和试剂A2.1 乳糖胆盐培养液A2.1.1 成分蛋白胨 20g猪胆盐（或牛、羊胆盐） 5g乳糖 5g0.4溴甲酚紫水溶液 2.5mL蒸馏水 1000mLA2.1.2 制法将蛋白胨、猪胆盐及乳糖溶解于 1000mL 蒸馏水中，调整 pH 到 7.4，加入指示剂，充分混匀，分装于内有倒管的试管中。115下灭菌 20min。贮存于冷暗处备用。A2.2 三倍浓度乳糖胆盐培养液A2.2.1 成分蛋白胨 60g猪胆盐（或牛、羊胆盐） 15g乳糖 15g0.4溴甲酚紫水溶液 7.5mL蒸馏水 1000mLA2.2.2 制
23、法制法同附录 A2.1.2。A2.3 伊红美兰培养基（EMB 培养基）A2.3.1 成分蛋白胨 10g乳糖 10g磷酸氢二钾 2g 琼脂 20g2伊红水溶液 20mL0.5美蓝水溶液 13mL8蒸馏水 1000mL A2.3.2 制法将琼脂加到 900mL 蒸馏水中，加热溶解，然后加入磷酸氢二钾和蛋白胨，混匀使溶解，再加入蒸馏水补足至 1000mL，调整 pH 至 7.27.4。趁热用脱脂棉和砂布过滤，再加入乳糖，混匀，定量分装于烧瓶内，115灭菌 20min。作为储备培养基贮存于冷暗处备用。临用时，加热融化储备培养基，待冷至 60左右，根据烧瓶内培养基的容量，加入一定量的已灭菌的 2伊红水溶
24、液和 0.5美蓝水溶液，充分摇匀（防止产生气泡）。倾注平皿备用。A2.4 乳糖蛋白胨培养液A2.4.1 成分蛋白胨 10g牛肉膏 3g乳糖 5g氯化钠 5g1.6溴甲酚紫乙醇溶液 1mL蒸馏水 1000mLA2.4.2 制法将蛋白胨、牛肉膏、乳糖及氯化钠加热溶解于 1000mL 蒸馏水中，调整 pH 到 7.27.4，加入 1.6溴甲酚紫乙醇溶液 1mL，充分混匀，分装于内有倒管的试管中。115下灭菌 20min。贮存于冷暗处备用。A2.5 革兰氏染色液A2.5.1 结晶紫染色液结晶紫 1g95乙醇溶液 20mL1草酸铵水溶液 1000mL将结晶紫溶于乙醇中，然后与草酸铵水溶液混合。A2.5.
25、2 革兰氏碘液碘 1g碘化钾 2g蒸馏水 300mL将碘与碘化钾混合，加入蒸馏水少许，充分摇匀，待完全溶解，再加入蒸馏水至 300mL。A2.5.3 脱色液95乙醇。A2.5.4 沙黄复染液沙黄 1g95乙醇 2g蒸馏水 90mL将沙黄溶于 95乙醇中，然后用蒸馏水稀释。A2.6 染色法染色的基本步骤为：1）涂片：在载玻片上滴加一滴生理盐水，用灭菌的接种环取菌落少许，与生理盐水混匀，涂布成薄膜；2）干燥：在室温中使自然干燥；3）固定：将涂片迅速通过火焰 23 次，以载玻片反面接触皮肤，热而不烫为度；4）染色：滴加结晶紫染色液，染色 1min，水洗；5）媒染：滴加革兰氏碘液，作用 1min，水洗
26、；6）脱色：滴加 95乙醇脱色，约 30s，水洗；7）复染：滴加复染液，复染 1min，水洗。9革兰氏阳性菌染色后呈紫色，革兰氏阴性菌染色后呈红色。注：亦可用 1：10 稀释的石炭酸复红染色液作复染剂，复染时间为 10s。A3 检验程序检验程序见图 A.样品处理：确定样品接种量发酵试验：将样品接种于乳糖胆盐培养液44、培养24h平板分离：将产酸发酵管液接种于EMB 37、培养1824h鉴定：挑取可疑菌落革兰氏染色、镜检鉴定：挑取革兰氏阴性无芽孢杆菌接种于乳糖蛋白胨培养液44、培养24h计数：根据产酸产气的阳性管数查MPN表检验结果报告图 A 污水、污泥中粪大肠菌群检验程序A4 操作步骤A4.1
27、 样品准备A4.1.1 污水污水样品应至少取 200mL，使用前应充分混匀。根据预计的污水样品中粪大肠菌群数确定污水样品接种量。粪大肠菌群数量相对较少的接种量一般为 10mL、1mL、0.1mL。粪大肠菌群数较多时接种量为 1mL、0.1mL、0.01mL 或0.1mL、0.01mL、0.001mL 等。接种量少于 1mL 时，水样应制成稀释样品后供发酵试验使用。接种量为 0.1mL、0.01mL时，取稀释比分别为 1:10、1:100。其它接种量的稀释比依此类推。1:10 稀释样品的制作方法为：吸取 1mL 水样，注入到盛有 9mL 灭菌水的试管中，混匀，制成 1:10 稀释样品。因此，取
28、1mL1:10 稀释样品，等于取 0.1mL 污水样品。其它稀释比的稀释样品同法制作。注 1：若样品为经过氯消毒的污水，应在采样后立即用 5硫代硫酸钠溶液充分中和余氯。A4.1.2 污泥污泥样品应至少取 200g，使用前应充分混匀。10根据预计的污泥样品中粪大肠菌群数量确定污泥样品接种量。粪大肠菌群数量相对较少的污泥样品接种量一般为 0.1g、0.01g、0.001g。粪大肠菌群数量较多时接种量为 0.01g、0.001g、0.0001g 或 0.001g、0.0001g、0.00001g 等。污泥样品应制成稀释样品后供发酵试验使用。接种量 0.1g、0.01g、0.001g 的稀释样品制作方
29、法如下：取 20g 污泥样品，加入到三角烧瓶中，加灭菌水使成 200mL，混匀，制成1:10 稀释样品。吸取 1:10 稀释样品 1mL，注入到盛有 9mL 灭菌水的试管中，混匀，制成 1:100稀释样品。按同法制成 1:1000 稀释样品。接种 1mL1:10、1:100、1:1000 稀释样品等于接种0.1g、0.01g、0.001g 污泥样品。注 1：若样品为经过氯消毒的污泥，应在采样后立即用 5硫代硫酸钠溶液充分中和余氯。A4.2 发酵试验将样品接种于装有乳糖胆盐培养液的试管（内有小倒管）中，44培养 24h。样品接种体积以及管内乳糖胆盐培养液的浓度与体积根据以下条件确定：样品为污水时
30、，取三个接种量、每个接种量的样品分别接种于 5 个试管内，共需 15 个试管。试管内乳糖胆盐培养液的浓度与体积应根据接种量确定。若接种量为 10mL，吸取 10mL样品接种于装有 5mL 三倍浓度乳糖胆盐培养液的试管内；若接种量为 1mL 时，吸取 1mL 样品接种于装有 10mL 普通浓度乳糖胆盐培养液的试管内；若接种量少于 1mL 时，吸取 1mL 稀释样品接种于装有 10mL 普通浓度乳糖胆盐培养液的试管内。样品为污泥时，取三个接种量、每个接种量的稀释样品分别接种于 3 个试管内，共需 9个试管。9 个试管中，各装有 10mL 乳糖胆盐培养液。各个试管接种稀释样品体积均为 1mL。A4.
31、3 平板分离大肠杆菌分解乳糖产酸时培养液变色、产气时小倒管内出现气泡。经 24h 培养后，将产酸的试管内培养液分别划线接种于 EMB 培养基上。置于 37培养箱中，培养 1824h。A4.4 鉴定挑选可疑粪大肠菌群菌落，进行革兰氏染色和镜检。可疑菌落有：1）深紫黑色，具有金属光泽的菌落；2）紫黑色，不带或略带金屑光泽的菌落；3）淡紫红色，中心色较深的菌落。上述涂片镜检的菌落如为革兰氏阴性无芽孢杆菌，则挑取上述典型菌落 13 个接种于盛有 5mL 乳糖蛋白胨培养液倒管和倒管的试管内，置于 44培养箱中培养 24h。产酸产气试管为粪大肠菌群阳性管。A5 计数根据证实有粪大肠菌群存在的阳性管数，查表
32、 A1 或 A2 可得 100mL 污水或 1g 污泥中粪大肠菌群 MPN 值。由于表 A1 和表 A2 是按一定的三个 10 倍浓度差接种量设计的（污水接种量为 10mL、1mL和 0.1mL，污泥接种量为 0.1g、0.01g 和 0.001g），当采用其他三个 10 倍浓度差接种量时，需要修正表内 MPN 值，具体方法如下：表内所列污水（污泥）最大接种量增加 10 倍时表内 MPN 值相应降低 10 倍；污水（污泥）最大接种量减少 10 倍时表内 MPN 值相应增加 10 倍。如污水接种量改为 1mL、0.1mL 和 0.01mL时，A1 表内 MPN 值相应增加 10 倍。其它的三个
33、10 倍浓度差接种量的 MPN 值相应类推。由于 A1 表内 MPN 值的单位为每 100mL 污水样品中 MPN 值，而污水以 1L 为报告单位，因此需将查 A1 表得到的 MPN 值乘上 10，换算成 1L 污水样品中的 MPN 值。11接种表 A1 污水中粪大肠菌群最可能数（MPN）检索表（污水样品接种量为 5 份 10mL 水样，5 份 1mL 水样和 5 份 0.1mL 水样）阳性管数 每 阳性管数 每 阳性管数接种 接种 100mL 接种 接种 接种 100mL 接种 接种 接种每100mL100mL水样10mL水样0.1mL水样水样中MPN100mL水样10mL水样0.1mL水样
34、水样中MPN100mL水样10mL水样0.1mL水样水样中MPN0 0 0 0 2 0 0 5 4 0 0 130 0 1 2 2 0 1 7 4 0 1 170 0 2 4 2 0 2 9 4 0 2 210 0 3 5 2 0 3 12 4 0 3 250 0 4 7 2 0 4 14 4 0 4 300 0 5 9 2 0 5 16 4 0 5 360 1 0 2 2 1 0 7 4 1 0 170 1 1 4 2 1 1 9 4 1 1 210 1 2 6 2 1 2 12 4 1 2 260 1 3 7 2 1 3 14 1 1 3 310 1 4 9 2 1 4 17 4 1 4
35、360 1 5 11 2 1 5 19 4 1 5 420 2 0 4 2 2 0 9 4 2 0 220 2 1 6 2 2 1 12 4 2 1 260 2 2 7 2 2 2 14 4 2 2 320 2 3 9 2 2 3 17 4 2 3 380 2 4 11 2 2 4 19 4 2 4 440 2 5 13 2 2 5 22 4 2 5 500 3 0 6 2 3 0 12 4 3 0 270 3 1 7 2 3 1 14 4 3 1 330 3 2 9 2 3 2 17 4 3 2 390 3 3 11 2 3 3 20 4 3 3 450 3 4 13 2 3 4 22 4
36、3 4 520 3 5 15 2 3 5 25 4 3 5 590 4 0 8 2 4 0 15 4 4 0 340 4 1 9 2 4 1 17 4 4 1 400 4 2 11 2 4 2 20 4 4 2 470 4 3 13 2 4 3 23 4 4 3 540 4 4 15 2 4 4 25 4 4 4 620 4 5 17 2 4 5 28 4 4 5 690 5 0 9 2 5 0 17 4 5 0 410 5 1 11 2 5 1 20 4 5 1 480 5 2 13 2 5 2 23 4 5 2 560 5 3 15 2 5 3 26 4 5 3 640 5 4 17 2
37、5 4 29 4 5 4 720 5 5 19 2 5 5 32 4 5 5 8112接种100mL水样阳性管数接种10mL水样接种0.1mL水样每100mL水样中MPN接种100mL水样阳性管数接种10mL水样接种0.1mL水样每100mL水样中MPN接种100mL水样阳性管数接种10mL水样接种0.1mL水样每100mL水样中MPN1 0 0 2 3 0 0 8 5 0 0 231 0 1 4 3 0 1 11 5 0 1 311 0 2 6 3 0 2 13 5 0 2 431 0 3 8 3 0 3 16 5 0 3 581 0 4 10 3 0 4 20 5 0 4 761 0 5
38、12 3 0 5 23 5 0 5 951 1 0 4 3 1 0 11 5 1 0 331 1 1 6 3 1 1 14 5 1 1 461 1 2 8 3 1 2 17 5 1 2 631 1 3 10 3 1 3 20 5 1 3 841 1 4 12 3 1 4 23 5 1 4 1101 1 5 14 3 1 5 27 5 1 5 1301 2 0 6 3 2 0 14 5 2 0 491 2 1 8 3 2 1 17 5 2 1 701 2 2 10 3 2 2 20 5 2 2 941 2 3 12 3 2 3 24 5 2 3 1201 2 4 15 3 2 4 27 5 2
39、4 1501 2 5 17 3 2 5 31 5 2 5 1801 3 0 8 3 3 0 17 5 3 0 791 3 1 10 3 3 1 21 5 3 1 1101 3 2 12 3 3 2 24 5 3 2 1401 3 3 15 3 3 3 28 5 3 3 1801 3 4 17 3 3 4 32 5 3 4 2101 3 5 19 3 3 5 36 5 3 5 2501 4 0 11 3 4 0 21 5 4 0 1301 4 1 13 3 4 1 24 5 4 1 1701 4 2 15 3 4 2 28 5 4 2 2201 4 3 17 3 4 3 32 5 4 3 280
40、1 4 4 19 3 4 4 36 5 4 4 3501 4 5 22 3 4 5 40 5 4 5 4301 5 0 13 3 5 0 25 5 5 0 2401 5 1 15 3 5 1 29 5 5 1 3501 5 2 17 3 5 2 32 5 5 2 5401 5 3 19 3 5 3 37 5 5 3 9201 5 4 22 3 5 4 41 5 5 4 16001 5 5 24 3 5 5 45 5 5 5 160013表 A2 污泥中粪大肠菌群最可能数（MPN ）检索表（污泥样品接种量为 3 份 0.1g 泥样，3 份 0.01g 泥样和 3 份 0.001g 泥样）接种0.
41、1 g污样管阳性管数接种0.01 g污样管接种0.001g 污样管每 1g泥样中MPN接种0.1 g污样管阳性管数接种0.01 g污样管接种0.001g 污样管每 1g泥样中MPN接种0.1 g污样管阳性管数接种0.01 g污样管接种0.001g 污样管每 1g泥样中MPN0 0 0 110014B1 仪器和设备B1.1 高压蒸汽灭菌器。B1.2 干燥灭菌箱。B1.3 培养箱。B1.4 恒温水浴箱。B1.5 电炉。B1.6 天平。B1.7 灭菌平皿。B1.8 灭菌刻度吸管。B1.9 酒精灯。B2 培养基和试剂附录 B(规范性附录 )医疗机构污水和污泥中沙门氏菌的检验B2.1 亚硒酸盐增菌液(S
42、F 增菌液)B2.1.1 成分胰蛋白胨( 或多价胨 ) 10g磷酸氢二钠(Na 2HPO3) 16g磷酸二氢钠(NaH 2PO3) 2.5g乳 糖 4g亚硒酸氢钠 4g蒸馏水 1000mL B2.1.2 制法除亚硒酸氢钠外，将以上各成分放入蒸馏水中，加热溶化。再加入亚硒酸氢钠，待完全溶解后，调整 pH 到 7.07.1，分装于三角烧杯内。121下灭菌 15min 备用。B2.2 二倍浓度亚硒酸盐增菌液( 二倍浓度 SF 增菌液)B2.2.1 成分除蒸馏水改为 500mL 外，其它成分同附录 B2.1.1。B2.2.2 制法制法同附录 B2.1.2。B2.3 SS 培养基B2.3.1 基础培养基
43、B2.3.1.1 成分牛肉膏 5g示胨 5g三号胆盐 3.5g琼脂 17g蒸馏水 1000mL B2.3.1.2 制法将牛肉膏、示胨和胆盐溶解于 400mL 蒸馏水中。将琼脂加到 600mL 蒸馏水中，煮沸使其溶解。再将二者混合，121下灭菌 15min，保存备用。B2.3.2 完成培养基B2.3.2.1 成分基础培养基 1000mL15乳糖 10g柠檬酸钠 8.5g 硫代硫酸钠 8.5g10%柠檬酸铁溶液 10mL1%中性红溶液 2.5mL0.1%煌绿溶液 0.33mLB2.3.2.2 制法加热溶化基础培养基，按比例加入除中性红和煌绿溶液以外的各成分，充分混合均匀，调整 pH 到 7.0，加
44、入中性红和煌绿溶液，倾注平板。注：制好的培养基宜当日使用，或保存于冰箱内于 18h 内使用。煌绿溶液配好后应在 10 天以内使用。B2.4 亚硫酸铋琼脂培养基（BS 培养基）B2.4.1 基础培养基B2.4.1.1 成分蛋白胨 10g牛肉膏 5g氯化钠 5g琼脂 20g蒸馏水 1000mLB2.4.1.2 制法加热溶解各成分，按每份 100mL 的量分装于 250mL 三角瓶中，121下灭菌 20min 备用。B2.4.2 亚硫酸铋贮备液B2.4.2.1 成分柠檬酸铋铵 2g亚硫酸钠 20g磷酸氯二钠 10g葡萄糖 10g蒸馏水 200mLB2.4.2.2 制法将柠檬酸铋铵溶解于 50mL 沸
45、水中，同时将压硫酸钠溶解于 100mL 沸水中，混合两液并煮沸 3min，趁热加入磷酸氯二钠搅拌至溶解。冷却后，加入剩余的 50mL 葡萄糖水溶液，贮存于冰箱中。B2.4.3 柠檬酸铁煌绿贮备液B2.4.3.1 成分柠檬酸铁 2g煌绿（1水溶液） 25mL蒸馏水 200mLB2.4.3.2 制法将上述成分溶解于水中，盛于已灭菌的玻璃瓶内，贮存于冰箱。B2.4.4 完成培养基B2.4.4.1 成分基础培养基 100mL亚硫酸铋贮备液 20mL柠檬酸铁煌绿贮备液 4.5mLB2.4.4.2 制法16加热融化基础培养基并冷却至 50，同时分别加热亚硫酸铋贮备液和柠檬酸铁煌绿贮备液至 50。在无菌操作
46、下将后者加入到前者去，充分混合，无菌倾入已灭菌的培养皿中。B2.5 三糖铁琼脂培养基（TSI 培养基）B2.5.1 成分蛋白胨 20g牛肉膏 5g乳糖 10g蔗糖 10g葡萄糖 1g氯化钠 5g 硫酸亚铁铵 0.2g硫代硫酸钠 0.2g琼脂 12g酚红 0.025g蒸馏水 1000mLB2.5.2 制法将除琼脂和酚红以外的各成分溶解于蒸馏水中，调 pH 到 7.4。加入琼脂，加热煮沸，再加入 0.2% 酚红水溶液 12.5mL，摇匀。分装试管，装量宜多些，以便得到较高的底层。121下灭菌 15min。放置高层斜面备用。B2.6 沙门氏菌诊断血清B3 检验程序检验程序见图 B。污水样品处理：过滤
47、 污水样品处理：稀释B4 操作步骤B4.1 样品处理和增菌增菌：将样品接种于二倍浓度SF37、培养24h平板分离：将增菌培养液分别接种于SS和BS37、培养2448h平板分离：挑选可疑菌落接种于TSI 37、培养1824h鉴定：生化、血清学试验检验结果报告图 B 污水、污泥中沙门氏菌检验程序17B4.1.1 污水取 200mL 污水，用灭菌滤膜进行抽滤。用 100mL 二倍浓度 SF 增菌液把滤膜上截留的杂质洗脱到灭菌三角烧瓶内，充公摇匀，置于 37恒温培养箱，增菌培养 1224h。注：若样品为经过氯消毒的污水，应在采样后立即用 5硫代硫酸钠溶液充分中和余氯。B4.1.2 污泥用灭菌匙称取污泥 20g，放入灭
