免疫定性项目性能验证报告 - 正本.doc

1、河北省儿童医院检验科 性能验证报告第 1 页 共 17 页免疫定性项目性能验证报告单位名称：河北省儿童医院科室名称：检验科实 验 室：免疫实验室仪器名称：STAR-FAME 全自动酶免分析系统型号规格：STAR LET8CH-FAME 24/30仪器编号：173000-7552 146003-3441验证人员：闫红 刘雪超审核人员：郭映辉批 准 人：李贵霞验证日期：2016 年 4月 19日-2016 年 4月 24日河北省儿童医院检验科 性能验证报告第 2 页 共 17 页目 录性能验证结果 11、 基本信息 32、 正确度验证 43、 精密度验证 54、 检出线验证 95、 阴阳性符合率

2、.13河北省儿童医院检验科 性能验证报告第 3 页 共 17 页1 基本信息1.1 仪器名称：STAR-FAME 全自动酶免分析系统1.2试剂：项目 试剂产家 试剂批文 试剂批号 失效期HBsAg 英科新创 国药准字 S10910148 2015125143 2016-12-09HBSAb 英科新创国食药监械（准）字 2013第 3401320号 2016016202 2017-01-17抗-HCV 英科新创 国药准字 S10950055 2015125824 2016-11-301.3质控品：项目 生产厂家 批文 浓度 批号 失效期HBsAg北京康彻思坦生物国制标物号 10000958号 0

3、.5IU/ml 201504002 20170407HBSAb北京康彻思坦生物国制标物号 10001001号 30mIU/ml 201406001 20160602抗-HCV北京康彻思坦生物国制标物号 10001091号 0.5NCU/ml 201511005 20171119河北省儿童医院检验科 性能验证报告第 4 页 共 17 页2 正确度验证以卫生部临床检验中心室间质评结果为准；成绩在 80%者即为验证通过。附件：卫生部临检中心室间质量评价成绩表标本来源：卫生部临检中心 批号：1521 1522 1523 1524 15251531 1532 1533 1534 15351611 161

4、2 1613 1614 1615项目名称：HBsAg卫生部临检中心结果阳性 阴性 合计本室阳性 6 0 6本室阴性 0 9 9合计 6 9 15符合率： 100% 100%项目名称：HBsAb卫生部临检中心结果阳性 阴性 合计本室阳性 4 0 4本室阴性 0 11 11合计 4 11 15符合率： 100% 100%河北省儿童医院检验科 性能验证报告第 5 页 共 17 页项目名称：抗-HCV卫生部临检中心结果阳性 阴性 合计本室阳性 5 0 5本室阴性 0 10 10合计 5 10 15符合率： 100% 100%3 精密度验3.1 批内精密度：3.1.1 实验方案：选择低值、中值质控品，连

5、续检测 20次，记录并保存原始检测数据，计算 SD、CV 值。3.1.2 检测要求：批内精密度15%。3.1.3 结果HBsAg批内精密度样本号 低值 OD值 检测结果 样本号 中值 OD值 检测结果1 0.378 阳性 21 0.819 阳性2 0.345 阳性 22 0.775 阳性3 0.347 阳性 23 0.769 阳性4 0.328 阳性 24 0.78 阳性5 0.327 阳性 25 0.856 阳性6 0.337 阳性 26 0.754 阳性7 0.335 阳性 27 0.803 阳性8 0.331 阳性 28 0.845 阳性9 0.334 阳性 29 0.832 阳性10

6、0.352 阳性 30 0.783 阳性河北省儿童医院检验科 性能验证报告第 6 页 共 17 页11 0.366 阳性 31 0.789 阳性12 0.364 阳性 32 0.781 阳性13 0.349 阳性 33 0.83 阳性14 0.355 阳性 34 0.747 阳性15 0.356 阳性 35 0.819 阳性16 0.371 阳性 36 0.81 阳性17 0.395 阳性 37 0.787 阳性18 0.384 阳性 38 0.791 阳性19 0.377 阳性 39 0.791 阳性20 0.365 阳性 40 0.795 阳性低值样本 X= 0.355 s= 0.020

7、cv=5.6%中值样本 X= 0.798 s= 0.029 cv=3.6%HBsAb批内精密度样本号 低值 OD值 检测结果 样本号 中值 OD值 检测结果1 0.256 阳性 21 1.24 阳性2 0.226 阳性 22 1.238 阳性3 0.224 阳性 23 1.24 阳性4 0.211 阳性 24 1.188 阳性5 0.217 阳性 25 1.316 阳性6 0.212 阳性 26 1.27 阳性7 0.212 阳性 27 1.315 阳性8 0.22 阳性 28 1.33 阳性9 0.239 阳性 29 1.368 阳性10 0.215 阳性 30 1.298 阳性11 0.2

8、35 阳性 31 1.297 阳性河北省儿童医院检验科 性能验证报告第 7 页 共 17 页12 0.228 阳性 32 1.231 阳性13 0.227 阳性 33 1.441 阳性14 0.229 阳性 34 1.296 阳性15 0.215 阳性 35 1.307 阳性16 0.197 阳性 36 1.177 阳性17 0.229 阳性 37 1.258 阳性18 0.227 阳性 38 1.242 阳性19 0.221 阳性 39 1.233 阳性20 0.227 阳性 40 1.276 阳性低值样本 X= 0.223 s= 0.012 cv=5.5%中值样本 X= 1.278 s=

9、0.061 cv=4.8%HCV批内精密度样本号 低值 OD值 检测结果 样本号 中值 OD值 检测结果1 0.507 阳性 21 0.894 阳性2 0.456 阳性 22 0.77 阳性3 0.466 阳性 23 0.796 阳性4 0.461 阳性 24 0.81 阳性5 0.395 阳性 25 0.83 阳性6 0.447 阳性 26 0.805 阳性7 0.434 阳性 27 0.772 阳性8 0.457 阳性 28 0.845 阳性9 0.381 阳性 29 0.723 阳性10 0.408 阳性 30 0.739 阳性11 0.402 阳性 31 0.744 阳性12 0.42

10、8 阳性 32 0.771 阳性河北省儿童医院检验科 性能验证报告第 8 页 共 17 页13 0.413 阳性 33 0.823 阳性14 0.418 阳性 34 0.744 阳性15 0.449 阳性 35 0.765 阳性16 0.441 阳性 36 0.721 阳性17 0.386 阳性 37 0.843 阳性18 0.342 阳性 38 0.781 阳性19 0.364 阳性 39 0.854 阳性20 0.399 阳性 40 0.842 阳性低值样本 X= 0.423 s= 0.039 cv=9.3%中值样本 X= 0.794 s= 0.048 cv=6.1%3.2 批间精密度：3

11、.2.1 实验方案：选择低值、中值质控品，每天重复测定 5次，连续进行 4天，记录并保存原始检测数据，计算 SD、CV 值。3.2.2 检测要求：批间精密度 203.2.3 结果HBsAg批间精密度日期 低值 OD值 中值 OD值 日期 低值 OD值 中值 OD值4月 20日 0.395 0.787 4月 22日 0.277 0.6794月 20日 0.384 0.791 4月 22日 0.247 0.6654月 20日 0.377 0.791 4月 23日 0.255 0.5954月 20日 0.365 0.795 4月 23日 0.262 0.5994月 21日 0.321 0.75 4月

12、 23日 0.272 0.5954月 21日 0.319 0.779 4月 23日 0.239 0.6184月 21日 0.315 0.726 4月 24日 0.254 0.6294月 21日 0.32 0.696 4月 24日 0.269 0.654月 22日 0.261 0.611 4月 24日 0.256 0.6694月 22日 0.279 0.586 4月 24日 0.263 0.639低值样本 X=0.30 s=0.05 cv=16.79河北省儿童医院检验科 性能验证报告第 9 页 共 17 页中值样本 X=0.68 s=0.08 cv=11.16HBsAb批间精密度日期 低值 OD

13、值 中值 OD值 日期 低值 OD值 中值 OD值4月 20日 0.229 1.258 4月 22日 0.219 1.734月 20日 0.227 1.242 4月 22日 0.236 1.7764月 20日 0.221 1.233 4月 23日 0.208 1.5554月 20日 0.227 1.276 4月 23日 0.197 1.7434月 21日 0.192 1.543 4月 23日 0.201 1.7484月 21日 0.204 1.531 4月 23日 0.218 1.9594月 21日 0.191 1.574 4月 24日 0.2 1.6834月 21日 0.211 1.54 4

14、月 24日 0.202 1.6324月 22日 0.247 1.672 4月 24日 0.209 1.6094月 22日 0.244 1.756 4月 24日 0.206 1.586低值样本 X=0.21 s=0.02 cv=7.69中值样本 X=1.58 s=0.20 cv=12.55HCV批间精密度日期 低值 OD值 中值 OD值 日期 低值 OD值 中值 OD值4月 20日 0.386 0.843 4月 22日 0.383 0.7834月 20日 0.342 0.781 4月 22日 0.254 0.7454月 20日 0.364 0.854 4月 23日 0.385 0.7424月 2

15、0日 0.399 0.842 4月 23日 0.444 0.7654月 21日 0.339 0.709 4月 23日 0.383 0.6384月 21日 0.409 0.775 4月 23日 0.352 0.614月 21日 0.379 0.708 4月 24日 0.452 0.8224月 21日 0.398 0.75 4月 24日 0.418 0.8384月 22日 0.381 0.781 4月 24日 0.461 0.8244月 22日 0.478 0.778 4月 24日 0.429 0.854低值样本 X=0.39 s=0.05 cv=12.85中值样本 X=0.77 s=0.07 c

16、v=8.80河北省儿童医院检验科 性能验证报告第 10 页 共 17 页4 检出限验证4.1实验方案：根据康彻斯坦定值标准物浓度（见下表）的实际情况进行1:1，1:4，1:8，1:16 稀释检测，各浓度一次做 3个孔，然后计算出预测临界点(C50)，并重复检测 20次进行验证 C50；在此基础上，制备高于临界浓度 20和低于临界浓度 20的样本分别测定 20次，记录阴性及阳性结果数。4.2 实验要求：要求高于临界浓度 20的样本重复检测 20次应至少有 19次以上（95%）阳性反应，低于临界浓度 20的样本重复检测 20次应至少有 19次以上（95%）阴性反应，即为通过。4.3 实验结果HBs

17、Ag检出限序号 1 2 3 4 5稀释比例 原倍 1:2 1:4 1:8 1:16终浓度（IU/ml） 0.5 0.25 0.125 0.0625 0.0312OD值 0.531 0.252 0.115 0.047 0.017 预测临界点（C50）： 0.11IU/ml 河北省儿童医院检验科 性能验证报告第 11 页 共 17 页HBsAg检出限浓度 20次重复检测序号 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10OD值 0.116 0.109 0.116 0.108 0.102 0.105 0.118 0.111 0.108 0.107序号 11 12 13 14 15 16 17 18 19

18、20OD值 0.108 0.105 0.098 0.102 0.109 0.107 0.103 0.103 0.104 0.102X=0.11，经统计， 阳性结果数：13，阴性结果数：7，阳性结果比 65%，因此可以判定 0.11IU/ml为实验方法的临界点HBsAg20次高低浓度样本测定（20%样本浓度）+20%浓度 -20%浓度样本号 OD值 样本号 OD值 样本号 OD值 样本号 OD值1 0.126 11 0.131 1 0.068 11 0.0652 0.131 12 0.133 2 0.081 12 0.0653 0.137 13 0.128 3 0.072 13 0.0634 0

19、.136 14 0.133 4 0.072 14 0.0625 0.141 15 0.13 5 0.065 15 0.0676 0.133 16 0.13 6 0.066 16 0.0677 0.132 17 0.127 7 0.063 17 0.0768 0.127 18 0.129 8 0.063 18 0.0679 0.135 19 0.13 9 0.071 19 0.7110 0.135 20 0.124 10 0.07 20 0.066+20%浓度样本 OD均值 X=0.131，阳性数量 20，阳性比例 100%-20%浓度样本 OD均值 X=0.068, 阴性数量 20，阴性比例

20、100%临界值+20%浓度，也就是 0.14IU/ml即为该试验方法检出限HBsAb检出限序号 1 2 3 4 5稀释比例 原倍 1:2 1:4 1:8 1:16河北省儿童医院检验科 性能验证报告第 12 页 共 17 页终浓度（mIU/ml） 30 15 7.5 3.75 1.88OD值 0.386 0.179 0.079 0.034 0.013预测临界点（C50）： 9.16mIU/ml HBsAb检出限浓度 20次重复检测序号 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10OD值 0.118 0.082 0.09 0.074 0.094 0.115 0.081 0.092 0.085 0.10

21、4序号 11 12 13 14 15 16 17 18 19 20OD值 0.106 0.107 0.118 0.103 0.111 0.097 0.104 0.113 0.106 0.109X=9.16，经统计， 阳性结果数：9，阴性结果数：11，阳性结果比 45%，因此可以判定 9.16IU/ml为实验方法的临界点HBsAb20次高低浓度样本测定（20%样本浓度）+20%浓度 -20%浓度样本号 OD值 样本号 OD值 样本号 OD值 样本号 OD值1 0.194 11 0.197 1 0.078 11 0.0912 0.195 12 0.193 2 0.08 12 0.0753 0.19

22、9 13 0.19 3 0.09 13 0.0884 0.201 14 0.192 4 0.085 14 0.065河北省儿童医院检验科 性能验证报告第 13 页 共 17 页5 0.176 15 0.193 5 0.082 15 0.0826 0.199 16 0.19 6 0.094 16 0.0747 0.177 17 0.177 7 0.083 17 0.0928 0.202 18 0.178 8 0.094 18 0.0949 0.191 19 0.2 9 0.089 19 0.08910 0.195 20 0.199 10 0.097 20 0.093+20%浓度样本 OD均值 X

23、=0.192，阳性数量 20，阳性比例 100%-20%浓度样本 OD均值 X=0.085, 阴性数量 20，阴性比例 100%临界值+20%浓度，也就是 11mIU/ml即为该试验方法检出限HCV检出限序号 1 2 3 4 5稀释比例 原倍 1:2 1:4 1:8 1:16终浓度（NCU/ml） 0.5 0.25 0.125 0.0625 0.0312OD值 0.428 0.185 0.072 0.044 0.015预测临界点（C50）： 0.184NCU/ml 河北省儿童医院检验科 性能验证报告第 14 页 共 17 页HCV检出限浓度 20次重复检测序号 1 2 3 4 5 6 7 8

24、9 10OD 值 0.979 1.100 1.029 1.143 0.857 1.107 1.057 0.993 0.971 0.986 序号 11 12 13 14 15 16 17 18 19 20OD 值 0.971 0.986 1.057 1.243 1.350 1.114 0.857 1.100 1.000 1.021 X=0.184，经统计， 阳性结果数：13，阴性结果数：7，阳性结果比 65%，因此可以判定 0.184NCU/ml为实验方法的临界点HCV20次高低浓度样本测定（20%样本浓度）+20%浓度 -20%浓度样本号 OD值 样本号 OD值 样本号 OD值 样本号 OD值

25、1 0.343 11 0.356 1 0.091 11 0.0972 0.37 12 0.32 2 0.107 12 0.1063 0.339 13 0.264 3 0.092 13 0.1034 0.31 14 0.307 4 0.102 14 0.1065 0.305 15 0.398 5 0.096 15 0.1126 0.28 16 0.346 6 0.104 16 0.1067 0.315 17 0.373 7 0.105 17 0.138 0.337 18 0.288 8 0.096 18 0.1129 0.31 19 0.337 9 0.12 19 0.1110 0.267 20

26、 0.308 10 0.127 20 0.114+20%浓度样本均值 X=0.323，阳性数量 20，阳性比例 100%-20%浓度样本均值 X=0.107,阴性数量 20，阴性比例 100%临界值+20%浓度，也就是 0.22NCU/ml即为该试验方法检出河北省儿童医院检验科 性能验证报告第 15 页 共 17 页5 阴阳性符合率5.1 实验方案：20 份已确诊为阳性和 20份已确诊为阴性的标本在同一批检测，计算阳性符合率和阴性符合率。5.2 实验要求：阳性符合率和阴性符合率应95%以上。5.3实验结果：HBsAg阴阳性符合率临界值:0.105临床诊断明确的阳性样本 临床诊断明确的阴性样本样

27、本号 OD值 样本号 OD值 样本号 OD值 样本号 OD值1 3.000 3.000 1.347 1 0.007 11 0.0072 3.000 3.000 1.614 2 0.007 12 0.0073 3.000 3.000 1.04 3 0.006 13 0.0084 3.000 0.156 1.424 4 0.008 14 0.0065 3.000 3.000 0.944 5 0.009 15 0.0066 3.000 0.756 1.107 6 0.006 16 0.0087 3.000 0.182 1.348 7 0007 17 0.0078 3.000 0.558 0.744

28、8 0.008 18 0.0069 3.000 3.000 2.548 9 0.007 19 0.00710 3.000 0.160 2.552 10 0.006 20 0.007阳性符合率：100% 阴性符合率：100%HBsAb阴阳性符合率临界值：0.105 临床诊断明确的阳性 临床诊断明确的阴性样本号 OD值 样本号 OD值 样本号 OD值 样本号 OD值1 1.202 11 1.962 1 0.008 11 0.0072 2.205 12 2.193 2 0.006 12 0.0083 3.000 13 2.441 3 0.006 13 0.008河北省儿童医院检验科 性能验证报告第

29、16 页 共 17 页4 3.000 14 1.930 4 0.01 14 0.0075 2.437 15 2.627 5 0.007 15 0.0086 3.000 16 0.403 6 0.008 16 0.0087 3.000 17 1.703 7 0.009 17 0.0078 0.982 18 2.016 8 0.008 18 0.0099 0.359 19 2.476 9 0.007 19 0.00810 3.000 20 1.922 10 0.008 20 0.007阳性符合率：100% 阴性符合率：100%HCV阴阳性符合率临界值：0.140临床诊断明确的阳性 临床诊断明确的阴

30、性样本号 OD值 样本号 OD值 样本号 OD值 样本号 OD值1 1.458 11 0.751 1 0.008 11 0.0082 1.444 12 0.751 2 0.011 12 0.0093 1.162 13 2.355 3 0.008 13 0.0094 1.199 14 0.161 4 0.08 14 0.0075 0.674 15 0.367 5 0.009 15 0.0086 2.354 16 0.164 6 0.008 16 0.0087 2.438 17 0.505 7 0.007 17 0.0088 0.355 18 0.441 8 0.009 18 0.019 0.345 19 2.253 9 0.007 19 0.00810 0.371 20 2.323 10 0.006 20 0.008阳性符合率：100% 阴性符合率：100%河北省儿童医院检验科 性能验证报告第 17 页 共 17 页6 验证小结：本次验证实验分别对该试剂的正确度，精密度、符合率及检出限进行了考察。从实验结果可见，该试剂的精密度和重复性的变异系数均小于 15%，符合率为 100%。故该试剂性能验证结果符合要求，验证通过。