高中生物实验蛋白质的检测方案黄烜裕、黄琳然一、实验原理双缩脲(NH 2CONHCONH2)双缩脲反应原理:NH2CONHCONH2 +双缩脲试剂(A 液:0.1g/mlNaOH 溶液;B液:0.01g/mlCuSO 4溶液) =紫色络合物蛋白质中与双缩脲有类似的结构:肽键 CONH (至少含有两个肽键才能进行双缩脲反应) ,因此使用可用双缩脲试剂检测蛋白质。二、实验器材与试剂待测实验材料:氨基酸溶液、鸡蛋清稀释液、牛奶器材:电子天平、称量纸、100mL 烧杯 2个、50mL 烧杯、10mL 量筒、5mL 量筒、标签纸若干、试剂瓶 2个、吸管 2支、玻棒、试管若干试剂:固态 NaOH、无水 CuSO4三、实验步骤1、配制双缩脲试剂:A 液:质量浓度为 0.1g/mL NaOH ,取 5g固态 NaOH加蒸馏水溶解,稀释至 50ml;B 液:质量浓度为 0.01g/mL CuSO4,取 0.5g无水CuSO4溶于蒸馏水,稀释至 50ml。2、取 4支试管分别贴上标签,分别加入蒸馏水氨基酸溶液鸡蛋清稀释液 牛奶 各 2mL。3、分别向试管试管加入双缩脲试剂 A液 2mL,振荡摇匀。4、分别在试管滴入 4滴双缩脲试剂 B液,振荡摇匀。5、观察并记录试验现象四、预期实验结果: 号试管溶液呈蓝色(无反应,Cu+溶液呈蓝色) 号试管溶液呈紫色(双缩脲反应生成紫色络合物) 紫色络合物结构式