1、KKME-专业医学搜索引擎 http:/ snlnnoynymio药典标准药品名称森林脑炎疫苗拼音名 SenlinnaoyanYimiao 英文名 TICK-BORNEENCEPHALITISVACCINE 来源( 分子式)与标准本品系用森林脑炎病毒“森张”株，接种于地鼠肾单层细胞上，培养后收集病毒液，经甲醛溶液杀灭病毒后制成。性状本品为红色澄明液体。不应有任何异物。检查照中国生物制品规程中森林脑炎疫苗制造及检定规程的各项规定，进行试验，均应符合规定。类别生物制品。剂量皮下注射用量照说明书的规定。贮藏在 28的暗处保存。森林脑炎疫苗制造及检定规程1森林脑炎疫苗系用森林脑炎病毒“森林”株接种于地
2、鼠肾单层细胞，培育后收获病毒液，加入甲醛溶液将病毒灭活后制成。用于预防森林脑炎。毒种 1.1 毒种来源卫生部长春生物制品研究所保存之冻干毒种“森林”株。每35 年会同中国药品生物制品检定所应用新分离的流行株病毒攻击，检测“森林”株的保护力，以了解该毒株的有效性。1.2 毒种检定1.2.1 无菌试验毒种启封及每次传代后，均需做无菌试验，合格者方可使用。1.2.2 病毒滴定每正代必须用小白鼠进行脑内滴定。滴度9.0LogLD50/1.0ml 方可用于生产。1.2.3 纯毒试验生产前须用小白鼠脑内法做中和试验鉴定毒种的特异性，中和指数必须在 500以上。生产中如对毒种有怀疑，应及时进行鉴定。1.3
3、毒种传代分正亚代传递。传递代数正代不得超过 15 代，传代时选用体重KKME-专业医学搜索引擎 http:/ 健康小白鼠或乳鼠。每次毒种传代不得少于 3 个鼠脑。脑内接种病毒，72 小时后选择眼结膜正常，有典型战栗、痉挛、肢体麻痹的小白鼠，处死后无菌取脑，并进行无菌试验。如发现污染者，应及时废弃。1.4 毒种保存鼠脑毒种收剖经无菌试验后立即保存于-60以下，无菌试验通过后方可使用。亦可将鼠脑毒种研磨乳化制成 10%脑悬液，分装小瓶，冻存于-60以下，无菌试验合格后备用。冻干毒种保存在 28。森林脑炎病毒“森林”株属二类毒种，必须设专人按有关规定负责管理，使用前、后记录清楚。疫苗制造 2.1 细
4、胞制备 2.1.1 地鼠选用 2 周龄左右的健康地鼠。如发现肾脏异常或有乳糜状腹水，应废弃。2.1.2 细胞消化及培养处死地鼠，无菌取肾，加入适量胰蛋白酶液消化。用营养液分散细胞，制备细胞悬液，分装培养瓶，于 37进行培养。营养液中牛血清含量不得超过8%。 2.1.3 外源因子检查每生产批细胞留 5%（或不少于 500ml）悬液作为对照细胞检查外源病毒。该细胞除不接种病毒外，细胞尝试和处理均与生产过程平行进行。至原液收获之日，用显微镜观察，应无病变发生。并用 0.2%0.5%豚鼠红细胞（4保存不超过 7 天）进行血吸附试验，置 4830 分钟判定结果；再置 202530 分钟再次判定结果，均应
5、为阴性。如有可凝病变或血吸附可疑阳性，在同种细胞上继续盲传，如传出病毒，该批细胞制备的疫苗应予废弃。2.2 病毒接种和培育 2.2.1 生产毒种配制将鼠脑毒种解冻乳化，制成 10%20% 脑悬液，离心，取上清液作为毒种。亦可用冰冻鼠脑毒种悬液感染细胞。2.2.2 病毒接种和培育选择生长良好的细胞KKME-专业医学搜索引擎 http:/ 7.0LogLD50/1.0ml） ，在适当温度下培育适当时间，弃去病毒培养液，换以新维持液，继续培育一定时间。2.2.3 疫苗生产过程中不得加青霉素或其他 内酰胺类抗生素。2.3 原液 2.3.1 病毒灭活选择有典型细胞病变的培养瓶，经肉眼检查无菌者进行澄清过
6、滤，按瓶取无菌试验及病毒滴定样品，取样后立即加甲醛溶液和硫柳汞，使甲醛的最终浓度为 0.05%，硫柳汞为 0.005%，置适当温度下灭活。无菌试验为接种琼脂斜面培养基，3 天判定，长菌者废弃。2.3.2 过滤合并及取样单瓶无菌试验未长菌、灭活到期、病毒滴定合格的疫苗进行过滤合并，摇匀后做无菌试验，取安全试验和效力试验样品。安全试验每批合并检定疫苗量不得超过 15 万 ml，效力试验每批合并检定疫苗量不得超过 100 万 ml。检定批号和成品批号应一致。2.3.3 原液检定 2.3.3.1 无菌试验按生物制品无菌试验规程进行。2.3.3.2 病毒滴定将滴定样品做 10 倍系列稀释，取至少 3 个
7、稀释度，每个稀释度病毒液脑内接种体重 79g 小白鼠 4 只，每只0.03ml，逐日观察，14 天判定结果（3 天内非特异性死亡者不计， ）滴度7.0LogLD50/1.0ml 判为合格。不合格者可重试一次。每个滴定批代表疫苗量不得超过 15 万 ml。2.4 半成品检定 2.4.1 灭活试验（1）动物法：将样品脑内接种体重 1214g 小白鼠 8 只，每只0.03ml，同时腹腔接种 0.5ml，为第一代； 7 天后将第一代小白鼠处死 3 只，取脑做成 10%悬液，脑内接种 6 只小白鼠，为第二代；7天后将第二代小白鼠处死 3 只，同法接种 6 只小白鼠，为第三代。KKME-专业医学搜索引擎
8、http:/ 14 天，在观察过程中全部健存为合格，接种后 3 日内非特异性死亡者不计。若传代 3 日后有个别小白鼠死亡，应立即取死鼠脑乳化成悬液再接种 3 只小白鼠，观察 14天，该 3 只小白鼠健存仍判为合格。如仍有小白鼠死亡，该批疫苗应重试，重试合格后仍可使用。若传出活病毒应重试，查明原因。必要时继续灭活并进行灭活试验，若仍传出活病毒，该批半成品应予废弃。 （2）细胞培养-动物法：将样品 50ml 装入透析袋内，放入60008000ml 维持液中于 4透析 24 小时，接种地鼠肾细胞或BHK21 细胞，每 ml 样品接种不少于 3cm2 的细胞片，置培养病毒的温度下培育 14 天，全部健
9、存判为合格。若有死亡者应查明原因或重试，重试合格者仍可使用，不合格者应废弃。以上两种灭活试验方法可任选一种。2.4.2 残余牛血清蛋白含量测定用检定所认可的试剂和方法测定，残余牛血清蛋白含量应50ng/ml。2.4.3 效力试验每批疫苗腹腔免疫体重 1012g 小白鼠 35 只，于第 1、3、5 日共免疫 3 次，每次每只小白鼠 0.3ml。另取同批小白鼠 35 只作为空白对照。于第 10 日以“森林”毒种 0.3ml 进行腹腔攻击，每天观察 1 次，观察 21 天判定结果。对照组 LogLD50/0.3ml 在 7.5 以上，免疫保护指数达 100000 以上为合格。不合格者可重试 1 次。
10、成品检定 3.1 物理检查疫苗应为橘红色透明液体，无异物。3.2 化学检查按生物制品化学检定规程进行。pH 值为 7.28.0。游离甲醛不高于 0.05%，硫柳汞不高于 0.01%。3.3 无菌试验按生物制品无菌试验规程进行。3.4 安全试验每批疫苗腹腔注射体重 1820g 小白鼠 4 只，KKME-专业医学搜索引擎 http:/ 0.5ml，逐日观察， 3 日内全部健存判为合格。如有小白鼠死亡，除检查原因外，应立即进行重试。3.5 亚硫酸氢钠检定分装后亚硫酸氢钠要进行含量测定和无毒性试验。含量不得低于原配浓度的60%。无毒性试验系将样品稀释成 1100，腹腔注射体重 1820g小白鼠 2 只
11、，每只 0.5ml，观察 5 日，应全部健存。保存与效期保存于 28暗处。自效力检定合格之日起效期为 2 年。森林脑炎疫苗使用说明书森林脑炎疫苗系用森林脑炎病毒“森张”株接种于地鼠肾单层细胞，培育后收获病毒液，加入甲醛溶液将病毒灭活后制成。为橘红色透明液体，含硫柳汞防腐剂。用于预防森林脑炎。接种对象有森林脑炎发生地区的居民及进入该地区的人员。用法本疫苗接种后，人体要经过 1.52 个月后免疫力才达到最高，因此，应在每年月份以前完成接种工作。1.于上臂外侧三角肌附着处皮肤消毒后皮下注射。2.剂量：针次 26 岁 710 岁 1115 岁 16 岁以上第一年第一针 0.5ml1.0ml1.5ml2
12、.0ml 第一年第二针0.5ml1.0ml1.5ml3.0ml 以后每年注射一次 0.5ml1.0ml1.5ml3.0ml 注：第 1 针与第 2 针间隔 710 日。为减轻注射疼痛，注射前每 5ml 疫苗加入亚硫酸氢钠液 0.2ml，疫苗由红色变为黄色即可注射。禁忌发热，急性疾病及严重慢性疾病，神经系统疾病，过敏性疾病及既往对抗生素、生物制品有过敏史者，妇女哺乳期、妊娠期均不可注射。反应注射后一般无反应，个别有发热、头晕。有皮疹者应注意观察，必要时给予适当治疗。注意事项 1.安瓿有裂纹，疫苗混浊、变色、曾经冻结、有异物及摇不散的絮状物者均不可使用。2.应备有KKME-专业医学搜索引擎 http:/ 肾上腺素，以备偶尔发生休克时急救用。接受注射者在注射后应在现场休息片刻。3.发热、急性传染病及严重慢性病患者，神经系统疾病，过敏性疾病及有过敏史的患者和孕妇均禁用。4.注射后小时少数人会有反应，多迅速恢复正常，晕厥者可注葡萄糖液或喝糖水，必要时注射肾上腺素（:）（儿童酌减） 。保存应保存于 28暗处。参考资料.“中国生物制品规程“.大头医生 http:/
