1、编码： 高效液相色谱仪验证方案 第 1 页 共 12 页 高效液相色谱仪验证文件年（设备编号：）有限公司编码： 高效液相色谱仪验证方案 第 2 页 共 12 页 目 录 1 验证方案的起草与审批2 概述3 验证目的4 再验证人员5 验证支持性文件6 相关文件检查7 仪器状态检查8 运行确认9 性能确认10 再确认编码： 高效液相色谱仪验证方案 第 3 页 共 12 页 1 验证方案的起草与审批1.1 验证方案的起草仪 器 名 称 仪 器 编 号 验 证 编 号高效液相色谱仪 起 草 人 部 门 日 期1.2 验证方案的审批审 核 人 部 门 日 期批 准 人 部 门 日 期编码： 高效液相色谱
2、仪验证方案 第 4 页 共 12 页 2 概述： 设备名称：高效液相色谱仪 设备编码：. 规格型号： 制造商：本高效液相色谱仪主要由四元泵、一个柱温箱、一个可变紫外检测器、一个自 动进样器和一台工作站组成，各部分由工作站软件控制。本仪器主要用于分析原料和成品的有关物质和含量。为验证本仪器性能的稳定性，确认本仪器在检验工作中的准确性，特安排本次验证。3 验证目的：3.1 设备安装状态检查：检查设备各部件完整无损，电源稳定可靠，安装环境符合要求，确认仪器经过校正合格且在有效期内。3.2 运行确认：确认仪器的各种控制功能与性能符合要求；在正常运行情况下，确认高压泵的流速，柱温箱温度控制和自动进样器等
3、符合要求；确认电脑及工作站权限使用设置与运行，数据处理稳定可靠。3.3 性能确认：以检测为例，证明高效液相色谱仪系统适应性，.检测的线性及重复性等性能符合要求4 再验证人员：姓 名 负 责 内 容 所在部门项目负责人，负责验证的组织及实施，各步 骤验证内容的确认汇总、撰写验证报告质量监控负责验证项目的操作实施5 验证支持性文件本方案依据下面列出规范的有关条款，结合本公司需求制定。以下规范为有效的最新文本，设备所提供的性能及参数应能满足以下规范的有关要求。编码： 高效液相色谱仪验证方案 第 5 页 共 12 页 高效液相色谱仪计量检定规程JJG 705-2002 液相色谱仪标准操作程序 高效液相
4、色谱仪使用说明书 药品 GMP 指南 中国药品检验标准操作规范6 相关文件检查6.1 检查确认文 件 名 称 存 放 地 点检测人 复核人 日期6.2 相关文件检查结果相关文件检查偏差：建议：相关文件检查结论：相关文件检查确认人： 日期：7 仪器状态检查7.1 目的：检查仪器各部件及配套设施完好如初，安装环境符合要求，确认仪器经过校正合格且在有效期内。7.2 检查确认高效液相色谱仪各设备部件的现场状态，记录各项指标。项目 要求 检查结果仪器外观应有仪器的名称、型号、制造厂名、产品系列号、出厂编码： 高效液相色谱仪验证方案 第 6 页 共 12 页 日期等内容的标牌。仪器电路系统仪器电源线、信号
5、线等插接紧密，各开关、旋钮、按 键等功能正常，指示灯灵敏，显示器清晰。安装环境应清洁无尘，无易燃、易爆和腐蚀性气体，排风良好。室温在 530，湿度在2080%RH 范围内。仪器安装确认仪器应平稳地放在工作台上，周围无强烈机械震动和电磁干扰源，仪器接地良好。电源电压为（22022）V，频率为（500.5）Hz 。进样器 清洁，连接密封，安装稳固流动相试剂瓶 清洁，安装稳固。电脑 清洁，安装稳固。仪器校验 校验合格。检测人 复核人 日期7.3 仪器状态检查结果仪器状态检查偏差：建议：仪器状态检查结论：状态检查确认人： 日期：8 运行确认：8.1 目的：确认仪器的各种控制功能与性能符合要求；在正常运
6、行情况下，确认高压泵的编码： 高效液相色谱仪验证方案 第 7 页 共 12 页 流速，柱温箱温度等符合要求；确认电脑及化学工作台的权限设置有效、运行稳定，数据处理稳定可靠。8.2 功能测试，按高效液相色谱仪标准操作规程运行设备，记录各项参数。项目 要求 检查结果 结论高压泵在 0.12.0mL/min 范围内，流速调节自如，压力显示正常。手动旋开冲洗阀，点击“冲洗”按钮，排气正常，压力显示应10bar 。自动进样器连接电源，启动仪器，样品转盘旋转正常，自动进样器移动正常。紫外检测器在 400200nm 范围内，波长调节自如，电位显示正常。检测人 复核人 日期8.3 电脑与仪器 PC 端控制工作
7、台的运行权限及功能确认项 目 要 求 检查结果电脑使用权限 接通计算机电源，启动计算机后，计算机出现选择用界面；选定用户后，需输入密码后才能登录。仪器工作站软件使用权限用户启动工作站后，需要输入账户和密码后才能登录。检测人 复核人 日期8.4 高压泵流量稳定性测试（常用流量范围为 0.51.5mL/min）将仪器的输液系统、进样器、色谱柱和检测器连接好，以水为流动相，设定不同的流编码： 高效液相色谱仪验证方案 第 8 页 共 12 页 量，待流速稳定后，在流动相排出口用事先清洗称重过的 10mL 容量瓶收集流动相，同 时用秒表计时，准确收集至规定的时间，称重，计算实际 流量。计算其 Ss 应小
8、于 2%。计算公式：Fm=(W2-W1)/（t）Ss = (Fm-Fs)/Fs 100%其中：Fm 为流量 实测值(ml/min)， Fs 为流量设定值(ml/min)，W2 为容量瓶加流 动相的重量 (g)，W1 为容量瓶的重量(g)， 为实验温度下流动相的密度(g/cm3)，t 为收集流动 相的时间(min)。 仪器/型号/编号/有效期/计量特性：1、天平/ 2、温度计/ 水温： 水密度： g/cm3泵 设定值 Fs 水重量（g） 测定值 Fm 平均值 检查结果 结论A泵 1.0 ml/minB泵 1.0 ml/minC泵 1.0 ml/minD泵 1.0 ml/min检测人 复核人 日期
9、8.5 柱温箱温度设定值误差 Ts 和控温稳定性 Tc方法：将数字温度计探头固定在柱温箱内，开启柱温箱，设定温度为 35，待温度稳定后，记下温度计读数并开始计时，以后每隔 10min 记录一次读数，共 计 7 次，求出平均值。Ts 不超过2 ，Tc 不超过 1。计算：Ts 为平均值与设定 值之差，Tc 为 7 次读数中最大 值与最小值之差。仪器/型号/编号/有效期/计量特性：温度巡检仪/ 编码： 高效液相色谱仪验证方案 第 9 页 共 12 页 各时间点温度0min 10min 20min 30min 40min 50min 60min平均值 Ts Tc 结论检测人 复核人 日期8.6 基线漂
10、移和基线噪声的测定将仪器的各部分连接好，紫外检测器波长调到 254nm，流动相为 100%甲醇或 10%甲醇溶液，流速为 1.0ml/min，开机，待基 线稳定后，记录 基线，在 20 分钟的基线上，计算基线漂移和噪声。要求 检查结果 结论基线漂移 基线噪声 基线漂移 基线噪声510-3(AU/h) 510-4(AU)检测人 复核人 日期8.7 紫外检测器波长准确度和重复性方法：将检测器通电预热稳定后，用注射器将紫外波长标准溶液（标准波长为 235nm ，257nm，313nm 和 350nm）从检测器入口注入样品池中冲洗，并将池充 满。启动色谱工作站分析模块，将 检测器波长调到 200nm4
11、00nm 范围，进 行色谱扫描，每个波 长重复测量 3 次， 记录波峰（或波谷）对应的波长，并与 标准波 长比较。紫外波长标准溶液配制：称取基准重铬酸钾约 12mg，置 200mL 量瓶中，用0.005mol/L 硫酸液溶解并稀释至 200mL。波长准确度（不超过2nm）：最高（或最低）色谱峰对应 的波长与标准溶液波长之差。波长重复性（优于 2nm）：每个波长重复测量 3 次，其中最大值与最小值之差。设定值 Fs 扫描特征峰 检查结果编码： 高效液相色谱仪验证方案 第 10 页 共 12 页 1 2 3 平均值波长准确度波长重复性结论235nm257nm313nm350nm检测人 复核人 日期
12、8.8 运行确认结果运行确认偏差：建议：运行确认结论：运行检查确认人： 日期：9 性能确认9.1 目的：以检测为例，证明高效液相色谱仪系统适应性，检测的线性及重复性等性能符合要求。9.2 系统适应性用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以。 。为流动相；柱温为 35，检测波长为。nm；取供 试 品溶液，精密量取 10ul，注入液相色谱仪，与供试品溶液色谱图相比，出峰次序依次为、。理论板数按计算 应不低于 1500，各色谱峰的分离度应符合要求。9.3 检测线性测试取样品（ ）约 0.25g，用流 动相溶解并定容至 50 ml，摇匀；为溶液 A。分别准确吸取溶液 A 1ml，2ml，4ml，6ml，8m
13、l 于 5 个 50ml 的容量瓶中，加流动相至刻度,摇匀。溶液相当于每 ml 约含 100ug，200ug，400ug，600ug，800ug。取 10l 注入液相色谱仪，记录图谱。考查线性关系。编码： 高效液相色谱仪验证方案 第 11 页 共 12 页 的线性关系浓度 C（mg/ml） 1 2 4 6 8峰面积 T3线性方程相关系数示意图：检测结果小结：9.4 检测重复性测试称取样品（ ）约 0.2g，称定 6 份，用水溶解并定容至 50 ml，再精密吸取 5ml用流动相溶至 50ml，摇匀；取 10l 注入液相色谱仪，记录图谱。计算 其他杂质以及杂质总量的百分比。重复性测定序号 1 2
14、3 4 5 6 %平均值RSD（%）其他杂质重复性测定序号 1 2 3 4 5 6其他杂质%平均值RSD（%）杂质总量重复性测定序号 1 2 3 4 5 6编码： 高效液相色谱仪验证方案 第 12 页 共 12 页 杂质总量%平均值RSD（%）检测结果小结：9.5 系统适应性、线性测试和重复性测试检测结果表项 目要 求检查结果结论峰理论塔板数 应1500峰 应1.5峰 应1.5分离度 峰 应1.5检测线性 R20.998 检测重复性 RSD1.0% 其他杂质检测重复性 RSD10.0%杂质总量检测重复性 RSD5.0% 检测人 复核人 日期9.6 性能确认结果性能确认偏差：建议：性能确认结论：性能检查确认人： 日期：10 再确认仪器再验证周期为 1 年，仪器维修后需要重新对关联项目进行再验证。
