1、肺癌及癌前病变组织芯片中 PTEN 的表达及其意义?52?肿瘤 2006 年 1 月第 26 卷第 1 期 TumorVo1.26,No.1,Jan.2006ClinicalResearch?临床研究肺癌及癌前病变组织芯片中 PTEN 的表达及其意义李艳-,王新允 z,刘婷,朱丛中孙翠云 ,王爱香,赵敏,吴兴业(1.天津市第一中心医院病理科,天津 300192;2.天津医科大学病理教研室 ,天津300070)摘要目的:检测肺癌组织中 PTEN 蛋白的表达,并探讨其在肺癌发生,发展中的作用和意义.方法:利用组织芯片技术和免疫组化方法,检测原发性肺癌 89 例,淋巴结转移性肺癌 12 例,癌前病变
2、 l2 倒和正常肺标本 1O 例中 PTEN 蛋白的表达情况.结果:原发性肺癌中 PTEN 阳性率为 44.9,显着低于正常组 (90.0)(Po.05);PTEN 的表达与分化程度,淋巴结转移和临床分期相关(Po.05).结论:PTEN 蛋自在肺癌中的表达阳性率降低,并且与病情进展程度相关,PTEN 的失活促进了肿瘤的发生和发展,与预后不良相关.关键词 肺肿瘤 ;基因,抑制 ;PTEN;预后中图分类号R734.2文献标识码A 文章编号10007431(2006)01005203ExpressionofPTENanditsroleinlungcancerousandprecancerousle
3、sionsIIYan.WANGXinYun,I.IUTing!,ZHUCongZhong,SUNCuiYun,WANGAiXiang,ZHAOMin,WUXingYe(1.DepartmentofPathology,TianjinFirstCentralHospital,Tianin300192,China;2.DepartmentofPathology,TtaninMedicalUniversity,Tianin300070,China)ABSTRACTObjective:Toinvestigatetheroleofphosphataseandtensinhomologuedeletedon
4、chromosometen(PTEN)expressioningenesisandprogressoflungcancer.Methods:TheexpressionofPTENwasdetectedbyimmunohischemistryandtissuemicroarraytechnology.Thetotalsamplesincluded89casesofprimarylungcancer,12casesofmetastaticcancerfromlymphnode,10casesofprecancerouslesion,and10casesofnormallungtissue.Resu
5、lts:ThepositiverateofPTENinprimarylungCancerwas44.9,whichwassignificantlylowerthanthatofnormallungtissue(90.0)(P0.05).TheexpressionofPTENwasassociatedwiththedifferentiationdegrees,lymphnodemetastasis.andclinicalstagesoflungcancer(P0.05).Conclusion:ThepositiverateofPTENexpressioninlungcancerwasdownre
6、gulatedanditwasrelatedtotheprogressoflungcancer.PTENgeneinactivationmaypromotelungcancergenesisanddevelopmentwhichmaycontrihutetopoorprognosis.1KEYWORDS1ungneoplasms;Gene,suppressor;Phosphataseandtensionhomologydeletedonchromosometen;PrognosisTumor,2006.26(1):52-54磷酸酶及第 10 号染色体缺失的张力蛋白同源区(phosphatase
7、andtensionhomologydeletedonchromosometen,PTEN)是一种肿瘤抑制基因,具有抑制肿瘤发生,发展和转移的作用,许多肿瘤存在PTEN 基因异常.本研究通过组织芯片技术检测不同类型发展阶段肺癌中 PTEN 蛋白的表达情况,并探讨 PTEN 基因在肺癌发生,发展中的作用和意义.l 材料与方法1.1 标本来源收集天津医科大学总医院及第二附属医院病理科 19872003 年手术切除的肺癌石蜡包埋标本.入选条件:病史资料齐全;术前未经放疗及化疗患者.其中原发性肺癌 89 例(包括腺基金项目 天津市科委重点攻关课题(编号:033804211)作者简介 李艳 (1978)
8、,女(汉族).硕士.住院医师(,0rresp0ndjngamhor,Tel:02223626599E癌 35 例,鳞癌 33 例,小细胞癌 12 例,大细胞癌 9例),淋巴结转移性肺癌 l2 例,以及癌前病变(为不典型腺瘤样增生)12 例.原发性肺癌中男性 67 例,女性 22 例,年龄 3378 岁,平均年龄(60.289.48)岁 .按 1999 年世界卫生组织(WHO)肺及胸膜肿瘤组织学类型修订方案,并参考外科诊断病理学对全部资料进行统一命名和分类.对照组取自同期正常肺组织 1O 例,包括 3 例手术切除炎性假瘤病例的正常肺组织和 6 例尸检的正常肺组织,以及1 例肺大泡的正常肺组织.所
9、有标本均经病理证实.正常肺和原发性肺癌组织每例取 2 点,癌前病变和转移癌每例取 3 点,共计 270 点.1.2 方法1.2.1 组织芯片制备全部标本均经 lO 福尔马林固定,常规石蜡包埋,HE 染色.由病理专家复查HE 切片 ,在相应蜡块上标记要选取的组织点.用组织芯片仪在空白蜡块上按设计好的位置打孔,孔IF,J 册#1 十HE任 cil1 扎心距 Illl】 】l 川“lllI1c1 牟剌 fI 将怕 l 的 mf 乍卦【旦“小出转防刮申 I1 蜡块九.棚 J位竹.制 J 芯片蜡埂 lI-11 片攒片将切片十(过俊11 矗为忙呆 jH 健玺掘化技术.乩抗几 PTI:N 单兜降抗倬 c 北
10、京 t 山生物拽水公司),s】铯癌他色制囊(京中山产lllJ1J 喜啦鼎控试剂箍酏明书进行一抗衙弹涞成为 J:川已 m 性哪片件列 j.川【Jl;s1 替机“ 生照 lI 雠醯盐进 fI 抗池偿复 【)AI 显色.【I 细胞怛中州株包啊牲为表选肚1.1I 结器争 )简稃准 P1FJ 芷山恃越色刚托干世桉 f 细出 r齐坪,.根据者包勺慢靳:f,占包匀一 J.轻蛙荇包 i.虚营色灯蛐苕乜 l 为.-:荷色肿珊细胞肿瘌细胞数的山竹二:毛着色眦 c1!l_!c-为.川-种仆 为蔽僻舒.引亡I 坦 I 一米向同一痫御的点 j骨组圳曙发肚帅蝌取!电.懂病墅转移癌帆点日舒墩甲均.符 2t.!为 J 忖iI
11、 统计学击州 sP:-;s【rizI】PlEN 庄告纽r 蠢然的车的叱鞍震川 f 舱或 Fr 精矾帆车计茸幢骑小准一,iJ2 结果21 组织甚观察恂建翻 llj:1 制什过程,IT柯肚移位外 l_见采“J 排列昝卉 (I)HE 姑包基小无抻片,m 乔和_I 裂.免牲组化包巾见仃 t,别点锭侈俺,锹脱.目观察I 玷襞的划定目 I 组织芯片蜡块!PTEN 嚣白每不组虹中的表过 PIEN 是选性啦包位细榨(降:-M 纽 lIrlEN怕性皋舒别:正常】.慨 I_f 蚺监).-(R1).拄性刖 J_jrIi-)1 淋巴结转降肺痈 JrJ2,原垃 l 州蚓衄 PTEN 的阳阜显苦低丁止常纽 f,“.fJ)
12、.娘发帅精转移,【常纽缎与瘾 R_犒业,瞰_艟肺癌与蠕 l 蛹变之川 PTEN 丧迭着眭差辟 c 尸【.见丧 1j目 2lc自在肺鳞癌中的阳陛表达P IJIqg2Il,t-mrP1FI.2Nprlr-nill一 ll_1u,vt.IIc?|1.?mrlulls:PI0PlE 蠢白氛达与临床稿理参数的关系丧!高 lt化绀 plEN 性阜显并岛 r 低木分化组 cP1)【)何淋岜转酵组 lEN 率显苦低 f 无卅转俘卦 1jllcI 小 H 球,抽肺蝴 EN 的陛率白着莘#.If 的表达水平显着商十吼斗 l 们 cfl 暾发肺癌f 司学粪H 陛车舒别为:腺坦】.(1j,坼癌_1). 小皇_l 地崭
13、 cI12j,火细胞师()= ,tl“纽问丝肄了己 .j 篙(Pll)衷 2 原发陛肺搞中 IrlE 的表达与临床病理参数的关系Ialk.Filerei;til).hlphetlrlI2NmlcJiI0palh?Jl(l 蚰 lpti1primarIiiuri.,Il,PJIiii11f1_Ih-iF.11警._币一一舞一.-.:赫糍肿瘤 2006 年 1 月.第 26 卷3 讨论本研究中选取正常肺组织,癌前病变,原发性肺癌和淋巴结转移性肺癌制作而成的组织芯片,是一种肿瘤进展组织芯片,可研究不同进展阶段肺癌中PTEN 蛋白表达的情况和相关性.本研究全部实验组织集中在 1 张切片中,大大节省了时
14、间和试剂,而且使各组织点的实验条件一致,减少了实验误差.PTEN 基因是近年来发现的一种具有双重特异性磷酸酶活性的肿瘤抑制基因,定位于染色体10q23,编码蛋白质酪氨酸磷酸酶(PTP),且与张力蛋白,辅助蛋白有大片同源区.PTEN 蛋白通常情况下定位于细胞膜,细胞质,磷酸化后入核较普遍,本实验 PTEN 定位于细胞核.PTEN 蛋白的肿瘤抑制功能与它的磷脂第二信使 PiP3 和 PIP2 的脱磷酸功能相关,这样来对抗 PI3K 途径一.许多癌基因产物都是通过磷酸化而刺激细胞生长,PTEN则通过去磷酸化作用而发挥抑癌功能.PTEN 基因编码的蛋白具有磷酸酯酶的特征和作用,可负向调节 PI3K/A
15、kt 信号通路,对抗 PI3K 途径转导的生长和生存信号,抑制肿瘤的发生和发展,还能抑制细胞迁移及局部粘连的扩展和形成.Bandyopadhyay等 l2 研究发现 PTEN 可通过上调肿瘤转移抑制基因 Drg 一 1 而抑制前列腺癌和乳腺癌的转移.Akt 是抗细胞凋亡的一个重要的调节分子,多种恶性肿瘤存在 PTEN 基因的突变或缺失,导致 PI3K/Akt 信号通路活性增高:.Kandasamy 等 J1 在肺癌细胞中转染 PTEN 可下调 Akt 水平,降低其对 TRAIL凋亡途径的抵抗性,且 PTEN 失活或活化的 Akt 过表达都会促进 NSCIC 细胞系的生长.研究发现许多肿瘤中存在
16、 PTEN 基因的异常,包括基因突变,杂合性缺失(IOH),纯合性缺失,启动子甲基化等.Soria 等研究发现在 125 例早期NSCLC 中有 24(30/125)为 PTEN 蛋白阴性;检测 20 例 PTEN 阴性样本中有 35 存在 PTEN 启动子甲基化.本研究中 PTEN 在正常组织,癌前病变,原发性肺癌,转移癌中的阳性率分别为 90.0,66.7,44.9 和 25.0,呈逐渐降低趋势,原发性肺癌中PTEN 阳性率显着低于正常组(P0.05).说明PTEN 在肺癌发展过程中的表达缺失率呈一种逐渐升高的进行性变化趋势,逐渐丧失其抑癌功能.PTEN 在高一中分化组的阳性率显着高于低一
17、未分化组(PG0.05);在有淋巴结转移组的阳性率显着低于无淋巴结转移组(P0.05);随着临床分期升高,其阳性率显着降低(PG0.05).这些都说明了PTEN 能够抑制肺癌的发生和发展,其的失活丧失了去磷酸化能力,使得某些癌基因活化引起其下游基因的一系列改变,使肿瘤增殖能力加强,侵袭性增加,容易转移,预后不良.因此,PTEN 在肺癌发展的过程中可能起到重要作用,它的失活促进了肺癌的发生和发展,并具有预后评估的价值.参考文献r1FRANCISCAV.SHIVAPRIYAR.NORIAKIN,eta.PhosphorylationofthePTENtailregulatesproteinstab
18、ilityandfunctionJ.MolCellBio1.2000.20(14):50105018.2BANDY()PADHYAYS,SUDHAK,HIROTAS.ela1.PTENupregulatesthetumormetastasissuppressorgeneDrg-1inprostateandbreastcancerEJ.CancerRes.2004.64(11):7655-7660.3GRAFFENRIEI)I,FUICHERI.FRIEDRICHSW.ela1.ReducedPTENexpressioninbreastcancercellsconferssusceptibili
19、tytoinhibitorsofthePI3kinase/AktpathwayJ.A,m(o1.2004,15(10):15101516.E4KANDASAMYK,SRIVASTAVAR.Roleofthephosphatidylinositol3kinase/PTEN/Aktkinasepathwayintumornecrosisfactorrelatedapoptosis-inducingligand-inducedapoptosisinnonsmallcelllungcancercellsJ.CancerRes.2002.62(9):49294937.5SORIAJ.LEEH,LEEJ.
20、el“.LackofPTENexpressioninnonsmallcelllungcancercouldberelatedtopromotormethylationJ.(linCancerRes.2002.8(5):11781184.6BEPIERG.sHARMAS.CANTORA,ela1.RRM1andPTENasprognosticparametersforoverallanddiseasefreesurvivalinpatientswithnonsmallcelllungcancerJ.JClinOmol,2004,22(10):18781885.收稿 Et 期20050512修回日期 20050803本文编辑 褚敬申
