1、扶正解毒颗粒对硫酸镍致大鼠睾丸细胞ATP 酶活力的影响毒理学杂志 2008 年 4 月第 22 卷第 2 期 JToxicolA12008Vo1.22No.2中图分类号:R114 文献标识码:A 文章编号:10023127(2008)02013402?实验研究?扶正解毒颗粒对硫酸镍致大鼠睾丸细胞 ATP 酶活力的影响卢文艳,孙应彪,常旭红,王学习,赵健雄(1.兰州大学公共卫生学院卫生毒理学研究所,甘肃兰州 730000;2.兰州大学基础医学院中西医结合研究所)关键词:扶正解毒颗粒(FJK);睾丸;硫酸镍(NiSO4);Ca2 一 ATP 酶;Na 一 K 一 ATP酶研究发现,镍可通过血睾屏障
2、,对雄性动物生殖系统产生一定的毒性损害作用.J.文献报道,中药对硫酸镍(NiSO4)致肝,肾及睾丸组织的损伤具有一定的防治作用.我们旨在观察扶正解毒颗粒(FJK)对NiSO 致大鼠睾丸组织中镍含量以及 Na.K.ATP 酶,Ca“.ATP 酶活力的影响 ,为中药防治镍生殖毒性提供一定的线索.1 材料与方法1.1 动物成年健康 SD 雄性大鼠 32 只,体重(18020)g,由兰州大学医学实验动物中心提供.1.2 试剂及仪器扶正解毒颗粒(FJK):甘肃省食品药品监督管理局批准,文号为 FJK 甘药制字Z07031625;由红芪,当归,枸杞,丹参和苻苓等中药组成,兰州太宝制药有限公司生产.NiSO
3、:分析纯,西安化学试剂厂.Na.K.ATP 酶及 Ca“.ATP 酶试剂盒:购于南京建成生物工程研究所.1.3 方法1.3.1 动物分组和处理:健康雄性 SD 雄性大鼠 32只,随机分为 4 组,即生理盐水(NS)组,NiSO2.5mg/kg 染毒型组,FJK5,10g/kg 组.NS 组:2ml/kg 生理盐水每天腹腔注射,连续 30d,于第 l0 天每天同时以生理盐水 10ml/kg 灌胃;NiSO 染毒组:每天腹腔注射NiSO,连续 30d,于第 l0 天每天同时以生理盐水 l0ml/kg 灌胃;FJK 组:染毒方法和剂量同上,于染毒第 l0天,每天同时分别以 5,l0g,kgFJK 灌
4、胃,连续 3 周.1.3.2 睾丸组织匀浆的制备及指标检测:于第 3l 天处死大鼠,迅速摘取睾丸,计算睾丸脏器系数,然后去被膜及血管,剪取小部分睾丸组织,测定其镍含量;剩余睾丸组织用玻璃匀浆器制成质量浓度为 10%的(0.9%NS)组织匀浆,冷冻离心机 3000r/min 离心 l0作者简介:卢文艳,硕士研究生,研究方向为毒理学.通讯作者:孙应彪,硕士研究生导师,研究方向:镍毒性及其防治的研究.min,弃去沉淀,取上清液,严格按操作规程,用 Na.K.ATP 酶及 Ca2.ATP 酶试剂盒检测其相应酶活力,以每小时每毫克组织蛋白分解 ATP 产生 l 肚 mol 的无机磷的量为一个酶活力单位,
5、即 ttmol/(mg?h).1.4 统计学方法采用 SPSS13.0 统计软件,进行单因素方差分析并行两两比较.2 结果2.1FJK 对 NiSO4 致大鼠睾丸中镍含量及睾丸脏器系数的影响由表 l 可见,NiSO 组大鼠睾丸中镍含量高于 NS 组(P0.05),FJK 组镍含量明显降低 (P0.05).表 1FJK 对 NiSO,致大鼠睾丸中镍含量及睾丸脏器系数的影响(贾s)ml/kg与 NS 组比较,PO.05;与 NiSO4 组比较 ,PO.05:n=8.2.2FJK 对 NiSO 染毒大鼠睾丸 Na.K.ATP 酶和Ca2.ATP 酶活力的影响由表 2 可见,NiSO 组大鼠睾丸 Na
6、.K.ATP 酶,Ca2.ATP 酶均被明显抑制(P0.05).FJK 处理后,与 NiSO 组比较,Na.K.ATP酶仅 FJKl0kg 组活力回升较明显(P0.05),而Ca2.ATP 酶活力均明显恢复(P0.05).3 讨论研究发现,ATP 酶在维持细胞内钙稳态,能量转换以及信息传递方面具有重要的作用.文献报道,NiSO 可抑制心,肝,肾 Na.K.ATP 酶及 Ca2.ATP 酶活力73. 本实验结果表明,腹腔注射 NiSO 后,大鼠睾毒理学杂志 2008 年 4 月第 22 卷第 2 期 JToxicolApril2008Vo1.22No.2表 2FJK 对 NiSO4 染毒大鼠睾丸
7、 ATP 酶活力的影响 (哥s)ml/l【g;与 Ns 组比较,PO.Ol; 与 NiSO4 组比较.PO.05,“P0.0l;n=8.丸中 Na.K.ATP 酶及 Ca2.ATP 酶活力均受到抑制,用 FJK 治疗后 ,2 种酶活力出现不同程度的恢复 ,尤以Ca2 一 ATP 酶活力恢复最显着.FJK 主要由红芪,当归,丹参,枸杞,连翘和莪术等药物组成,具有补气养血,活血化瘀,利湿解毒之功效,对镍致睾丸细胞的损伤具有一定的防治作用.FJK 可逆转 NiSO4 致大鼠睾丸ATP 酶活力的抑制,其原因可能是 FJK 中的一些活性成分具有抗细胞膜脂质过氧化的作用,从而达到保护细胞膜的作用,使 AT
8、P 酶活力逐渐恢复;此外,FJK 通过促进机体对 Ni 的排泄,降低睾丸组织中 Ni 的含量,减弱 Ni 与 Ca2 竞争结合钙调素,从而恢复 Na.K.ATP 酶及 Ca2.ATP 酶的活力.参考文献:l1JDenkhausE,SalnikowK.Nickelessentialitytoxicityandcarcinogenicity.CritRewOneolHematol,2002,42:3556.12JKakelaR,KiikelaA,HyvarinenH.Effectsofnickelchlorideonreproductionoftheratandpossibleantagonist
9、icroleofselenium.CompBiochemPhysiolC,1999,123:2737.3刚葆琪,庄志雄 .我国镍毒理学研究进展.卫生毒理学杂志,2000.14:129.134.4赵健雄,宁守斌 ,朱玉真,等.中药防治硫酸镍致肝肾损伤的实验研究.卫生毒理学杂志,2000,14:240241.5吴红梅,赵健雄 .中药防治硫酸镍致大鼠睾丸组织损伤的实验研究.西北国防医学杂志,2004,25:176.178.6徐斌,徐兆发 ,等.镉对大鼠 Na 一 K 一 ATPase 和 ca2 一ATPase 影响的实验研究 .工业卫生与职业病,2005,31:l77.199.7孙应彪,朱玉真 .
10、硫酸镍对大鼠心肝肾 ATP 酶毒性的实验研究.中国职业医学,2001,28:2728.8朱玉真,赵健雄 ,宁守斌,等.中医药防治硫酸镍的生殖毒性的实验研究.中国职业医学,2000.27:25.26.9孙应彪,陈建华 ,赵健雄,等.中药扶正解毒颗粒对镍致睾丸细胞损伤的拮抗作用研究.毒理学杂志,2007,21:262264.中图分类号:R114 文献标识码:A 文章编号:10023127(2008)02013502啶嘧磺隆的亚慢性毒性研究(收稿日期:200711 一 lO)?实验研究?黄雅丽,顾刘金,杨校华,陈琼姜,朱勇,陈秀凤,徐娟,孙建析,吴立仁,陈日萍,张幸(浙江省医学科学院卫生学研究所,浙
11、江杭州 310013)关键词:啶嘧磺隆;亚慢性毒性;肝脏;肾脏啶嘧磺隆(Flazasulfuron,CAS#104040.78.0),是由日本石原产业化学公司开发的磺酰脲类选择性除草剂.由于其活性成分用量低,杀草谱广,芽前芽后活性高,施用周期长,选择性好,对环境友好,对哺乳动物,鸟类,鱼等低毒等优点,在亚洲,欧洲和美洲的许多国家得到了开发和应用.为探讨啶嘧磺隆的亚慢性经口毒性,进行了本试验.1 材料与方法1.1 受试物啶嘧磺隆原药为白色粉末,由国内某化作者简介:黄雅丽,助理研究员,研究方向:农药毒理.工股份有限公司提供,纯度94%.1.2 动物及饲养条件 46 周龄健康 SD 大鼠 80 只,体重 120g 左右,雌雄各半.由浙江省实验动物中心提供SCXK(浙)2003.0001,SYXK(浙)2005.0074.饲养在清洁的不锈钢笼具内,每笼 2 只.通风 1012 次/h,人工光照(12h 照明,12h 黑暗交替),室温(223)cI=,相对湿度 40%70%.大鼠自由摄食,饮水,并注意观察大鼠的健康状况.1.3 方法按 GB15670.1995(农药登记毒理学试验方法中亚慢性经口毒性试验方法(90d 喂饲法)进行 J.1.3.1 剂量分组:根据啶嘧磺隆原药的急性经口 LD
