1、HIV 初筛实验室生物安全手册天山区疾病预防控制中心2生物安全管理体系文件目录序号 名称 备注1 HIV 实验室人员准入制度2 人员培训考核制度3 人员健康监护制度4 生物安全检查制度5 实验室人员生物安全行为规范6 HIV 初筛实验室废弃物处置和消毒措施7 HIV 初筛实验室环境消毒隔离制度8 艾滋病职业暴露处理程序9 实验室样本、血清安全保管和档案管理制度10 实验室废弃物管理制度11 实验室消毒隔离制度12 高压消毒安全操作13 HIV 初筛实验室试剂管理制度14 艾滋病初筛检测实验操作规程3一、HIV 实验室人员准入制度1.目的规范生物安全二级实验室的使用和管理，保证操作人员，实验对象
2、和环境安全，确保检测结果准确可靠。2.适用范围适用于生物安全二级实验室安全运转及在此环境下的所有检测工作。3.职责进入生物安全二级实验室从事检测工作的所有人员严格按照本规定执行。4.具体要求：4.1 概述4.1.1 生物安全二级实验室用于对检验者和环境有中度潜在危险样品的各项实验，必须符合下列规定：4.1.1.1 具备操作资质的人员可在生物安全二级实验室内工作，其他任何人未经许可禁止进入实验室。4.1.1.2 在实验室内的一切活动，必须遵照生物安全手册的规定进行。4.1.1.3 实验室内产生的污水，必须经过消毒后方可进入公共污水系统。4.1.1.4 实验室的所有废弃品，必须通过高压灭菌后才能处
3、理。必须携出实验室的中间实验材料、更换维修的仪器设备、也只有在确保无病原微生物污染的条件下，才能携出实验室。4.1.1.5 实验室内准备二级全排式生物安全柜，所有可能造成污染的能够置于生物安全柜内的实验操作，置其内进行，以保证实验室内空间的安全。4.1.2 实验室运行的安全性要求本手册规定的各项要求，首先是为了保证实验室的安全运行，包括防止实验室工作人员的感染、防止实验室操作的病原微生物对环境的污染、防止检测样品的污染，保证实验结果的准确可靠。4.1.3 实验室工作的质量要求本手册规定的各项要求，同时也是为了保证实验室的工作质量，即：实验产生的各项结果和数据，必须准确可靠：实验室出具的检验报告
4、，必须明确完整。4.2 实验室操作规程4.2.1 启动实验室4开始工作前半小时。开启实验室主电源，使实验室及生物安全柜投入运行。开启顺序：开启屋顶风机开启全排风开启空调开启安全柜打开房间紫外线灯。4.2.2 个人防护工作人员按照下列要求进行个人防护，才能进入实验室区域：（1）在更衣室中换穿工作服和工作鞋。（2）在清洁区内，根据实验要求做好防护。（3）实验中需使用腐蚀性试剂时，在胶乳手套外加带一次性塑料手套；需要进行可能造成污染材料飞溅的操作时，需加戴防护眼镜。4.2.3 进入实验室4.2.3.1 工作人员进入实验室时，每进入一道门，应将此门关好，再开启下一道门。4.2.3.2 进入实验室后，关
5、闭房间紫外线灯。4.2.3.3 检查实验室运转是否正常。4.2.3.4 做好开始实验的各项准备。4.2.4 启用标本、试剂一切准备工作就绪后，才将标本和试剂从冰箱中取出，直接放入生物安全柜中。用完立即归位，使其在冰箱外停留的时间尽可能短。4.2.5 操作4.2.5.1 严格按照试剂使用说明进行操作。洗涤时避免液体材料飞溅。吸取、稀释液体时，将吸管插入试管底部，用吸球缓慢吸取，避免产生汽泡或汽溶胶。4.2.5.2 离心时，应使用双盖封闭式离心机和全封闭试管，每管离心液总量低于最高容量1 个刻度单位：平衡时不得有液体渗陋到管套中，离心机使用后立即用消毒液擦洗消毒。4.2.6 观察结果不打开容器的观
6、察允许在生物安全柜外进行，否则，必须在生物安全柜内观察结果。4.2.7 准予携出实验室的材料确保不含感染性的实验材料，才可以从实验室携出。容器表面应用 75%乙醇消毒。4.2.8 实验室清洁每一实验步骤完成后，均应清理台面。所有用过的试剂均应归还原位；使过的吸管等长形器材放入储存污物的盒内；实验室禁止使用锋利品；纸巾软物品放入污物袋；在台面上喷洒 75%乙醇，保持 20 分钟，然后以纸巾擦干。实验室的其他表面，也应经常用 75%乙醇擦5拭。4.2.9 污染物品处理放置污染物品的容器装满时，应更换新的容器。实验结束后，对用过的污染物品进行高压消毒。4.2.10 更换工作服。工作完毕的更衣顺序是，
7、先用消毒液浸泡手套 5 分钟，然后依次除去口罩、防护服、鞋套，放入高压消毒袋内，再次浸泡手套后除去手套，用 75%酒精棉球擦面部裸露部位。4.2.11 实验室消毒每次工作完毕，生物安全柜内用 75%酒精或 0.1%次氯酸钠溶液擦拭台面、地面，开启紫外线灯照射 1 小时后，逐一关闭实验室送风和通风设备关闭顺序与开启顺序相反。4.3 实验记录与实验报告4.3.1 实验记录实验记录内容应简明扼要，包括实验日期，实验目的和实验的基本条件等提示记忆的内容，并较详细地记载观察到的实际现象及数据结果。要求字迹应清晰，数字成行成列，以避免录入错误。4.3.2 实验记录录入计算机实验记录必须在实验结束后 24
8、小时内录入计算机。记录准确的实验报告和录入时间。再按照由实验室带出的书写记录，准确地记载实验结果和数据。录入后，书写记录保存 1 周，以备查验。实验记录录入后，一般不得修改。因数据记录错误，录入错误，或实际观察到的实验结果改变，必须更改记录时，不要删除已经录入的描述和数据，而应录入新的描写和数据，并注明更改原因。4.3.4 实验室记录备份每月一次，将上月计算机的实验记录做出备份，备份的实验记录不得修改。实验室负责人应定期检查实验记录，核对备份与原始的实验记录，对记录中的缺陷提出修改意见。4.3.5 实验记录的保存年限HIV 实验记录最少保存十年，如无特殊原因，实验记录一般永久保存。4.3.6
9、出具实验报告在需要出具正式实验报告的场合，报告由实验者填写署名，交实验室负责人记录核对后签字，再由单位签发人签字并加盖公章发出。4.4 标本保管规则64.4.1 标本进入实验室4.4.1.1 实验室采集的标本，本实验室统一登记编号，能反映出标本的来源、种类、性质、目的等相关信息。4.4.1.2 有关单位送检的标本由实验室统一登记编号，注明送检单位、送检时间、种类、性质、实验目的等相关信息。做好交接登记。4.4.2 标本的保管根据标本的性质、目的进行保存。4.4.3 标本的销毁确定不用的标本，采用高压灭菌后焚烧的方式销毁。4.5 实验室装备保养4.5.1 实验室定期保养实验室的定期保养按照提供实
10、验室设备厂商的规定进行，主要是对机械和电器部分进行维护。4.5.2 实验室仪器设备的保养和维护实验室内的仪器设备的保养由实验室工作人员进行。维护有专业人员进行。生物安全柜的滤器必须按说明书规定的时间定期由专业人员更换，其它仪器设备也应根据实际需要清洁保养。4.5.3 实验室仪器设备的维修更换仪器设备需要更新，需要离开实验室进行维修，或损坏需要更换，以及必须临时进入实验室使用，使用完毕后必须撤出实验室的贵重仪器，在撤出实验室之前必须以恰当的方式严格消毒，方可处理或重新投入使用。4.6 意外情况处理4.6.1 实验室意外事件的处理原则4.6.1.1 造成或可能造成实验室污染，但未造成人身伤害的实验
11、室报告，由实验室负责人处理。例如实验过程中。由于标本、试剂益处溅落造成操作台或地面的污染等，应立即喷洒消毒液并覆盖浸透消毒液的纸巾，待消毒液彻底浸泡 30 分钟后，对污染的物品进行清理。清理后的物品高压灭菌。并填写生物安全 2 级实验室意外情况登记与处理记录表，实验室负责人应指导这些处理活动，并检查处理效果。4.6.1.2 实验室事故可能造成气溶胶污染，如压力容器或管道破裂、离心机事故等，应立即关闭实验室，张贴禁止入内的标识。用消毒液喷雾和紫外线照射污染的区域，24 小时再进行终末消毒，实验室负责人除立即采取对应措施外，应向上级部门报告，并填写意外情7况登记与处理记录表。4.6.1.3 实验室
12、工作人员在实验室内受到意外伤害，如割伤、烧伤、烫伤等，在实验室内昏倒或发生身体严重不适，也有实验室负责人处理。令受到伤害的人员立即停止工作，用消毒液清洗未破损的平凡表面，伤口以碘伏消毒，眼睛用无菌生理盐水冲洗。由在同一实验室内人员或派人迅速着装进入实验室，清除造成伤害的原因，清理实验材料，帮助受伤人员紧急处理并撤离实验室。受到伤害的人员应进行治疗并休息，在身体状况未恢复之前，不得重新进入实验室工作。实验室在经过整理，消除了造成伤害的故障之后，方可重新使用。4.6.1.4 伤害事故可能导致被强毒微生物感染，例如针头刺破、锐器割伤、黏膜暴露等途径接触到感染性液体，或在操作过程中发生培养物、污染材料
13、溅落身体表面，意外接种等情况，首先进行局部处理，用肥皂和水清洗污染的皮肤，挤压伤口尽可能挤出损伤处的血液，用肥皂和清水冲洗，用消毒液浸泡或涂抹消毒，并包扎伤口。暴露的黏膜应尽快用生理盐水或清水冲洗干净。实验室负责人应向上级部门报告，对受伤害者进行隔离观察，同时根据情况预防性用药，并写出职业暴露后预防感染的评价和处理方案。8二、人员培训考核制度1.目的规范实验室相关人员的培训考核2.适用范围适用于生物安全涉及的所有工作人员3、人员培训考核制度3.1.实验室工作人员的培训3.1.1、实验室应进行全员安全培训并强化“普遍性防护原则”安全意识，所有的血液、未固定的组织和组织液样品，均应视为有潜在的传染
14、性，都应以安全的方式进行操作。所有管理和检测人员都应接受省级以上艾滋病检测实验室主持的安全培训，包括上岗前培训和复训，取得 HIV 检测上岗证并接受管理人员的监督。3.1.2、必须对新上岗人员进行安全教育和培训，使他们清楚实验室工作的潜在危险，通过考核等方式确认他们具备安全操作的能力后方可单独工作。3.1.3、对新调入人员、外来合作、进修和学习的人员必须进行生物安全培训，经实验室主任批准后，方可进入实验室。3.1.4 实验室人员每年要接受自治区级、市级有关生物安全培训。9三、人员健康监护制度1.目的规范实验室相关人员的健康监护2.适用范围适用于生物安全涉及的所有工作人员3、人员健康监护制度3.
15、1、艾滋病实验室工作人员上岗前必须进行 HIV 抗体和乙型肝炎病毒、丙型肝炎病毒等肝炎病毒标志物检测，应接种乙肝疫苗。应每年对工作人员采血检测 HIV 抗体，血清应长期保留。3.2 实验室工作人员的适合工作状态实验室工作人员必须在身体状况良好的情况下，才能进入实验室工作。出现下列情况，不应进入实验室：身体出现开放性损伤；患发热性疾病：感冒、上呼吸道感染；其他导致抵抗力下降的状况：妊娠、在实验室内连续工作 4 小时以上或其他原因造成的疲劳状态。3.3、遇有手部皮肤有开放性伤口及其他不适于工作的情况，应暂停工作。10四、生物安全检查制度1.目的规范实验室生物安全，保证设备正常运行。2.适用范围适用
16、于生物安全涉及的仪器设备（比如生物安全柜等）3、生物安全检查制度3.1 实验室负责人有责任确保安全检查的执行，每年对工作场所至少检查一次。3.2 实验室主管领导对生物安全工作不定期地进行监督抽查。3.3 保证应急装备、警报体系和撤离程序功能及状态正常。3.4 用于危险物质泄露控制的程序和物品状态。3.5 对全血以及血清标本存放进行适当的防护和控制。3.6 污染和废物处理程序严格按照作业指导书进行。3.7 实验室设施、设备和人员的状态。3.8 每年定期接受自治区、市级病原微生物实验室生物安全管理工作的督查。3.9 定期接受对病原微生物实验室生物安全管理自查工作。11生物安全自查记录一、生物安全实
17、验室的设施和设备清洁区、半污染区、污染区分区是否明确 是否使用负压通风过滤技术 是否有使用生物安全柜的记录本 是否有高压灭菌器和紫外线消毒记录 二、生物安全实验室的检测验证负压值是否 10Pa 温度、湿度、噪声和照明是否合格 三、生物安全实验室个人防护装备是否有足够的防护用品（帽子、口罩、隔离衣、护目镜、手套、鞋套） 是否有防护操作程序 四、生物安全实验室操作技术规范是否有实验室安全管理制度 工作人员是否做到安全防护 实验人员是否安全操作 仪器设备的使用是否规范 样本操作是否规范 是否使用个人防护用品 五、病原微生物菌（毒）种和样本的管理血液样本的采集是否规范 血液样本的保存与转送是否符合要求
18、 检查人员： 年 月 日是 否 是 否 是 否 是 否 是 否 是 否 是 否 是 否 是 否 是 否 是 否 是 否 是 否 是 否 是 否 是 否 12五、实验室人员生物安全行为规范1.目的规范实验室人员的生物安全行为规范2.适用范围适用于生物安全涉及的所有工作人员3、个人防护3.1 皮肤的伤口和擦伤都要以防水敷料覆盖。3.2 进实验室前要摘除首饰，修剪长的带刺的指甲，以免刺破手。3.3 进入实验室要穿隔离衣，带手套。如果接触物传染危险性大，则应戴双层手套和防护眼镜。3.4 离开实验室前必须脱去隔离衣并洗手。3.5 严禁在艾滋病检测实验室内进食、饮水、吸烟和化妆。4、带入和带出实验室的物品
19、4.1 对所有带入实验室的物品都要进行检查。含有测试样品的包裹应在安全柜或其他适当的装置内打开。4.2 将 HIV 测试样品转送其他实验室时，应防止对人员和环境的污染。护送样品的人应明确接受地点和接受人，实验室负责人或其指定的人员应及时确认样品以送达指定的实验室，被转入安全位置并得到妥善处理。4.3 污染或可能造成污染的材料在带出实验室前应进行消毒。包装和标记，并提交相应的资料。5、减少利器的使用5.1 尽量避免在实验室使用针头、刀片等利器。如果必须使用，在处理或清洗时应采取措施防止刺伤或划伤，并应对用过的物品进行消毒处理。5.2 最好不使用玻璃制品。5.3 尽量使用安全针具采血，如碟形真空针
20、，自毁性针具等，以降低直接接触血液和刺伤的危险性。应将用过的针头直接放入坚固的容器内，消毒后废弃。13六、HIV 初筛实验室废弃物处置和消毒措施1、 废 弃 物 处 置废 弃 物 处 置 应 符 合 实 验 室 生 物 安 全 通 用 要 求 （ GB 19489-2004） 和 消 毒 技术 规 范 （ 2002 年 版 ） 。从 艾 滋 病 实 验 室 出 来 的 所 有 废 弃 物 ， 包 括 不 再 需 要 的 样 品 、 培 养 物 和 其 它 物 品 ， 均应 视 为 感 染 性 废 弃 物 ， 应 置 于 专 用 的 密 封 防 漏 容 器 中 ， 安 全 运 至 消 毒 室 ，
21、 并 在 高 压消 毒 后 再 进 行 处 理 或 废 弃 。2、 HIV 常 用 的 物 理 消 毒 方 法压 力 蒸 汽 消 毒 ， 121 ， 保 持 15 20min; 干 燥 空 气 烘 箱 消 毒 （ 干 烤 消 毒 ） ， 140 ， 保 持 2 3h。3、 HIV 常 用 的 化 学 消 毒 方 法HIV 最 常 用 的 化 学 消 毒 剂 是 含 氯 消 毒 剂 （ 次 氯 酸 钠 ， 含 有 效 氯2000 5000mg/L） 、 75%乙 醇 和 2%戊 二 醛 ， 保 持 10 30 min。4、 废 弃 物 缸 ： 5000mg/L 次 氯 酸 钠 。5、 生 物 安
22、 全 柜 工 作 台 面 和 仪 器 表 面 ： 75%乙 醇 。6、 溢 出 物 ： 5000mg/L 次 氯 酸 钠 。7、 污 染 的 台 面 和 器 具 ： 2000mg/L 次 氯 酸 钠 ,也 可 以 用 过 氧 化 氢 或 过 氧 乙 酸 。 器 械可 用 2%戊 二 醛 浸 泡 消 毒 。 8、 实 验 台 消 毒8.1、 实 验 台 消 毒 措 施 必 须 符 合 艾 滋 病 实 验 室 的 通 用 生 物 安 全 要 求 。 由 专 人 按 特 定 程序 和 方 法 进 行 清 洁 和 消 毒 。8.2、 台 面 的 清 洁 消 毒 ， 保 持 清 洁 、 湿 式 打 扫
23、。 每 天 开 始 工 作 前 用 湿 布 抹 擦 1 次 ，地 面 用 湿 拖 把 擦 1 次 ， 禁 用 干 抹 干 扫 。 抹 布 和 拖 把 等 清 洁 用 具 实 验 室 专 用 ， 不 得 混用 ， 用 后 洗 净 晾 干 ， 下 班 前 用 含 氯 消 毒 剂 （ 次 氯 酸 钠 ， 含 有 效 氯 2000mg/L） 、0.2 0.5%过 氧 乙 酸 或 75%乙 醇 抹 擦 1 次 。 也 可 用 便 捷 式 高 强 度 紫 外 线 消 毒 器 近 距离 照 射 消 毒 。8.3、 操 作 未 知 传 染 风 险 样 品 一 样 进 行 消 毒 与 灭 菌 ， 小 心 存 放
24、 、 拿 取 和 使 用 所 有 可 能有 传 染 性 的 血 液 、 质 量 控 制 和 参 考 物 质 ， 若 被 上 述 物 品 明 显 污 染 ， 如 具 传 染 性 的 标本 或 培 养 物 外 溢 ， 溅 泼 或 器 皿 打 破 ， 洒 落 于 台 面 ， 应 立 即 用 消 毒 液 消 毒 ， 用5000mg/L 有 效 氯 消 毒 剂 、 过 氧 乙 酸 或 乙 醇 洒 于 污 染 的 台 面 ， 并 使 消 毒 液 浸 过 污 染 表面 ， 保 持 30 60 min 后 再 擦 拖 把 用 后 浸 于 上 述 消 毒 液 内 1h 以 上 。8.44、 各 类 在 实 验
25、室 实 验 台 上 操 作 后 的 废 弃 物 品 均 应 视 作 物 染 物 分 类 处 理 ， 所 有 废弃 物 应 视 为 HIV 污 染 物 品 ， 按 照 传 染 病 防 治 法 处 理 。9、 消 毒 液 的 配 制 及 使 用9.1、 HIV 实 验 室 最 常 用 的 化 学 消 毒 剂 是 含 氯 消 毒 剂 （ 次 氯 酸 钠 ， 含 有 效 氯142000-5000mg/L） 、 75%乙 醇 和 2%戊 二 醛 ， 保 持 10 30 min。9.2、 含 氯 消 毒 剂 的 配 制 ： 次 氯 酸 钠 原 液 使 用 前 进 行 1： 20 1： 50 稀 释 （ 2
26、000-5000mg/L） 或 联 昌 84 使 用 前 进 行 1： 10 1： 25（ 2000-5000mg/L） 稀 释 后 ， 用于 实 验 室 内 的 消 毒 。9.3、 乙 醇 ， 俗 称 “酒 精 ”， 能 够 杀 灭 多 种 细 菌 ， 对 HIV 病 毒 有 一 定 的 杀 灭 作 用 ，70 75%的 效 果 最 好 。 因 此 ， 使 用 前 新 鲜 配 置 足 量 70 75%的 乙 醇 ， 用 于 生 物 安全 柜 、 工 作 台 面 和 仪 器 表 面 的 消 毒 ， 可 以 达 到 最 佳 的 消 毒 效 果 。9.4、 过 氧 乙 酸 也 是 目 前 使 用
27、比 较 广 泛 的 一 种 高 效 消 毒 剂 ， 新 鲜 配 置 1 3%的 过氧 乙 酸 熏 蒸 ， 用 于 地 面 、 墙 壁 、 实 验 器 材 及 实 验 室 内 资 料 、 文 件 、 书 本 等 物 品 的 消毒 。 0.04%的 过 氧 乙 酸 用 于 实 验 室 工 作 人 员 手 浸 泡 1 20 分 钟 ， 再 用 肥 皂 洗 手 。9.5、 2%戊 二 醛 用 于 可 浸 泡 物 品 的 消 毒 ， 医 疗 器 械 等 。9.6、 HIV 实 验 室 常 用 化 学 消 毒 剂 的 配 置 ， 本 着 多 用 多 配 ， 少 用 少 配 ， 现 用 现 配 的 原则 ，
28、 保 证 消 毒 剂 使 用 时 的 浓 度 ， 保 证 消 毒 效 果 。15七、HIV 初筛实验室环境消毒隔离制度1、 实 验 室 应 分 为 清 洁 区 和 操 作 区 ， 清 洁 区 要 注 意 保 护 不 受 污 染 。 操 作 有 气 溶 胶可 能 的 标 本 应 配 置 生 物 安 全 柜 及 其 它 防 护 设 置 ， 如 紫 外 线 灯 ， 排 气 扇 等 操 作 区 的 工作 台 及 地 面 每 日 用 消 毒 液 擦 拭 一 次 ， 有 污 染 时 随 时 消 毒 ， 每 周 大 扫 除 一 次 。2、 采 血 室 每 日 操 作 前 用 清 水 擦 拭 操 作 台 一
29、次 ， 采 血 结 束 用 消 毒 液 擦 拭 操 作 台 、 桌 子和 地 面 一 次 ， 紫 外 线 每 日 照 射 消 毒 一 次 。3、 各 种 检 验 标 本 的 收 集 ， 送 检 必 须 用 相 应 指 定 的 容 器 留 取 ， 不 得 外 溢 污 染 。4、 静 脉 及 末 稍 采 血 ， 应 严 格 执 行 消 毒 隔 离 措 施 ， 静 脉 抽 血 做 到 一 人 一 针 一 筒 一 巾 一带 一 消 毒 ， 所 用 止 血 带 及 纸 垫 每 日 消 毒 ， 末 稍 采 血 一 人 一 片 一 管 ， 杜 绝 交 叉 污 染 。5、 一 次 性 医 用 器 具 包 括
30、采 血 针 ， 注 射 器 、 尿 杯 、 血 红 蛋 白 微 量 吸 血 吸 管 ， 应 严 格 做好 领 发 登 记 ， 注 射 器 先 浸 泡 消 毒 后 由 供 应 室 一 对 一 调 换 ， 统 一 处 理 ， 其 余 一 次 性 器具 浸 泡 消 毒 后 装 入 污 物 袋 送 焚 烧 炉 焚 烧 。6、 检 验 人 员 在 进 行 静 脉 抽 血 时 应 严 格 遵 守 无 菌 操 作 技 术 ， 操 作 前 必 须 洗 手 必 须 戴 好帽 子 与 口 罩 ， 操 作 台 和 手 被 污 染 时 应 用 肥 皂 和 流 水 认 真 洗 手 ， 必 要 时 用 消 毒 液 浸 泡
31、双 手 ， 酒 精 、 碘 酒 瓶 每 周 更 换 消 毒 两 次 。7、 溢 出 试 管 外 的 血 液 ， 应 立 即 用 碘 酒 棉 签 擦 拭 干 净 ， 注 意 防 止 玻 璃 碎 片 刺 伤 手 ， 并注 意 试 管 有 无 破 裂 。8、 当 针 头 和 碎 玻 璃 刺 伤 手 时 ,用 流 水 冲 洗 ,挤 出 血 水 ,应 立 即 用 碘 酒 消 毒 局 部 。9、 实 验 室 操 作 时 应 戴 上 手 套 。 吸 取 标 本 ， 离 心 振 荡 等 应 严 格 按 操 作 规 程 ， 防 止自 身 和 实 验 室 受 污 染 。10、 已 检 查 标 本 与 容 器 分
32、别 浸 泡 于 次 氯 酸 钠 (2000mg/L)中 两 小 时 后 ， 标 本 倾 弃 ，一 次 性 容 器 送 焚 烧 ， 重 复 使 用 的 经 清 洗 消 毒 和 灭 菌 后 再 使 用 ， 均 要 有 记 录 。 有 毒 化学 试 剂 和 放 射 性 试 剂 使 用 后 要 经 无 害 化 处 理 ， 防 止 污 染 环 境 。11、 非 科 室 工 作 人 员 不 准 进 入 实 验 室 ， 外 来 人 员 参 观 需 经 科 主 任 同 意 方 可 进 入 。16暴 露 的 类 型粘膜或可能有损伤的皮肤 只沾染完整的皮肤刺、割伤皮肤暴露量 不需PEP 危险度量小暴露时间短量大暴
33、露时间低危 如：表皮擦伤、针刺等高危 如：伤口较深、仪器上可见血液等其它潜在传染性物质 血液或含血液体 不需预防性治疗是 否暴露物是否是传染性物质，如血液、含血体液、其它传染性物质或被其污染的器械1 级暴露 2 级暴露 2 级暴露 3 级暴露八、艾滋病职业暴露处理程序职业暴露的处理方法艾滋病职业暴露是指医护人员从事医疗、护理等工作中意外被 HIV感染者或艾滋病病人的血液、体液污染了皮肤或者粘膜，或者被含有 HIV 的血液、体液污染了的针头及其他锐器刺破皮肤，有可能被 HIV 感染的情况。1、急救处理（1）刺激出血：职业暴露的紧急处理，只要情况允许，应实行急救。如皮肤有伤口，应当反复轻轻挤压，尽
34、可能挤出损伤处的血液。（2）肥皂和清水冲洗伤口或沾污的皮肤。眼睛、口、鼻溅入 HIV 阳性标本，立即用大量自来水或生理盐水冲洗，应避免摩擦眼睛，连续冲洗至少 10 分钟。17（3）受伤部位的消毒与包扎：伤口应用消毒液（如 75%酒精、2000mg/L 次氯酸钠、0.2%0.5%过氧乙酸、0.5%碘伏等）浸泡或涂抹消毒，并包扎伤口。（4）由于暴露后有无采取急救措施对职业暴露后 HIV 感染有一定影响，故应尽量为受伤者寻找医疗机构，以求正确护理伤口和暴露后急救处理。（5）可介绍已发生职业暴露的人员到艾滋病防治机构进一步咨询和处理。2、暴露级别的评估，分为 1、2、3 级。暴露源的HIV情况HIV阴
35、性 HIV 阳性 暴露源不明无需PEP暴露源的 HIV 滴度低（无症状、CD 4计数高）暴露源的HIV滴度高（有症状、CD 4计数低）HIV暴露源级别1（轻度）HIV暴露源级别2（重度）HIV暴露源级别不明3. 确定 HIV 暴露源头严重程度，分为轻度、重度和不明。4.扎伤、刺伤的伤口经处理后，立即与新疆维吾尔自治区卫生防疫站艾滋病预防与控制中心确认实验室联系，在 24 小时内（越早越好）赶到艾控中心，在专家的指导下，根据暴露情况进行预防性治疗。同时作好下列事项：（1）采集初筛阳性者及被扎医务人员的血液各3ml，尽快送到艾控中心确认实验室进行检测和确认。 （2）写明事故发生的详细报告：包括发生
36、时间、地点、经过、暴露方式、损伤的具体部位、程度、接触物的种类（血液或其他液体） 、伤口的处理方法及经过。该报告一式两份，单位盖章后，一份送艾控中心确认实验室，一份由原单位保留。（3）与自治区疾控中心有关专家联系根据情况共同进行风险的评估，确定用药的必要性、确定预防药物和用药程序，并将处理情况向主管行政部门报告。 （4）监测暴露源：如果暴露源没有阳性或阴性的血清学化验结果应立即检测，最好做快速试验，因其结果可在几十分钟内得到。如果暴露源有急性 HIV 综合征的症状，应同时检测病毒载量。 （5）监测职业暴露者：由自治区疾控中心 HIV 确认中心抽血检测职业暴露者的 HIV-1/2 抗体（包括做快
37、速试验） ，该血清留样备用。如果职业暴露者以前已有 HIV 抗体的化验结果，则应加以记录。18暴露后 1 年内要定期监测 HIV 抗体，即分别在暴露后 4 周、8 周、12 周、6 个月监测。结果填写在报来的“艾滋病职业暴露人员个案登记表”内。6. 保密和报告保密：无论职业暴露、重大事故或小型事故，对涉及的职业暴露者，均应注意做好保密工作。每一个得到信息的机构或个人均应做好保密工作。19九、实验室样本、血清安全保管和档案管理制度1.目的规范实验室标本和生物样本的保管和档案管理2.适用范围实验室标本和生物样本的处理和档案管理3、实验室标本和生物样本的保管3.1 按规定可以保存的阴性标本血清，由指
38、定的专人负责登记、保存和管理。必须在生物安全柜内进行，并做好有关记录。需要销毁的标本按照实验室废弃物管理制度销毁。3.2 本室检出的 HIV 初筛阳性标本应及时上送，因工作需要暂时保存的标本要双人双锁管理3.3 未经上级批准，任何单位及个人不得以工作之便，进行国际间各类菌（毒）种交流，做好菌（毒）种安全防范工作。4、档案管理制度4.1、非实验室人员不得随意查看实验室记录4.2、实验室人员负责妥善保存各种样品登记本、报告单及实验室原始记录，不得擅自修改和销毁4.3、专人负责保管感染者档案4.4、未经领导批准不得向无关人员或单位提供任何实验室及感染者信息4.5、HIV 抗体初筛实验室检测的阳性结果
39、不是最终结果，须进一步确认，确认前不得出具阳性报告及告知受检者本人或有关单位20十、 实验室废弃物管理制度1.目的规范废弃物处理2.适用范围尖锐器具和其他废弃物的处理。3.具体方法：3.1 尖锐器具的处理3.1.1 尖锐器具，如针、注射器等，除特殊情况外，禁止在实验室使用，尽可能用塑料器材代替玻璃器材。3.1.2 注射和吸取感染性材料时，尽可能使用一次性注射器。用过的针头禁止折段、剪段、折段、重新盖帽或从注射器上取下，禁止用手直接操作。用过的针头、注射器直接放入防刺破的盛废弃锐器的容器中。非一次性锐器必须放置在坚壁容器中，进行高压消毒处理。3.1.3 尽可能使用带针头套的的注射器、无针头的系统
40、和其他安全装置。3.1.4 打碎的玻璃器具，禁止用手直接清理，必须使用其他工具，如扫把、簸箕、夹子或镊子等。盛污染针、锐器及碎玻璃的容器在丢弃前必须彻底消毒。3.2 废弃物的处理3.2.1 实验后的废弃物如不及时处置则会污染环境，从而对人造成危害，因此有关人员必须严格按照规定执行。3.2.2 实验样本在处理和进行实验室检测时产生的废弃物，如一次性针头、离心管、平皿等应放入适当的容器和严格防漏的高压袋内，待实验结束后立即就地高压消毒。3.2.3 实验过程中产生的污染性液体物质、废弃的液体标本等放在盛有消毒液的严格防渗漏的专用容器中，并及时加盖。3.2.4 进行实验所必须使用的容器，如针头、一次性
41、注射器、玻璃器具、手术刀片等，放入专用的坚壁容器内，加盖密封。3.2.5 以上所有盛装废弃物的容器，在每次实验结束后，就地高压消毒。3.2.6 高压锅应有专人负责，严格按使用说明操作，确保在 121 条件下，高压 30 分钟，以达到消毒要求。213.2.7 所有实验产生的废弃物，必须经严格高压消毒后方能运出实验区，并送至指定地点集中焚烧处理。十一、实验室消毒隔离制度1.目的规范微生物实验室和生物安全二级实验室的消毒隔离工作。2.适用范围微生物实验室和生物安全二级实验室。3.职责所有工作人员都必须遵从本规程。4.具体步骤4.1 实验室基本要求4.1.1 实验室相对独立，实验室核心区包括实验间及缓
42、冲间，明确划分清洁区、半污染区和污染区，并有明显标识。4.1.2 各区域交叉处应设置有效氯 2000 的含氯消毒剂溶液浸湿的脚垫。4.1.3 实验室内所有物品应专用，须带出时必须严格消毒。4.1.4 实验人员进入实验室应穿戴好个人防护用品，如隔离衣、防护眼睛、口罩、一次性手套等。实验过程中注意自身防护，并防止操纵过程中的交叉污染。4.1.5 培养基、组织、体液等必须放在防漏密闭的容器中储运。4.1.6 血清学试验、样品的处理和分装应在 BSL-2 安全柜内进行。4.1.7 样品离心使用密封的离心杯，以防溅出。4.1.8 实验过程中使用的器材、实验废弃物均应按废弃物处理程序进行消毒处理。4.1.
43、9 当传染性标本溢出或溅出后，应有专业人员立即消毒和清理。4.1.10 实验完毕，先消毒物体表面，再按规定程序脱下个人防护用品放入包装袋内就地高压消毒，并进行空气消毒。4.1.11 离开实验室前，必须按有关规定消毒双手。4.2 消毒方法4.2.1 仪器等表面消毒：工作结束后，用含有效氯 1000 的消毒液或 75%乙醇溶液擦拭消毒，22作用 20 分钟以上。4.2.2 实验器材的分类消毒：将使用后的锐器方入防刺破、防渗漏的密闭专用锐器处置盒内，121高压消毒 30 分钟。其他器材方入有效氯为 2000mg/L 的含氯消毒液内浸泡 1 小时以上。处理时应避免皮肤损伤。4.2.3 工作台等物体表面
44、消毒：工作完毕，用含有效氯 2000mg/L 的消毒液或 75乙醇溶液擦拭消毒，作用 20 分钟以上。4.2.4 个人防护用品消毒：实验结束，将隔离衣、口罩、帽子、手套、鞋套等 121高压消毒 30 分钟。防护镜浸泡在 75乙醇或有效氯为 1000mg/L 的含氯消毒剂中，作用 30-60 分钟。4.2.5 手的消毒：用典伏或 75的乙醇擦拭，作用 1-3 分钟。4.2.6 空气消毒：每次实验前后用紫外灯照射消毒，每次不少于 1 小时，每立方米空间安装紫外灯瓦数1.5W，距紫外灯 1 米处照射强度70W/。4.2.7 这张消毒：应用 80ml/m3 福尔马林，密闭熏蒸消毒 6 小时后方可带出。
45、4.2.8 地面消毒：工作结束，应用含有有效 2000mg/L 的消毒液喷洒拖地。4.2.9 废弃物的处理：实验的废弃物应放入适当的容器内，就地 121高压消毒 30 分钟，消毒后的废弃物集中收集、焚烧处理。23十二.实验室高压消毒安全操作5.1 使用前应了解并掌握高压锅的原理及操作规则，以及不正确使用而导致的灾难性后果。5.2 按照操作规程使用高压锅5.2.1 接通电源，合上高压灭菌器左侧总电源开关。5.2.2 注入加热用水，注水至加热器罩的水位水准器配件尖端浸入水中为止。5.2.3 设定灭菌温度，先按“编集”键，然后按上下键调节到灭菌所需温度，然后按“实行”键，把所设温度存进程序。5.2.
46、4 设定灭菌时间，先按“编集”键，然后按上下键调节到灭菌所需时间，然后按“实行”键，把所设时间存进程序。5.2.5 按“实行”键执行灭菌程序，此时“灭菌”灯闪烁。5.2.6 当灭菌程序执行完成，灭菌程序自动停止运行。5.2.7 在确认压力表的显示压力降到 0 刻度时，打开高压灭菌器顶盖，取出灭菌样品。5.3 高压锅操作人员在使用高压锅时不得离开岗位；在日常使用过程中，必须严格按照操作规程执行，并按照规定进行设备的维护。每 1 年保养一次，每月检测一次消毒效果。5.4 高压锅的物品不得放的过满，否则影响灭菌效果。放好被消毒灭菌的物品后，高压锅的盖子或门必须拧紧。5.5 定期检查高压锅，以确保其正
47、常工作，防止意外事故发生，保证消毒灭局效果。5.6 高压灭菌安全操作步骤5.6.1 在灭菌前将双层的高压灭菌带包好，废物在灭菌袋中的体积不能超过袋子体积的3/4，灭菌袋用橡皮带捆好，但不能扎得太死，否则蒸汽不能进入所料袋内影响灭菌效果。5.6.2 实验产生的所有废物应该及时就地灭菌处理。如果灭菌器正在使用或优于其它原因不能马上使用，则废物必须放在灭菌袋内捆好并放在实验室内，在存放期间确保袋子无损坏。5.6.3 当高压锅消毒灭菌盗时间后，取出物品放在废物收集处。5.6.4 当开始灭菌时必须确信灭菌国内水量合适，高压温度和时间设置正确。灭菌应保持在 12130 分钟，时间和温度不得超过设定值，否则
48、灭菌袋会融化，清理困难。24十三、HIV 初筛实验室试剂管理制度（ 一 ） 、 采 购 与 审 批实 验 室 负 责 人 根 据 需 要 定 期 拟 定 采 购 计 划 ， 交 由 中 心 主 任 审 批 ， 批 核 后 由 单 位 办 公室 统 一 招 标 采 购（ 二 ） 、 验 收 与 登 记仓 管 负 责 人 根 据 供 应 商 提 供 的 试 剂 及 清 单 对 数 量 、 品 种 、 品 牌 、 包 装 等 进 行 验 收 ，并 将 入 库 数 据 登 记 。（ 三 ） 、 贮 存冷 藏 试 剂 统 一 存 放 在 HIV 实 验 室 专 用 的 冰 箱 内 ， 冷 箱 保 管 及
49、 温 度 控 制 由 仓 管 负 责人 负 责 。 HIV 试 剂 一 般 应 2 8 避 光 保 存 ， 在 有 效 期 内 使 用 。（ 四 ） 、 出 库 管 理各 室 提 出 试 剂 申 领 ， 仓 管 人 填 写 出 库 单 据 ， 认 领 人 签 名 后 出 库 。（ 五 ） 、 其 它1、 试 剂 的 保 存 应 严 格 按 照 要 求 存 放 ， 以 保 证 有 效 期 内 能 有 效 地 使 用 ， 杜 绝 浪 费 现 象 。2、 仓 管 人 应 对 试 剂 库 存 定 期 检 查 ， 不 使 用 过 期 变 质 的 试 剂 。3、 易 燃 ， 易 爆 试 剂 应 分 开 存 放 远 离 火 源 和 电 源 。 4、 剧 毒 试
