1、归脾颗粒剂对肝灌流液中酶 AST、ALT 的影响2004 年 11 月第 26 卷第 11 期中成药ChineseTraditionalPatentMedicineNovember2004V01.26No.11归脾颗粒剂对肝灌流液中酶 AST,ALT 的影响王绪平一,郑筱祥(1.浙江大学生物医学工程学系,浙江杭州 310027;2.浙江省中医药研究院,浙江杭州 310007)关键词:归脾颗粒剂;离体肝灌流;酶;大鼠摘要:目的:评价归脾颗粒剂及含药血清对大鼠肝脏的影响.方法:采用离体肝灌流模型.结果:归脾颗粒剂 2.5,5.0g?LI1 对肝灌流液中酶 AST,ALT 无影响,与空白组比较无差异
2、 ;大鼠灌胃不同剂量归脾颗粒剂 7d 后血清对大鼠肝灌流液中酶无影响,与空白组比较无差异.结论:归脾颗粒剂及其含药血清对酶 AST,ALT无影响,提示归脾颗粒剂对肝脏无毒性.中图分类号:R285.5 文献标识码:A 文章编号:10011528(2004)11-091603InfluenceofGuipiGranuleonenzymeAST,ALTinliverperfusionWANGXuping 一.ZHENGXiao-xiang(I.DeptofbiomedicalEngineering,ZhejiangUniversity,Hangzhou310027,China;2ZhejiangAc
3、ademyofTCM,Hangzhou310007,Chi 一,m)KEYWORDS:GuipiGranule;isolatedratliverperfusion;enzyme;ratABSTRACT:AIM:ToanalysetheeffectofGuipiGranuleandserumthatcontainsdrugonratSliver.METH-oDS:IsolatedratSliverperfusionmodelwasusedintheexperimentfordeterminingASTandALTcontent.RESULTS:Middleandlowconcentrationo
4、fGuipiGranule(2.5,5.0g/L)didntcauseanychangofenzymeAST,ArcontentinisolatedratSliverperfusionliquid.TheeffectofserumwasnotdifferentfromGuipiGranulegroupsandcontrolgroups.CONCLUSION:TheresultshowsthatGuipiGranuledoesntcausedamagetothe1jvercel】.归脾颗粒剂由党参,炒白术,黄芪等中药组方,具有益气补脾,养血安神之功效.通过测定肝灌流液中天门冬氨酸氨基转换酶(AS
5、T)和丙氨酸氨基转换酶(ALT)的含量,评价中药归脾颗粒剂及其含药血清对大鼠肝脏的影响.1 材料1.1 试剂氧气(纯度95%);肝素钠;四氯化碳;戊巴比妥钠;1640 缓冲灌流液;Krebs-Henseleit 缓冲液;归脾颗粒剂(由浙江省中药研究院提供,规格 3g?袋一,相当于生药 6g),AST 批号:2111/7463/02,ALT 批号:2123/8135,/01,上海申能一德塞诊断技术有限公司.1.2 动物健康 SD 大鼠,(20020)g,旱舍兼用,由本院动物房提供,浙动字医第 229601009 号.1.3 仪器日立 7020 生化分析仪,日立公司生产.2 方法2.1 离体大鼠肝
6、灌流模型制备_1取禁食 12h 的健康大鼠 200250g,用戊巴比妥钠腹腔麻醉,大鼠作腹部正中切口,充分暴露肝门区域,分离出门静脉,肾静脉.从肾静脉注入肝素钠,并结扎肾静脉.迅速作门静脉插管并结扎,开动蠕动泵,肉眼观察肝脏内血液基本冲洗尽后分离肝脏,将游离肝脏放于水浴恒温 37灌流杯上的肝容器内(防止门静脉扭曲).2.2 灌流方法先以(氧饱和 ,水浴恒温 37)KrebsHenselei缓冲液,非循环性的灌流冲洗肝脏中的血液,流速约每克肝脏 2mL?rain.,灌流至肝脏颜色呈土黄色,稳定 5rain 后,用 1640 缓冲灌流液灌流至肝脏中流出液呈红色(1640 灌流液呈红色)后,循环性前
7、向性收稿日期:20030705作者简介:王绪平(1972),女,杭州人,助理研究员,硕士生,从事中药药理研究.电话:0571880822143093.9162004 年 11 月第 26 卷第 11 期中成药ChineseTraditionalPatentMedicineNovember2004Vo1.26No.11的灌流,流速 2mL?rain-.不同剂量的药物分别缓慢注入盛 1640 灌流液的杯中,分次进行灌流,根据设定的取样时间从三通管中用注射器取灌流液0.2mL 备用待测,之后补入相应剂量的空白灌流液.2.3 取样时间设定 0min,给药后 15,30,45,60,90min 分别取样
8、,进行定量分析.2.4 药物剂量归脾颗粒剂 2.5,5.0,10.Og 生药?L-1 灌流液;含不同浓度归脾颗粒剂的血清(0,625,1.25,2.5g?kg 的归脾颗粒剂灌胃大鼠 7d 后采血,以 3000r?rain,5min 离心后取血清);四氯化碳2001?L-1 灌流液.2.5 统计方法实验计量数据采用 t 检验.3 结果3.1 归脾颗粒剂对离体肝灌流液中酶 AST,ALT的影响归脾颗粒剂 2.5,5.0g 生药?L 灌流液对肝灌流液中酶 AST,ALT 无影响,与空白组比较无差异,归脾颗粒剂 10.0g 生药?L-1 灌流液灌流90min 酶 AST,ALT 增加,与空白组比较有差
9、异(见表 1,表 2).四氯化碳组与空白组比较有显着差异,对肝脏有极明显的损伤,提示该模型对酶变化敏感,方法可行.表 1 归脾颗粒剂对酶 AST 的影响(s.n=5JP0.05 与空白组比较有差异,P0.01 与空白组比较有显着差异.3.2 大鼠灌胃归脾颗粒剂 7d 后血清对大鼠肝灌流时间段所测酶含量比较,均无显着差异.提示对肝液中酶 AST,ALT 的影响.各剂量组血清的不同细胞没有影响.(见表 3,表 4)时间段所测灌流液中酶 AST,ALT 含量与空白组同表 3 归脾颗粒剂血清对酶 AST 的影响(s.n=5J“P0.05 与空白组比较有差异,P0.01 与空白组比较有显着差异.4 讨论
10、汤,现代药典收载的“归脾丸“, 乃后世医家在严氏原归脾汤原出宋? 严用和济生方 .该书载:“夫方的基础上加当归 ,远志两药而成,意在增强养心安健忘者,常常喜忘是也.益脾主意和思,心亦主思,神,益智的作用,治心脾两虚之证.归脾颗粒剂是对思虑过度,意舍不精,神宫不职,使人健忘.治之之归脾丸的改进,鉴于气血双补,疗程长,有必要对其法,理心脾,使神意清宁,思则得之矣.“并创制归脾进行多方面的观察.9172004 年 l1 月第 26 卷第 ll 期中成药ChineseTraditionalPatentMedicineNovember2004Vo1.26No.11“P0.05 与空白组比较有差异,P0.
11、01 与空白组比较有显着差异本文运用离体大鼠肝灌液技术,通过测定灌流害,这有待于进一步实验论证.液中天门冬氨酸氨基转换酶(AST)和丙氨酸氨基转综上所述,通过测定肝灌流液中天门冬氨酸氨换酶(ALT)的含量,研究中药归脾颗粒剂对肝脏的基转换酶(AST) 和丙氨酸氨基转换酶(ALT)的含影响.结果表明:归脾颗粒剂 2.5,5.0g 生药?L 量,结果提示归脾颗粒剂对肝脏无毒性影响,这为归灌流液对肝灌流液中酶 AST,ALT 无影响,与空白脾颗粒剂的临床合理用药提供了实验依据.组比较无差异;0.625,1.25,2.5g?kg 的归脾颗粒.剂灌胃大鼠采血,离心后取得的血清灌流大鼠肝脏,灌流不同时间所
12、测灌流液中酶 AST,ALT 含量与空1徐叔云,卞如濂,陈修.药理实验方法学M.第三版.北京:白组同时间所测酶含量比较没有差异.用归脾颗粒人民卫生出版社,2001:13522.剂浓度为 10.Ogf4:_?L 灌流液进行灌流 ,灌流液;HENXiao-bohXiang,.Z_;Din.i-Ping.S 中 ter 国 eo 药 s-中酶的含量随灌流时间而增加,分析其原因可能是理,l998,l9(5):440.浓度大时浓缩液中的杂质,电解质,鞣质成分等非活3何佩珊血清药理学在中药及复方研究中应用的进展Jj.上性物质破坏肝脏代谢平衡所导致肝细胞一定的损海中医药杂志,1998,(5):8.金线草药理
13、作用初步研究黄勇其,骆红梅,陈秀芬,耿晓照,莫艳珠(1.贵阳中医学院药理教研室,贵州贵阳 550002;2.贵阳中医学院第二附属医院中药房,贵州贵阳 550002)关键词:金线草;抗炎;镇痛;抗凝血;毒性摘要:目的:观察金线草茎叶水提取(AES)和根水提物 (AER)的抗炎,镇痛,抗凝血作用及其急性毒性.方法:采用经典的抗炎,镇痛实验及出血时间,LI)50 测定法.结果:不同剂量的 AES 和 AER 能明显抑制小鼠二甲苯致耳廓肿胀(P0.010.05), 腹腔毛细血管通透性(P0.010.05)及棉球肉芽肿增生(P0.05),而不影响小鼠免疫器官指数;且能明显减少醋酸致小鼠扭体次数(P0.0
14、5)及延长热板致痛的潜伏期(P0.010.05);AES 和 AER 能明显延长小鼠断尾出血时间(P0.0010.01),且显示明显量效关系,其中以 AES 中剂量作用最强.茎叶和根小鼠口服耐受量达 70g?l【g-1(相当于 AES4.06g?kg_.,AER3.36gkgI1)12hig2 次;ip 给药,茎叶 LI)50为 9.30.51g?kgI1(相当于 AES0.54g?kgI1),根 LD50 为 40.94.18g?kgI1(相当于 AER1.96g?kgI1).结论: 金线草具有抗炎,镇痛及抗凝血的药理作用,且根的毒性小于茎叶.中图分类号:R285.5 文献标识码:A 文章编号:10011528(2004)l1-091804PharmacologicaleffectofAntenoronfiliformeHUANGYongqi,LUOHongmei,CHENXiufen,GENGXiaozhao,MOYanzhu收稿日期:20031002作者简介:黄勇其(1966),男,讲师,主要从事药理学教学和科研工作.电话:0851-5609744.918
