1、福建省新丙五价钩端螺旋体菌苗接种后反应与免疫效果的观察1020 中国人兽共患病杂志ChineseJournalofZoonoses2005,21(11)文章编号:10022694(2005)11 102004福建省新丙五价钩端螺旋体菌苗接种后反应与免疫效果的观察徐国英,潘敏楠,林光宇,严延生,王灵岚,潘亮摘要:目的对观察对象接种“福建新丙五价“ 钩体茵体苗基础免疫和一年后加强免疫的反应及效果进行观察.方法观察记录各针次疫苗接种后的反应并采集观察对象免疫前及免疫后20d,90d,180d,360d 及再加强免疫后 20d 的 6 份血清,用显微镜凝集试验(MAT)测定各群抗体滴度,以抗体滴度 1
2、:10 为阳性判别标准,计算疫苗接种前后各次各群抗体阳转率和几何平均滴度 GMT.结果观察对象均未出现金身反应 ,局部反应以复种为多,女性复种后反应比男性更严重,差异具有显着性意义.免疫后血清抗体阳转率及几何平均滴度(GMT)均比免疫前有显着的增长,且在免疫后 3 个月阳转率达高蜂为95%以上 ,一年后维持 50%左右,几何平均滴度(GMT)在基础免疫后 1 个月为1:6O 左右,半年后降为 1:2O,一年后为 1:10.再次强化免疫,抗体阳转率迅速上升,高达 100%,几何平均滴度(GMT)上升到1:100.结论“福建新丙五价“ 钩体茵体苗的安全性及免疫效果是肯定的,只要加强钩体病的监测,菌
3、苗的茵型与当地流行茵群吻合并按照规定程序免疫接种,完全可以预防钩体病的流行.关键词:钩端螺旋体新丙五价茵体苗;安全性;免疫效果中图分类号:R377 文献标识码:AObservationontheimmuneefficiencyaftervaccinationwithnewpentavalentwholecellvaccineforleptospirosisinFujianprovinceXUGuo-ying,PANMinnan,LINGuangyu,YANYansheng,WANGLinlan,PANLiang(FujianCentersforDiseasecontrolandpreventi
4、on,Fuztmu350001China)ABSTRACT:TheimmuneefficiencyaftervaccinationwithnewpentavalentwholeeeUvaccineforleptospirosiswasobservedafterbasleimmunizationandenhancedimmunizationoneyearlater,inWhichthereactionsafterinjectionsofvaccinewereobservedandrecorded,andthebloodsamplesofstudentsreceivingvaccinationwe
5、reconectedbeforeand20,90,180,and360daysaftervaccinationincaseofbasicimmunizationand20daysaftertheenhancedimmunizationinordertodeterminetheantibodyproductionafterimmunization.Theantibodytitersinthebloodsampleswereassayedbymicroscopicagglutinationtest(MAT),andthepositiveser0 一conversionratesandthegeom
6、etricmeantiter(GMT)werethencalculated.ItWasfoundthatnogeneralreactionWasobservedinalltheindividualsimmunizedwiththisvaccine,andtheloealreactionswerecommonlyobservedinthereinoculatedsubjects,oreheavierinfemalesthaninmales.Afterimmunization,thepositiveseroconveionratesandGMTshowedsignificantincreases,
7、inwhichtheformerreacheditshighestvalue3monthsafterimmunizationupto95%andmmntainedupto50%foroneyear,whilethelatterWas1:60at2Oday3afterimmunizationanddroppedto1:20halfyearlater.However,afterenhancedimmunization,thepositiveser0 一conversionratesandGMTelevatedveryrapidly,theywere100%and1:100respectively.
8、Itisevidentthatthesafetyandtheprotecfivelevdofthisvaccinearequitedefinite.KEYWORDS:newpentavalentleptospirawholecellvaccine;safety;Immunologicaleffect福建省钩端螺旋体病(钩体)病,历来是我省常见的自然疫源性疾病,近年来我省个别县市钩体病发病数有明显上升趋势,局部发生暴发流行,甚至有死亡病例的报告,而注射钩体菌苗是预防钩体病的主要手段之一.我省个别地区曾进行钩体五价苗的免疫接种,但初步结果认为保护力不高,为进一步了解考核新丙五价钩体菌苗(于九十年代
9、初根据钩体菌群更迭现象而更改的)接种后的反应状况,人群的抗体水平及强化免疫后的免疫保护效果,为今后指导某些特殊人群提供免疫保护以及为再次强化一针作者单位:1.福建省疾病控制中心.福州 350001;2.南平市疾病控制中心2005,21(11)中国人兽共患病杂志ChineseJournalofZoonoses1021的保护性免疫措施提供依据,我们于 2004 年 3 月2005 年 5 月选择从未接种过该菌苗的武夷山市某中学的学生为观察对象,对该五价苗的安全性及免疫效果进行考核,现将结果报告如下:1 对象和方法1.1 菌苗“福建新丙五价 “钩体菌苗内含黄疸出血群,犬群,秋季热群,流感伤寒群和七日
10、热群 5 个菌型(各占 25%),由上海生物制品研究所生产,批号分别为 2003030502 和 2004030302,接种方法,剂量及注意事项均严格按制品说明书进行.1.2 接种对象选择非流行区的武夷山市某中学1315 岁健康中学生为观察对象,禁忌症除外.1.3 免疫方法及反应观察皮下注射并于注射后24h,48h,72h 检查注射部位有否红肿,并测量肿块的平均直径,并记录全身反应,判断标准参照预防接种手册【l】.1.4 血清抗体测定:接种对象于免疫前,免疫后 20d,90d,180d,360d 及一年再次强化免疫后 20d 共抽血 6 次,分离血清置低温保存,每批血清一次性进行钩体显微镜凝集
11、试验(MAT),分别测定各群抗体滴度.1.5 接种后人体血清抗体阳转观察免疫前抗体滴度1:10 为接种对象,免疫后抗体1:10 为阳转.2 结果2.1 接种后反应观察共接种三次,首次免疫接种(第一针)201 人,间隔 7 天后再次接种(第二针)162人,一年后强化免疫接种(第三针)69 人,均未出现全身反应(如发热,皮疹,头痛,乏力等),局部反应为:接种 24h 后,第一针有 15 例(15/201=7.46%)出现弱反应,第二针有 12 例(12/162=7.41%)出现弱反应,5 例(5/162=3.09%)出现中反应,一年后加强免疫接种 69 人,均是在一年前已接种该菌苗两针后再次强化免
12、疫者,其 24h 弱反应及中反应分别为 11 例(11/69=15.94%)和 6 例(6/69=8.70%),48h 为 8 例(8/69=11.59%)和 2 例(2/69=2.90%),72h 为 7 例(7/69=10.14%)和 1 例(1/69=1.45%),经与预防接种手册报告的一般疫苗出现的反应结果 24h 局部弱反应占 8.29%,中反应 5.86%,48h 后明显减低相比,第一针,第二针,第三针差异均无显着性.具体见表 1.2.2 血清抗体的观察用 MAT 测定免疫前及免疫后不同时间人群抗体的消长动态,见表 2.表 1 钩体菌苗不同接种次数接种后局部反应的观察*Table.
13、1Localreactionafterimmnnitionwithpentavalentteptosptr 口 wholecellvaccine*注:弱反应为红晕平均直径2.5cm,中反应为红晕平均直 2.5-5.0cm.不同性别接种“ 福建新丙五价“ 钩体菌苗后 .局部反应观察,男性 216 人,女性 216 人,其中弱反应男性 15 人,女性 33 人,中反应男性 3 人,女性 8 人,经统计学处理(x2=10.60,P0.oi)差异有显着性.表 2 钩体五价苗免疫后不同时间抗体水平测定结果Table?2pesitiveseroconversionratesafterdifferentim
14、munizationPeriodswithpentavalentPf 珊 f,口 wholecellvaccine*注:()为阳性百分率1022中国人兽共患病杂志 ChineseJournalofZoonoses2005,21(11)由表 2 可以看出,接种疫苗前,该人群本底隐性感染率较低仅为 2.64%,接种疫苗后血清抗体阳转率在免疫后 3 个月左右达 100%且每个群均可高达95%以上 ,为最高峰,6 个月后,各个群血清抗体阳性率降为 70%,而黄疽出血群和七日热群更低些,仅为 55.93%和 64.41%,一年以后,各群血清抗体阳转率下降不明显,仍维持在 50%以上,可能受抽检人数少仅为
15、 69 人有关,强化免疫注射后,血清抗体阳转率迅速上升,几乎五个群达 100%阳转,除秋季热群 1 人除外.表 3 钧体五价苗免疫后不同时间抗体 GMT 比较Table.3ComparisonofGMTafterdifferentimmunizationPeriodswithpentavalentleptospirawholecellvaccine选择 6 次均参加采血的人群进行计算.从表 3 发现接种疫苗后血清抗体几何平均滴度GMT 在免疫后 20d 即 1 个月左右达高峰,半年后降为 1:20 左右,一年后为 1:10 左右.强化免疫后,各群的 GMT 高达 1:100 以上,有的甚至达
16、1:200以上.3 讨论3.1 上述观察结果表明,“福建新丙五价 “钩体菌苗的接种反应的安全指标均在国家规定允许范围内 C13,未出现全身反应,仅在复种的人群中出现较高的轻中度反应,个别人出现强反应,与马占瑞1964 年的调查结果相似【,即复种和多次接种的人易于出现过敏和全身反应,故再次验证该疫苗用于人群接种是安全的.但男女之间接种反应的程度不一,女性比男性反应更强,未见有关这方面的报道,是否女性更敏感还是其它方面的原因有待进一步研究.3.2 从免疫人群抗体水平分析,不论是血清抗体阳转率还是几何平均滴度 GMT,均比免疫前的隐性感染率 2.64%有显着的增长,且阳转率在免疫后 3 个月达高峰,
17、达 95%以上,一年后仍维持在 50%左右,强化免疫后,抗体阳转率迅速上升,五群几乎高达100%,除秋季热群为 98.55%外,血清抗体几何平均滴度 GMT 的消长情况也与抗体阳转率基本一致,GMT 在一个月左右达高峰,达 1:60 以上,半年后降为 1:20,一年后为 1:10 左右,强化注射后 20d滴度迅速上升至 1:100 以上,且比基础免疫两针后一个月的 1:60 高出许多,证实该五价菌苗的免疫效果一般维持在一年左右,若要继续维护其保护效果,需每年强化注射,与贵州省和湖北省站的调查结果基本吻合 C2】,即需在基础免疫后每年加强免疫一次,可获预防效果.3.3 关于钩体疫苗的免疫效果,过
18、去国内外做过较多的报道,根据 Philips(3】 及 Bumstein(】认为钩体MAT 抗体在 1:101:100 即有保护作用,国内文献 C5】 报道 MAT 抗体1:20 是保护人体不发病的最低滴度,本次试验结果表明基础免疫两针一年以后,其每个群抗体的阳转率只有 50%是大于 1:10,再次强化后一个月左右,血清抗体几乎全部菌群的GMT1:10,其中某些群最高滴度可高达 1:1280.故认为该五价苗的免疫效果是肯定的.同时加强免疫是提高保护率的重要措施.3.4 目前我国钩体菌苗已发展至使用钩体外膜菌苗的阶段,此新研制成功的钩体外膜菌苗经多次人体接种观察,表明外膜苗接种一针的免疫效果高于
19、菌体苗两针的效果,即可降低反应发生率,减少接种次数,提高抗体水平,一年后黄疽出血群和七日热群血清抗体 GMT 仍可达 1:26.43 和 1:19.03C6).虽然外膜苗免疫效果和保护率较理想,但经济学研究结果显示,其各年龄组的成本效益指标均1,其价格较高,保护型别不多 C7),故还没有完全取代钩体菌体苗.这次结果再次证实,只要按照规定要求进行免疫,菌苗成份符合当地流行菌群,完全可以预防钩体病的流行,我省这十几年钩体病未出现较大面积的流行与重点疫区每年加强疫苗的注射是分不开的.3.5 由于钩体菌群的多样性,不同地区流行的菌群2005,21(11)中国人兽共患病杂志ChineseJournalo
20、fZoonoses1023是不同,故不同地区所用的菌苗效果的观察,其菌苗的组分是不同的.有的是两价的,有的是三价或四价的,有的为五价,而菌苗的预防效果主要取决于(1)其组成型别是否与当地流行的主要血清型一致;(2)取决于其含菌数的多少和接种次数,两针的效果优于一针.同时为使菌苗获得应有的预防功效,不仅在制造前需摸清当地的流行型别.而且实际应用中应作应用调查与效果考核.现我省使用的“福建新丙五价“钩体菌苗是 90 年代初根据当时的情况由原来的丙五价变更提出的配方【8】,经过十多年的时间及钩体病流行状况的改变,2002 年我们对我省钩体病重点地区进行了调查,发现有的地区人群血清中某些钩体菌群型别构
21、成比超过 50%是钩体菌苗外成份,【9】故每个地区流行的钩体菌群会随着时间的变化而发生更迭现象,尤其是我省钩体流行菌群复杂,流行型别各地不一,更应加强监测工作,随时掌握菌群变化及人群免疫水平,为钩体病的防治和菌苗的配方提供科学的依据.参考文献:1迮文远.预防接种手册)M. 上海科技技术文献出版社,第一版,1997.1415.2于恩庶,等主编 钩端螺旋体病学)M. 北京: 人民卫生出版社,第二版,1992.385386.3PhiliCE,AntibodyrespI3nSeofcametoL.PomonaJ.VeterMed.1958,53:301.41BurnsteinL,etalAnIrnme
22、mcagelltfortheptectionofca 砌 eainstL,PomonaJ.VeterMed.1957:5358.5卫生部上海生物制品研究所,等.钩体新菌苗人群接种后反应与免疫效果观察,学术论文选编,1989,8:57.6孙文浩,程均福 ,等钩体外膜疫苗免疫效果进一步观察J.中国计划免疫,2001,7(4):224 226.7孙文浩,谢广中 ,钩体外膜疫苗大规模预防接种可行性评价J.中国计划免疫 2002,8(1):4245.8严志平,福建丙五价钩端螺旋体安全性,免疫性及现场预防的流行病学效果观察J.福建卫生防疫 1990,2i(12);3537.9徐国英,杨婷婷 ,等,福建省
23、2002 年钩端螺旋体病病原学及血清学调查结果分析J.疾病监测,2003,18(11):425427.收稿日期:20051005(上接第 1029 页)5.2 发病鹿用复方磺胺间甲氧嘧啶注射液 1020mg/kg 体重的剂量肌肉注射,1 次/d,连用 3d.恩诺沙星注射液 5mg/kg 体重肌肉注射,2 次/d,连用 3d.同时配合维生素 B1 及维生素 C 注射液各 5ml 混合一次肌注.5.3 加强饲养管理,对未发病 5 只鹿在日粮中适量增加维生素 A,B12,E 及一些矿物质,增强兔体抵抗力.同时在日粮中添加复方敌菌净.每 30rag/kg 体重,2 次/d.连饮 4-5d.6 讨论与小
24、结6.1 根据流行病学,临床症状,病理变化及实验室诊断综合鉴定为弓形体与李氏杆菌混合感染.该病发病急,死亡率高,应及早诊断和治疗,后期治疗效果极差.6.2 弓形体发生的主要原因是由于感染弓形体并作为终末宿主的猫,猫自由出入场区及仓库,粪便污染环境,饲料及饮水,特别是污染了仓库内的饲料.加之老鼠吃了污染的饲料后也被感染,在仓库内排粪排尿,使污染更加严重,鹿食用被污染的饲料后造成本病的暴发性流行.所以场内应严禁养猫,或禁止猫随便出入场区,更不能到仓库内.并注意灭鼠工作,以杜绝本病的传播流行,这是行之有效的方法.6.3 据调查,该鹿舍是由猪舍改造而成,并且在养猪时曾经发生过猪的弓形体病,本次疾病的发生可能与上述原因有关.加上长途运输应激,机体抵抗力较差而诱发本病.6.4 由于弓形体病和李氏杆菌病是人畜共患病,因此在剖检时,一定要注重自身的保护.
