1、志贺氏菌中发现一种新的和铁转运有关的基因簇2 孕产妇死亡原目及顺位:由表 2 可见,最重要的死亡原因是产科出血,占全部死亡的一半以上,此外妊高症占 19.16%.表 2 青海省互助县孕产妇死亡及顺位3.孕产妇分娩地点,方式和死亡分析:由表 3可见,在家中分娩的死亡所占比例最高,占6168%,如果加上在途中分娩,则非住院分娩的死亡占到 7523%.家中分娩旧法接生相当高,是造成死亡的重要原因.表 3 孕产妇死亡地点分析家中途中乡上医院合计4.死亡孕产妇病例评审结果:县成立专门小组对每例孕产妇死亡进行评审,将死亡分为可避免死亡,指如果做好产前检查,高危管理,进行住院分娩,或采取必要措施等,可以不造
2、成死亡;不可避免死亡指,即使住院分娩,死亡也难以避免,如有些妊高症,羊水栓塞等,见表 4.表 4 孕产妇死亡病侧评审5.孕产妇死亡与文化程度的关系:从表 5 可见,孕产妇死亡中文盲占 76.64%,小学占17.76%,二者共占 94.4%,显然文化程度低与孕产妇死亡有明显关系.表 51989D 年孕产妇死亡与文化程度的关系讨论由于我县经济文化比较落后,交通不便,在死亡的 214 例孕产妇中有 l27 例困家庭困难而未做产前检查.在死亡的 214 倒孕产妇中有 182 例居住在脑山和浅山地区,这些地区除乡政府所在地区交通方便外,大部分行政村和自然村无交通车,仅有的原始工具为手扶拖拉机,从而对广大
3、妇女的就医带来了很大困难和不便,多数在家中生产.我县的乡,村两级妇幼人员的专业技术较差,对出现的产科出血,妊高症没有准确及时的应急措施和技能,造成大部分死亡孕产妇延误抢救时机.根据造成孕产妇死亡的原因,我们认为除了加快当地经济发展和加速脱贫步伐外,应结合卫生项目)改善中国农村贫困地区基本卫生服务项目),开展 “母亲安全“和“降低孕产妇死亡率和消除新生儿破伤风“,大力提倡住院分娩 .加强培训提高县乡村三级专业人员的业务素质,提高围产期保健质量,识别高危孕妇并及时的诊治或转诊,掌握产科出血和妊高症等的诊断,急救措施志贺氏菌中发现一种新的和铁转运有关的基因簇任志鸿,卢珊,张晶波,徐建国(中国预防医学
4、科学院流行病学微生物学研究所,北京昌平 1o22o6)中图分类号R378.2+1 文献标识码 A文章编号l0.39961(21)lO 一 040003许多革兰氏阴性致病菌的生长需要铁,但宿主体内的游离铁比较缺乏.在低铁条件下,多数大肠收稿日期20.109 一 l9;修定日期20.1 一 lO 一作者简介 任志鸿 (197o 一). 女.博士后,占 L 事肠道菌致病基因研究杆菌和志贺氏菌可以表达多个高度亲和铁的转运系统.这些铁载体是指可螯合铁的可溶性的小分子,经特殊的转运系统将铁摄人到细菌体内 K 丑.等报道在尿道致病性大肠杆菌(uc)c 丌 D73 菌株的 PAI 盯毒力岛中有 4 个基因 p
5、modDyc73 一 fepc,其编码基因的氨基酸序列的同源性比较结果提示可能与铁转运有关.Ye 等发现该基因簇只在产生志贺毒素的大肠杆菌 0157:H7 中存在,在不产生志贺毒素的大肠杆菌 0157:H7 菌株中检测不到,提示可能和细菌的毒力有关 J 为了解志贺氏菌中有无该基因簇和 PAIc 丌町毒力岛,我们于 2001 年对 43 株各种血清型的志贺氏菌和其他几种病原菌进行了检测,现将结果报道如下.实验材料与方法株志贺氏菌(A 群 12 株,B 群 11 株,C 群 18 株,D群 2 株),均购自中国生物制品药品检定所;1 株出肠血性大肠杆菌 EHEC(EDL 一 933)为国际标准菌株
6、.2.对照菌株:国际标准菌株尿道致病性大肠杆菌 UPEC(Cbq973)作为阳性对照菌株,K 一 12 菌株(MG1655)为阴性对照菌株,国际标准菌株为本实验室保藏菌种.3.方法:采用 PCR 与 DNA 杂交方法进行检测.根据 UPEC(CFTo73)菌株的毒力岛 PA的桉苷酸序列设计引物,各引物序列,反应条件及1.实验菌株:包括沙门氏菌(6 株),霍乱弧菌部分检测结果见附表.利用地高辛试剂盒,将扩增(4 株),耶尔森氏菌 (3 株),枸橼酸杆菌 (1 株),金出的特异的 DNA 片段标记为探针,进行打点原位黄色葡萄球菌(1 株), 肺炎克雷伯氏菌(1 株) 和 43 杂交,杂交后按试剂盒
7、说明书进行显色.附表 PA 一毒力岛上部分基因的检测引物,反应条件丑检测结果基因引物序列(5一 3.)产物太小 ()退出温度()EKECLqEC 志贺氏菌prrAF:吐 B 培喏 g47955 十十十H:.cda 棚 g 髓【龇molDF:tgcctgttg.ggactaam37855 十十+僻岛肚 gc73F:gcgaagccgtctgattat43756+R:calctc0 岫F:taect,cgataatgetgtcgg34755+H:atggtgttgatggggctggenF:aitelcaltect】0052.1 一十一mclmn.c【p 印 DF:艘 a 岫 caa 噼.c 叫啪
8、 42452.5 一十一R:tcccllcctct 田 cd 日 cn结果我们发现除了阳性对照菌株 UPEC(CFIU73),在 EHEC(EDL933)和福氏 2A 志贺氏菌 301 菌株中都检测到 prrAmodDyc73 一 fepC 基因簇.在沙门氏菌,霍乱弧菌,耶尔森氏菌,枸橼酸杆菌,金黄色葡萄球菌及 Kl2 阴性对照菌株中却未能检测到.在福氏 2A 志贺氏菌 301 菌株中存在 prrA 一dDvc73 一c 基因簇是本研究的新发现 .为进一步了.解 prrAmodDyc73 一 C 基因簇在其他血清型的志贺氏菌中存在的频率,我们对 43 株各种血清型的志贺氏菌菌株进行了检测.结果
9、发现在 43 株志贺氏菌中,共有 1l 株菌 prrAmodDy:3 一 fepC 基因簇的 4 个基因均为阳性,说明这 4个基因是成簇出现的.主要存在于 B 群志贺氏菌(8/11),A 群(2/12)和 c 群(1/18)较少本研究证实,除了产生志贺毒素的大肠杆菌 0157:H7 外,在志贺氏菌,特别是 B 群志贺氏菌中,prrAmodDyc731pc 基因簇的存在较普遍.对 u 一 modDyc73 一 fepc 基因簇阳性的菌株进行 PAk 丌 U 刀毒力岛的溶血素基因(hlvA) 和菌毛基因(papD) 检测,结果均为阴性,表明这些 prrA 一 dDyc73 一 f+pc基因簇阳性的
10、菌株不含有 PAIc 毒力岛所编码的其他毒力因子,如:溶血素基因和菌毛.提示该基因簇与队 Ic 毒力岛是可相互独立 ,彼此分开的,该基因簇可能是一个新的毒力岛.讨论根据 BLueST 的序列比较分析结果,prrAmodDye73 一 fepc 基因簇与铁转运有关.prrA 基因与球红细菌的 prrA 基因同源而得名 ,可能编码TonB 依赖的外膜受体.已知 pmBC 基因簇在球红细菌中参与光合成.prrA(photosyntheticmsponseregulatorA)基因在球红细菌 ICM 形成过程中是全局调控子,在表达水平上调光合成基因的表达.prrB 编码膜结合的组氨酸激酶,prrC 编
11、码膜相关蛋白家族的成员,其功能尚不明确,但可能涉及信号传导机制.口基因在口_AmodOyc73 一fepC 基因簇中可能发挥 TonB 依赖的外膜蛋白受体的作用.modD 基因与钼代谢有关的 riKidD 基因同源而得名.ImtABCD 基因簇编码钼特异的转运系统.modA 编码钼特异的周质结台蛋白(periplasmicbmdingprotein),rrmdB 是内膜蛋白 ,与 ATP 结台转运系统同源,modC 为 ATP 结台的能量蛋白,modD 与已知序列无同源性,缺失后表型无明显改变,提示 modD 并非钼转运所必需的,modE 是 nK*1.ABCD 的抑制子 j 根据目前的分析资
12、料 ,无法推测 modD 基因的功能.Yc73 和流感嗜血杆菌的Yc73 蛋白同源而得名 .f 印 c(putativeironcompoundABCtransporterrPbindingprotein)可能编码高铁肠杆菌素转运 ATP 结合蛋白.已知致病菌摄取铁的机制之一是分泌一些低分子量的铁载体,对铁有极高的亲和力,通过特异的膜受体,将铁转运至细胞内肠杆菌素是儿茶酚类铁载体之.feD 是肠杆菌素的转运基因,其合成基因(ent), 转运基因(f 印),释放基因() 成簇存在 ,广泛分布在沙门氏菌,大肠杆菌,志贺氏菌中.fepA 是外膜受体蛋白,结台肠杆菌素将其转运至细胞周质 fepB 是周
13、质结合蛋白,可有效将含铁肠杆菌素转运至胞浆.fepCDG 是胞浆膜转运系统,属 ABC 转运家族成员,fepD 编码内膜蛋白,其中 pc 为 ATP 结台蛋白,fepG 编码内膜通透酶.prrAmodDyc73 一pc 基因簇具有 T0nB 依赖的外膜蛋白受体(prrA),以及肠杆菌素的转运基因(fepCG)的同源基因,很可能也是参与了 ABC 转运系统.目前推测该基因簇可能与铁载体一肠杆菌素的转运有关,但在大肠杆菌中的明确功能和作用尚有待研究.志贺氏菌的检测结果提示 D 一 nxxtDyc73一fepc 基因簇具有毒力岛的性质,可能是一个新的毒力岛 prrAmodDyc73 一 fepc 基
14、因簇在志贺氏菌的 B 群分布较广,在其他群检测率较低的结果提示,prrA rrmdDyc73 一 fe 基因簇可能和不同群的志贺氏菌临床症状,流行病学特点的不同有9k:0参考文献【1JKao.JS.Smeker.D.M,WarrenJ.W,畦 al1997Patho.getdci,islandseqlcesofdonephritogetdeEseberlehiacot;CHlY73areas/atedwithv/ruleat 呷10nstrrrs(J).In-feetl6528l22820.【2JYe,C?xuJG2)01n 刊 ofirentransportgoilp.一gdcilyas/a
15、tedislandofutoogenicEschetSchiacoilinE.coilOl57;H7mntainingSigatoAn“e(J)JClin.Micn3oiol39:23一 2305.13J,DM,Kao,JS.andMobley,H.L1 螂 Gelornlo-analysisofcmc 畸 islandin0P1cEekmnddao315Ct:T073:d/stbelionhologousamongislatfromp 帅 eswithp1 珊 phnde,cystitis,andc 吐 b 研一 a.iatedbacte-riuriafecalsample(JJInfect
16、Inmmn66:44ll 一 44l74Ogara,JPEmso,JM,Kaplan.S1998Aredox 一嘴叩【】sB,eEmthwayfrobicregulaBanofph,:,to3,tuhesisgonee挫 si【min胁 od 曲刚盯口邗 d 越 41(J)J.Baztal180:4O444050【5JE 一,JM.Kaplat.S1994p,putatiemgulalorinvolvedinogenregulationgeneexpresslinBhthaulersphaemides(JjJBacterial176:3243L6JMaupinFuriot,JA.RDs.JK,
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18、eEsehefidfiacdpaproteinfepB(J)J.Bae?teriol182:53595364:9Mceck.GS.Let4lier1.21ChamzCedzatiofin 帅 interacfiombetweencmtIBproteinfranEsehe4fiaoIandtheOtlteFmerecept“$Iand A(J).JBaete4a1.,183:2g 一 2主编:祁国明编辑室主任:王庆禧疾病监测中国预防医学科学院主办月刊每月 30 日出版编辑:中国预防医学科学院疾病监测杂志编委会编辑室地址:北京南纬路 27 号邮政编码:100050 电话:(01o)63186655
19、 转 2930,或(010)6315%79出版:中国预防医学科学院流行病学微生物学研究所发行:北京报刊发行局总发行,全国各地邮局订购邮发代号:82 一59印刷:北京文康印刷厂DiseaseSurveillanceispubbdmoneybytheInstituteofEpidemioloandMicrobiology,ChineseAcademyofPreventiveMedicine27NanWeiRoad,Being,c血 a100050Tel:(OlO)63186655exteasion2930ol-(010)6315%79IN1003-9961(国际标准刊号)CNll2928/n(国内统一刊号)邮发代号:广告经营许可证:京崇工商广字 00l8 号定价 3.00 元828592OO1 年第 16 卷第 10 期(总 19o 期)
